XE－5000检测网织血小板在血液病中的临床应用

蔡早育，戴伟良（广东省佛山市第一人民医院检验科 528000）

网织血小板（IPF）是新近从骨髓中释放的血小板，可反映骨髓中红系生成状态，具有较高的止血活性［1］。测定外周血IPF能反映骨髓中巨核细胞产生血小板的状态。Sysmex XE－5000是较先进的全自动血细胞分析仪，其用于外周血IPF检查的敏感性和特异性较好［2］。作者用XE－5000检测网织血小板来协助诊断血液疾病，取得了较好的效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选自本院门诊及住院患者，其中特发性血小板减少性紫癜（ITP）32例、再生障碍性贫血（AA）30例、急性淋巴细胞白血病（ALL）35例、急性单核细胞白血病（AML）35例、急性早幼粒细胞白血病（APL）35例、慢性粒细胞白血病（CGL）和骨髓增生异常综合征（MDS）各10例，所有疾病诊断均通过骨髓细胞学及细胞化学染色确认。另选取本院健康体检者30例，其中男16例，女14例，年龄7～68岁，平均年龄（37.5±4.5）岁。

1.2 检测方法 Sysmex XE－5000血细胞分析仪及配套原装试剂，仪器按规定校正，每次测试前采用原装质控物测试在控。病例组与健康对照组于入院当日、ITP组治疗后的清晨空腹采集静脉血2mL，放入15%乙二胺四乙酸二钾抗凝真空管中混匀，标本不能有溶血或凝块，不能使用振摇器混匀标本［3］。应用XE－5000全自动血细胞分析仪进行血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）、网织血小板比值（IPF%）和网织血小板绝对值［IPF（×109／L）］检测。

1.3 统计学方法 用SPSS11.5统计学软件进行统计学分析。以表示计量资料，各组间结果的比较采用单因素方差分析，计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组的PLT、IPF%、IPF、MPV与健康对照组比较 （1）PLT：CGL组的PLT显著高于健康对照组（P＜0.05），其他各组显著低于健康对照组（P＜0.05）。（2）IPF%：ITP组、CGL组的IPF%显著高于健康对照组（P＜0.05），其他各组与健康对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）IPF：CGL组的IPF显著高于健康对照组（P＜0.05），其他各组与健康对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。（4）MPV：ITP组的 MPV显著高于健康对照组（P＜0.05）。其他各组与健康对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 各组PLT、IPF%、IPF、MPV检测结果（）

表1 各组PLT、IPF%、IPF、MPV检测结果（）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.05。

组别 PLT（×109／L） IPF% IPF（×109／L） MPV（fL）健康对照组 225.81±15.15 2.65±1.21 5.81±1.56 11.25±1.67疾病组ITP 38.15±16.53＊ 17.92±6.18＊ 4.85±1.23 12.88±2.12＊AA 30.96±16.02＊ 3.87±1.45 1.84±0.21 10.31±1.53 ALL 68.27±12.21＊ 5.75±2.89 8.28±3.35 11.57±1.56 AML 66.83±15.23＊ 5.89±1.79 8.45±2.98 11.62±1.78 APL 67.12±14.56＊ 5.45±1.23 8.78±2.67 12.10±3.14 CGL 754.80±68.19＊ 16.34±6.35＊ 112.71±45.31＊ 11.21±1.45 MDS 87.74±17.34＊ 4.72±2.16 7.89±2.67 11.87±1.48 F 31.97 29.45 47.38 5.12

2.2 ITP组治疗前后PLT、IPF%、IPF、MPV比较 ITP组治疗后的 MPV显著降低，PLT、IPF显著升高（P＜0.05）。其他指标治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 ITP组治疗前后PLT、IPF%、IPF、MPV比较（）

表2 ITP组治疗前后PLT、IPF%、IPF、MPV比较（）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.05；与治疗前比较，△P＜0.05。

组别 PLT（×109／L） IPF% IPF（×109／L） MPV（fL）健康对照组 225.81±15.15 2.65±1.21 5.81±1.56 11.25±1.67 IFP组 治疗前 38.15±16.53＊17.92±6.18 4.85±1.23 12.88±2.12治疗后 152.06±34.76△ 3.95±1.23△ 6.56±2.65△ 10.56±2.34△F 11.56 9.87 5.38 4.98

3 讨 论

血液病常见血小板减少，慢性粒细胞白血病血小板常增多。骨髓中血小板生成状况的评估，以前主要是依靠骨髓巨核细胞形态学检查、PLT、MPV的测定，通过观察骨髓巨核细胞的数量及成熟情况作为依据。但是骨髓巨核细胞学检查对患者具有创伤性，患者的痛苦较大，而且受取材、制片及操作者个人主观因素的影响［4］，结果常有一定的偏差，难以作为血小板生成状态的动态评估。Sysmex XE－5000是新一代较先进的全自动血细胞分析仪，其在流式细胞仪的基础上，采用鞘流电阻抗、在网织红细胞检测通道采用荧光染色结合流式法两种方法计数血小板［5］，使用Polymehtine和Oxazine两种特殊的荧光染料，穿透细胞膜进入胞质，与IPF中的RNA结合，染色后的细胞通过半导激光束，形成不同的前向散射光和荧光强度，其分别代表了细胞的体积和RNA的含量，在常规血细胞检测的同时，可以将网织血小板作为全血细胞检测的一部分进行测定。根据细胞大小分开红细胞区和血小板区，同时根据RNA含量区分成熟细胞和未成熟细胞，可将细胞分为成熟红细胞、网织红细胞、成熟血小板和网织血小板4个不同的区域，通过分析可以得到IPF%和IPF的绝对值。有研究显示，应用XE－5000检测网织血小板其灵敏度为91%～96%，特异度为67%～100%。而且用XE－5000检测网织血小板，标本不需要预处理，速度快操作简单，重复性好，可在做血细胞分析的同时进行测定。

IPF是新近从骨髓中释放入外周血中的血小板，是一种未成熟血小板，IPF数目反映了人体血小板的更新速度、血小板生成能力［6］。当骨髓生成血小板活跃时，网织血小板增高；而当骨髓生成血小板抑制时，网织血小板减低。IPF是分析血小板生成状态的有用指标，而网织血小板检测方法的进步，又为网织血小板在临床上的应用创造了有利的条件。近年来，网织血小板在各种疾病中的研究越来越广泛，如在造血干细胞移植中作为血小板早期恢复指标，以及在甲亢及肝脏、肾脏疾病中逐渐应用［7］。本研究结果显示，CGL组的PLT显著高于健康对照组（P＜0.05）；其他各组显著低于健康对照组（P＜0.05）。ITP组、CGL组的IPF%显著高于健康对照组（P＜0.05）；CGL组的IPF显著高于健康对照组（P＜0.05）。ITP组的 MPV显著高于健康对照组（P＜0.05）。ITP称特发性血小板减少性紫癜，是一类较为常见的出血性血液病，是一种因免疫机制使血小板破坏增多的临床综合征，其特点为单核－巨噬系统对血小板吞噬、破坏增加，血小板寿命缩短，骨髓巨核细胞增多［8］。ITP组治疗后的 MPV显著降低，IPF显著升高（P＜0.05）。这提示ITP患者经过治疗后其血小板在外周血中的破坏减少，骨髓巨核细胞逐渐恢复正常。AA是一种由多种原因引起的骨髓造血功能衰竭的一组综合征，主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少和贫血、出血、感染。骨髓中的巨核细胞减少，血小板生成出现障碍，新生血小板减少。有研究显示，IPF可反映急性白血病患者的不同病理状态，也是化疗后骨髓恢复的早期且敏感指标，这可能与患者本身骨髓巨核细胞生成状态有关，应根据每个患者的不同情况具体分析结果方有诊断价值。CGL是造血干细胞克隆恶性增生性疾病，CGL组的PLT和IPF显著高于健康对照组（P＜0.05），与慢性粒细胞白血病患者的骨髓巨核细胞增生有关。而10例MDS患者网织血小板百分比增高可能与MDS骨髓巨核细胞病态造血，外周血中巨大血小板增多有关。

综上所述，网织血小板的检测可反映骨髓巨核系统生成血小板的情况，有利于血液病的病因诊断，也是疗效判定的有效指标。

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