单次注入前向运动精子数对不同类型不孕夫妇IUI 成功率的影响

刘素芳 马刚 陈肖东

近年来，随着社会的进步，人们生活水平有了巨大提高。然而快节奏高品质的生活同样给人们带来了传宗接代上的巨大危机:工作生活的压力、各种辐射污染、食品污染、汽车尾气污染等，使不孕夫妇的比例逐年提高［1］。医疗工作者不断研究探讨辅助生殖的手段和技术，从而衍生出多种诸如人工受精、试管婴儿的技术。宫腔内人工授精(IUI)［2］是将精液经过优选处理后置于女性子宫腔内，通过精子和卵子的自然结合达到妊娠的目的的一种辅助生殖技术。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择我院生殖门诊和兄弟医院100 对不孕夫妇为研究对象。其为年龄、不孕年限、促排卵方案、人工授精时机、精液处理方式、注入悬液体积及受精周期数基本相同的合法夫妇患者，共215 周期。双方均行全身性检查，排除其他系统疾病、遗传性疾病以及传染性疾病等。女方经输卵管通液或造影，排除输卵管性不育，排除其他内分泌异常、排卵异常。平均年龄(28±5)岁;不孕年限1 ～2 年;促排卵方案:一致;人工授精时机:一致［注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后24 ～36 h)］;精液处理方式:均为密度梯度离心法［3］:注入悬液体积:均为0.5 ml;受精周期均≤3。分别按不同不孕原因分组(男女均有问题者排除)，男性因素组(A 组)61 周期，女性因素组(B 组)94 周期、免疫因素组(C 组)24 周期及不明原因组(D组)36 周期。

1.2 方法

1.2.1 女方监测排卵与人工授精时机:采用促排卵周期:克罗米芬(CC)和(或)促性腺激素(Gn)诱导排卵。卵泡生长和子宫内膜通过阴道B 超监测，记录输卵管通畅侧优势卵泡的数目。单次排卵前授精:当优势卵泡直径达16 ～20 mm，尿LH 阳性者，肌内注射HCG 5 000 ～10 000 U，注射HCG 后24 ～36 h后行IUI［4］。

1.2.2 精液采集与处理:按WHO 标准，嘱男方禁欲3 ～5 d［5］，在IUI 日手淫法留取精液于无菌杯中，放入37℃温箱充分液化30 min。把1.5 ml 90%Sperm Grad TM(Vitrolife)置于15 ml 锥形离心管中，用巴斯德吸管抽1.5 ml 45%Sperm Grad TM 放置于90%Sperm Grad TM 上，小心轻柔地把液化的精液放置在45%Sperm Grad TM 上350 ～1 000 g 离心20 min，取沉渣用4.0 ml 平衡过的Sperm Rinse30(Vitrolife)洗精培养液混悬，350 g 离心10 min，取沉渣用0.5 ml Sperm Rinse 30 或IVF-30 培养液混悬，用精子分析仪(北京伟力)计数并计算前向运动精子数目记录待用。

1.2.3 IUI 手术:患者取膀胱截石位，暴露宫颈后，用0.9%氯化钠溶液或庆大霉素清洁宫颈及阴道穹隆部，用1 ml 的注射器与特制的无损伤导管连接，一次性使用医用导管，吸取经处理后的精子悬液0.5 ml，将导管轻轻放入宫腔，于2 ～3 min 将精子悬液注入后，缓慢取出导管，嘱患者术后臀高位仰卧30 ～60 min后离开。

1.3 黄体支持及临床结局观察所有接受IUI 的女性术后均接受黄体支持。人工授精后14 d 抽血作HCG 测定，阳性定为生化妊娠，IUI 后5 周阴道B 超发现宫内孕囊和原始心管搏动，确诊为临床妊娠。

1.4 统计学分析应用SPSS 14.0 统计软件，计数资料采用χ2检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

将4 组不同注入前向运动精子数量范围分为:Ⅰ ＜3×106，Ⅱ3×106～19×106，Ⅲ20×106～35×106，Ⅳ＞35×106四档，分别计算相应范围内的妊娠率。见表1。

表1 注入前向运动精子数量范围与4 组内相应成功率例(%)

3 讨论

比较4 组间相同注射浓度的患者成功率以及4 组内不同注射浓度的患者成功率之间的差异性，确定各因素患者最适宜的注射浓度，从而指导医生针对不同类型患者采取最佳的治疗方法。各种因素导致的不孕患者在注射不同浓度处理后精子接受IUI 之后的成功率采用分割表的卡方检验进行相互之间的两两比较，发现男性因素组、免疫因素组、不明原因组各组之间相同浓度下妊娠率差异无统计学意义(P ＞0.05)。但这3组分别与女性因素组比较不同注射浓度下的妊娠率，发现差异有统计学意义(P ＜0.05)。另外发现男性因素组、免疫因素组、不明原因组各注射浓度间妊娠率均存在显著性差异(P ＜0.05)。而女性因素组只有Ⅱ3×106～20×106，Ⅲ20×106～35×106浓度下的妊娠率差异无统计学意义(P ＞0.05)。综上分析IUI 对各种因素导致的不孕症均有一定疗效，但对女性因素导致的不孕疗效比其它因素略差。而且在单次注入前向运动精子数低于或高于某一范围后，各因素不孕患者行IUI 后均得不到高的妊娠率。男性因素组、免疫因素组、不明原因组最佳注入数目范围为20×106～35×106，而女性因素组在3×106～20×106，20×106～35×1062 个范围内有相近的较高的妊娠率。

综上显示，IUI 对男性因素、女性因素、免疫因素［6］及不明原因导致的不孕均有较好的疗效，其中女性因素的疗效比其它3 组略差，其它3 组疗效相互之间无明显差异。也就是说精液的优化处理和注入宫腔对一些有排卵障碍等其它女性不孕因素占主导的患者没有太大效果。单次注入宫腔数目过高或过低的前向运动精子均没有好的妊娠结局。数目过低可能降低了精卵见面的机会局部达不到受精的最低浓度;而数目过高可能引起宫缩使精子实际与卵子接触的浓度过低从而达不到受精的目的，也有可能有其他因素。采用IUI 进行辅助生殖，从男性角度讲，减少了精子与卵子相会的阻力(直接注入宫腔)，通过精液洗涤处理，使各种少弱精患者有了相当数量、质量可与卵子结合的精子，增大了局部受精的精子浓度，洗精过程又洗掉了一些黏着精子头部的抗体复合物［7］，培养液又给精子提供了适当的pH 值和渗透压环境，使得妊娠的几率大大增高;而从女性角度讲，克服了宫颈畸形等障碍导致的与卵子相会精子数量不足的障碍，精确了排卵时间，增加了精卵相会的几率另外通过促排卵方案增加了成熟卵的数量，从而从各个方面增加了妊娠几率。但是由于个人的操作习惯、病患生育年龄过大等各种因素目前报道的IUI 的成功率仅有15%～25%。本文挑选了患者基本情况相似按不同病因分组，从而在排除其它若干可能的影响因素后，更客观单一的研讨了注入前向运动精子数目对各种不孕患者行IUI 成功率的影响。有助于指导临床医生针对该不孕年龄段不同类型的患者进行综合分析，采取个性化方案，从而获得更好的治疗效果，给更多的不孕患者送去福音。

1 郝向东，王文立，闫香婷，等.宫腹腔镜联合手术诊治不孕症临床分析.河北医药，2011，33:685-686.

2 赵冬梅，谭丽，孙丽君，等.宫腔内人工授精成功相关因素分析.中国男科学杂志，2001，15:190-192.

3 黄娟华，刘炜培，张羽虹，等.90%Percoll 单层梯度离心法在宫腔内人工授精中的应用.中国优生与遗传杂志，2002，10:105-106.

4 赵芳，孙莹璞，苏迎春.影响宫腔内人工授精临床妊娠率的相关因素分析.疑难病杂志，2009，8:121.

5 王丽，许成岩，陈子江，等. 禁欲时间对人类精液参数的影响.中国男科杂志，2007，8:21-23.

6 Robinson JN，Forman RG，Nicholson SC，et al.A comparison of int rauterine insemination in super ovulated cycles to intercourse in couples where the male is receiving steroids for the t reatment of autoimmune infertility.Fertil Steril，1995，63:1260.

7 胡京美，颜军昊，李媛，等.混匀上游法人工授精治疗抗精子抗体阳性不孕症患者的效果.重庆医学，2005，34:1523-1524.