欧叶涛,张东东,孙 权,陈乃峰,韩 曦,钟堂武,田国忠
(佳木斯大学基础医学院解剖教研室,黑龙江佳木斯154007)
慢性心力衰竭(CHF)是许多心血管系统疾病发生发展的最终结果,也是导致患者死亡的主要原因。近年来随着对其发病机制研究的逐步深入,越来越多的证据表明,在慢性心衰的发生发展过程中,炎性细胞因子的过度激活在此过程中扮演着关键的角色。肿瘤坏死因子а(TNF-а)和白介素18(IL-18)是引起免疫炎性反应的重要因子,广泛的参与机体各个组织器官的免疫炎性进程,本研究采用酶联免疫法,探讨氯沙坦对CHF大鼠血清中TNF-а和IL-18含量的变化的影响,旨在阐明TNF-а和IL-18活化在CHF时的病理意义及作用机制。
健康雄性Wistar大鼠,体重(250±20)g(佳木斯大学实验动物中心提供),乙醚麻醉后于左侧第四肋间隙打开胸腔,暴露心脏,结扎左前降支制成心衰大鼠模型;同时部分大鼠进行假手术,即不结扎左前降支,其余操作同模型组[1]。
待手术动物伤口愈合后,随机将动物分成A组(模型组)、B组(治疗组)、C组(假手术组)和D组(正常组),每组12只。其中治疗组(B组)给予氯沙坦治疗,其余各组给予生理盐水,2个月后取血检测。
TNF-а和IL-18 ELISA试剂盒购于武汉博士德生物有限公司,氯沙坦由杭州默沙东制药公司生产。
参照试剂说明书,酶联免疫吸附法(ELISA方法)于450nm波长下检测样品浓度,血清中TNF-а的浓度以ng/L表示,血清IL-18浓度以pg/L表示。
用SPSS 17.0软件进行统计分析,结果以表示,检验标准а =0.05。
各组大鼠血清中TNF-а和IL-18的含量经过ELISA检测,统计学软件分析后可见,模型组与其他三组动物血清中TNF-а和IL-18的含量均存在明显差异,P<0.05;治疗组与正常组和假手术组之间也存在显著差异,P<0.05;正常组和假手术组清中TNF-а和IL-18的含量无差异,P >0.05。
表1 各试验组大鼠血清样品TNF-а和IL-18检测结果(±s,n=12)
表1 各试验组大鼠血清样品TNF-а和IL-18检测结果(±s,n=12)
注:●与正常组相比P<0.05;▲与模型组相比P<0.05。
对象 TNF-а(ng/L) IL-18(pg/L)A 组 14.25±3.51● 361.16±92.53●B 组 10.67±2.52●▲ 265.91±77.07●▲C 组 6.91±1.30▲ 188.43±49.37▲D 组 7.02±1.15▲ 184.59±40.25▲
慢性心力衰竭的发病机制有很多学说,目前备受关注的是免疫炎性反应学说,近年来很多研究结果显示,免疫炎性反应在CHF的发生发展过程中起着重要作用,主要表现为炎性细胞因子的异常表达和炎性细胞浸润。目前比较公认的炎性细胞因子有核因子-ΚB(NF-ΚB)、TNF-а和白细胞家族成员(IL -1、6、10、18)等[2,3]。目前,对于免疫炎性反应在CHF时的具体作用机制尚未十分明了,TNF-а主要由单核/巨噬细胞分泌,今年来研究发现,TNF-а具有抑制心肌细胞收缩,诱发心肌细胞凋亡,参与心脏重塑作用,在CHF的发生发展过程中扮演着重要的角色[4];同时也有研究显示,在CHF过程中,TNF-а能够通过正反馈调节增加自身合成,因而随着CHF的进展,血清中的TNF-а的含量呈逐渐增高的趋势[3]。IL-18是IL-1家族的成员,研究显示,IL-18主要通过诱导IFN-γ、TNF-а等炎性因子的表达,在CHF的发生发展过程中发挥作用[5],另外也有研究表明,IL-18还可以直接通过受体影响心肌细胞的功能[6]。本研究结果显示,CHF大鼠血清中TNF-а和IL-18的含量均明显高于正常组,说明在CHF发生发展过程中,TNF-а和IL-18所引起的免疫炎性反应起着重要的推动作用。给予氯沙坦治疗后,氯沙坦可以有效阻断NF-ΚB的活化,进而减少免疫炎性因子的释放[7,8],心衰大鼠的心功能出现明显好转。因此,血清中TNF-а和IL-18含量与模型组相比,出现明显的下降。综上所述,TNF-а和IL-18是CHF表现异常活跃的炎性因子,本实验结果不仅反应二者在CHF的发生发展过程中起着重要的作用,同时随着病情的进展,在血清的中敏感反应,亦可作为评价心功能等级和治疗效果的一个指标。随着对炎性因子在CHF发病机制研究的逐步深入,抗细胞因子治疗将会成为临床治疗CHF的一个崭新的方案。
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