张仁芳,金 阳,施关林
(1.浙江绍兴大地园艺有限公司,浙江 绍兴 312000;2.绍兴文理学院,浙江 绍兴 312000;3.绍兴市越城区农技推广中心,浙江绍兴 312000)
橘皮具有理气健脾、燥湿化痰、抗菌、平喘、抗胃溃疡、抗肿瘤等多种药理作用[1-3],其主要成份是D-柠檬烯。通过D-柠檬烯对果蝇的熏蒸作用、趋避作用、触杀作用等生物活性作用的研究,旨在为深入了解和开发橘子皮源绿色农药以及 D-柠檬烯功能性产品提供依据。
果蝇由绍兴文理学院生命科学学院提供蛹,经室内饲养后挑选整齐一致的初期幼虫供试。试剂有D-柠檬烯 (标准分析纯),无水乙醇,A溶液2%D-柠檬烯乙醇溶液,B溶液4%D-柠檬烯乙醇溶液,C溶液6%D-柠檬烯乙醇溶液等;飞利浦二合一搅拌机 (珠海经济特区飞利浦家庭电器有限公司)及玻璃仪器若干。
测定方法参考文献 [4]。
1.2.1 驱避作用
将20只果蝇用乙醚麻醉之后置于纱布隔层之间,待到乙醚对果蝇的麻醉作用消失以后,分别把果蝇连同纱布一起置于事先装有15 mL不同D-柠檬烯浓度的乙醇溶液培养皿上,再将其整个放入2 L的大烧杯内,大烧杯口用保险膜密封,保险膜上刺孔,保证烧杯内空气的流通。于药后4 h检查试虫逃离以及死亡情况,同时用乙醇做对照试验。
1.2.2 触杀毒力作用
先用乙醚麻醉果蝇,再分别用不同浓度的D-柠檬烯乙醇溶液用毛细管将试液点滴于果蝇体背,每种试剂处理10头,处理后的果蝇放在培养皿滤纸上,置温室条件下饲养,观察果蝇受试液接触后的反应,同时用乙醇做对照试验。
1.2.3 熏蒸作用
将10头果蝇用培养基饲养在12 cm×1.5 cm培养皿中,用纱布扎口,在另一同样大小的培养皿底部垫上直径9 cm的滤纸,滤纸分别滴加不同浓度的D-柠檬烯乙醇溶液,迅速将2培养皿对合,试虫皿在上,药皿在下,并用透明胶布将接合处封严,置于室温条件下饲养,观察果蝇反应,同时用乙醇做对照试验。
由表1可知,果蝇在酒精的长期熏蒸下,会从纱布的小孔中努力钻出到纸盒中但是并不能完全逃离。但随着D-柠檬烯浓度的加大驱避作用增强。
由试验可知,试虫在点滴试液后无明显的中毒反应,先是多动不安,后逐渐活动正常化。随着时间的延长,果蝇并没有死去。
由表2可知,120 min时不同处理仅有1~2头死亡,药剂和酒精效果无显著差异。由此可见,各种溶液D-柠檬烯乙醇溶液对果蝇的触杀效果都很弱。
表1 D-柠檬烯对果蝇的趋避效果
表2 D-柠檬烯对果蝇的触杀效果
在受到各种试液熏蒸的时候,果蝇大都有局促不安的症状。在酒精处理中,果蝇并没有出现死亡现象,而在D-柠檬烯的4组溶液的作用下,果蝇渐渐失去活力直至死亡。
由表3可知,尽管D-柠檬烯溶液浓度不一样,但其同样具有一定的杀虫效果,能在较短时间内杀死果蝇。
表3 D-柠檬烯对果蝇的熏蒸效果
D-柠檬烯乙醇溶液对果蝇有较强趋避性,且随着浓度增加其驱避效果逐渐增加。
不同浓度的D-柠檬烯乙醇溶液对果蝇几乎都没有触杀作用。
酒精对果蝇无熏蒸作用,扣除酒精的背景作用,D-柠檬烯对果蝇具有很好的熏蒸效果,且在很短的时间即可达到100%的熏蒸效果。
[1]赵雪梅,朱大元,叶兴乾,等.柑橘属中类黄酮的研究进展 [J].天然产物研究与开发,2002,14(1):89-92.
[2]谢丽琼,马东建,薛淑媛,等.维药刺山柑果实挥发油和脂肪酸成分的 GC-MS研究 [J].食品科学,2007,28(5):262-264.
[3]钱士辉,袁丽红.柑橘不同入药部位的成分比较与评价[J].中药材,2001,24(9):632.
[4]金阳,何平勇,金玫.莰酮及其衍生物的生物活性 [J].农药,2006,45(8):565-566.