肝脂溶颗粒治疗非酒精性脂肪肝模型大鼠的实验研究

邓厚波 隋晓丹 刘铁军

·实验研究·

肝脂溶颗粒治疗非酒精性脂肪肝模型大鼠的实验研究

邓厚波 隋晓丹 刘铁军

目的 通过实验研究验证肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝的治疗作用，探讨作用机制，为临床扩大应用提供科学依据。方法 观察肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠TG(血清甘油三酯)、CHOL(血清总胆固醇)；ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)；FFA(游离脂肪酸)的影响。结果 肝脂溶颗粒高剂量组降低血清TG、CHOL、FFA疗效优于对照组，降低血清ALT、AST疗效则与对照组相似。结论 肝脂溶颗粒能有效治疗非酒精性脂肪肝。

非酒精性脂肪肝；肝脂溶颗粒；实验研究

非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一种无过量饮酒史，或每日酒精摄入量<20 g，以肝实质细胞脂肪变性及脂肪蓄积为主要特征的临床病理综合征。本实验通过观察肝脂溶颗粒对NAFLD大鼠的治疗作用，以期为临床应用提供理论依据。

1 一般资料

1.1 实验动物 Wistar雄性大鼠60只，体质量(200±20)g。

1.2 药物 肝脂溶颗粒：长春中医学院附属医院制剂室；多烯磷脂酰胆碱胶囊：赛诺非安万特制药有限公司。

1.3 试剂 甘油三酯、胆固醇测试试剂盒：南京建成生物工程公司；丙氨酸氨基、天门冬氨酸转移酶测定试剂盒、游离脂肪酸测试盒：南京建成生物工程公司；125I-胰岛素放免分析试剂盒：北京北方生物技术研究所。

2 实验方法

2.1 非酒精性脂肪肝模型复制方法 大鼠适应环境7 d后随机分正常组9只和高脂组51只。分别予普通和高脂饲料(88%基础饲料、10%猪油、2%胆固醇)喂养，自由饮水。12周后随机选出正常组1只、高脂组6只大鼠，取肝组织进行HE染色，验证造模情况。

2.2 实验动物分组及给药方法 12周后正常组大鼠继续予普通饲料，每日给予生理盐水灌胃。高脂组随机分：模型组、多烯磷脂酰胆碱胶囊对照组(简称：对照组)、肝脂溶颗粒高、中、低剂量组(简称：高、中、低剂量组)。继续高脂喂养同时每日给予不同药物灌胃，(模型组：生理盐水lml/100 g；对照组：多烯磷脂酰胆碱胶囊水溶液，按0.14 g/kg体质量给药；高剂量组：100%浓度肝脂溶颗粒水溶液，按3 g/kg体质量给药；中剂量组：70%浓度肝脂溶颗粒水溶液，按2.1 g/kg体质量给药；低剂量组：30%浓度肝脂溶颗粒水溶液，按0.9 g/kg体质量给药。)灌胃4周后取材。2.3 血标本采集及指标观察 以2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，腹主动脉采血4～5 ml，全自动生化分析仪检测血清TG、CHOL、ALT、AST、FFA。采用 SPSS 16.0 统计软件处理数据。

表1 各组大鼠16周末血清TG、CHOL、FFA比较

注：与正常组相比*：P<0.01，**：P<0.05；与模型组相比Δ：P<0.01，ΔΔ：P<0.05；与对照组相比﹟：P<0.05，##P>0.05

3 实验结果

3.1 血清TG、CHOL、FFA 正常组大鼠血清TG、CHOL、FFA明显低于其他组(P<0.01)；以模型组最高，与其他药物干预组相比(P<0.01)，差异有统计学意义；高剂量组明显低于对照组(P<0.05)，差异有统计学意义；中剂量组与对照组相比(P>0.05)，差异无统计学意义；低剂量组高于高、中剂量组及对照组(P<0.05)，有统计学意义。见表1。

3.2 肝功能(ALT、AST) 各组NAFLD大鼠血清ALT、AST较正常组均有显著的升高(P<0.01)；模型组水平最高，与药物干预组相比(P<0.01)，差异有统计学意义；高剂量组与对照组相比(P>0.05)，差异无统计学意义；中剂量组高于对照组(P<0.05)，差异有统计学意义；低剂量组明显高于高、中剂量组及对照组(P<0.01)，差异有统计学意义。见表2。

表2 各组大鼠16周末血清ALT、AST结果比较

注：与正常组相比*：P<0.01，**：P<0.05； 与模型组相比Δ：P<0.01，ΔΔ：P<0.05；与对照组相比&：P<0.01，#：P<0.05，##P>0.05

4 讨论

脂质代谢异常被公认为是脂肪性肝病的一个最基础和关键环节[1]。临床上，血脂水平的变化是评价脂肪肝药物疗效的重要标准之一。目前FFA的增加被广泛认为是 NAFLD 重要起始因子。无论肝组织或血清FFA[2]升高均能引起一系列连锁式反应，使肝内脂肪过度储积，促进肝细胞脂肪变性、炎性浸润、坏死及纤维化的发生；并引起或加重胰岛素抵抗，最终形成脂质代谢紊乱的恶性循环。血清ALT、AST水平一直被作为反映肝细胞损伤的生化检测指标。血清ALT、AST的升高可能是从功能性损伤到器质性病变的变化，从初次打击到二次打击发展的中间环节。

刘铁军教授总结多年临床经验，依据《丹溪心法·中湿》：“凡肥人沉困怠惰，是湿热”，认为肥甘是本病重要病因，病位主要责之肝脾，与湿、热、瘀、积密切相关。自研肝脂溶颗粒，方中决明子清肝热，散郁结。枳椇子疏肝利胆，清利湿热，配合泽泻、茯苓健脾利湿，清利湿热，引湿热从小便而出。郁金行气疏肝解郁，丹参活血化瘀止痛，海藻清热散结，三药行气化瘀散结。山楂化痰消食散瘀，大黄通腑泻热、凉血解毒，二药泻下清肠，消瘀散结，开瘀热下行之路。何首乌补益肝肾，通便解毒，黄芪益气健脾，生阳益胃，二药补益气血，固其中气，以求气旺而血行畅，瘀化则脉得通，邪去而正气留守无伤。木香宣畅三焦，使邪有出路，达保肝护肝之目的。实验结果表明肝脂溶颗粒具有降血脂，改善脂质代谢的作用，疗效优于多烯磷脂酰胆碱胶囊；并对肝细胞质膜、线粒体膜有保护、修复及稳定作用，从而达到良好保护肝功能、降低转氨酶的疗效，其保肝降酶效果与多烯磷脂酰胆碱胶囊相似。

[1] Moreno Sanehez D.Pathogenesis of Primary nonaleoholic fatty liver disease. MedClin (Barc),2005,124(17):668-771

[2] Day CP, James OF.Hepatic steatosis: Innocent bystander or guilty party?. Hepatology,1998, 27:1463-1466

Experimental study on liver lipid granule in the treatment of on-alcoholic fatty liver in rats

DENGHou-bo,SUIXiao-dan,LIUTie-jun.

AffiliatedHospitalofChangchunUniversityofChineseMedicineChangchun130021,China

Objective Liver lipid soluble granules are verified through the experimental study on treatment of nonalcoholic fatty liver disease, and to explore mechanism, provide scientific basis for clinical expansion application.Methods To observe the hepatic lipid soluble granules on nonalcoholic fatty liver model rat TG, CHOL,; ALT and AST; The influence of FFA. Results Reduce liver lipid soluble particles high-dose group, serum TG, CHOL, FFA, curative effect is better than that of control group, lower serum levels of ALT, AST, curative effect is similar to the control group. Conclusion Hepatic lipid soluble granules is effective treatment of nonalcoholic fatty liver disease.

nonalcoholic fatty liver disease; Liver lipid particles; The experimental study

130000长春中医药大学附属医院肝脾胃病科(邓厚波);长春中医药大学附属医院2010级博士研究生(隋晓丹);长春中医大学附属医院肝脾胃病科(刘铁军)

刘铁军