荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量测定

王静霞，黄艳菲，＋，赵小燕，孙 美，许云章，彭镰心，刘 圆，*

（1.西南民族大学民族医药研究院，四川成都 610041；2.成都大学生物产业学院，四川成都 610106）

荞麦为蓼科（Polygonaceae）双子叶植物，药食皆可用，目前主要的栽培品种有两个：一种是鞑靼荞麦Fagopyrucm tataricum（L.）Gaerth，称为苦荞；另一种是普通荞麦Fagopyrum esculentum Moench，称为甜荞[1]。我国的荞麦分布较广，但生产相对集中，华北、西北、东北地区以种植甜荞为主，西南地区的四川、云南、贵州等地以种植苦荞为主[2]。荞麦不仅营养丰富，还含有多种黄酮类化合物[3-4]。现代药理研究表明：荞麦具有抗氧化、降血糖、降血脂等多种药理活性[5-9]。随着现代人们保健意识的提高，荞麦不仅作为一种食物材料进入人们的餐桌，同时各种商品苦荞茶作为一种具有食疗保健功能的食品也进入人们的生活，但是目前荞麦和商品苦荞茶的国家、地方或企业质量标准中，仍然没有可以执行的有效成分含量标准，因此，有必要系统地对荞麦和商品苦荞茶中总黄酮的含量进行测定。本实验以荞麦中的总黄酮含量作为荞麦和商品苦荞茶的评价指标，以期为荞麦和苦荞系列商品的质量控制及评价提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

荞麦（种子及植株）均采自成都大学的荞麦实验田，清洗干净后在50℃的电热恒温鼓风干燥箱中烘干至质量恒定，粉碎过50目筛；商品苦荞茶 购于国内的超市和网购；芦丁标准品 中国药品生物制品检定所（批号：100080-200707）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠 均为分析纯。

UV-8500紫外-可见分光光度计 中国上海天美公司；METTLER AE240电子分析天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；W201B恒温水浴锅 上海申顺生物科技有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 标准曲线的制备 以芦丁为对照品，UV法测定总黄酮含量。准确称取芦丁对照品25.05mg，加体积分数69%的乙醇溶液定容于50mL的容量瓶中，得质量浓度为0.501mg/mL对照品溶液。精密移取标准溶液7份，分别稀释成0.1503、0.06012、0.03006、0.01503、0.007515、0.003006mg/mL的对照品溶液。分别精密吸取5mL上述对照品溶液置于10mL比色管中，加5%亚硝酸钠0.5mL，放置6min，加10%硝酸铝0.5mL，放置6min，再加4%氢氧化钠4mL，摇匀，放置15min后于510nm处测定吸收度A。以浓度C（mg/mL）为横坐标，吸光度A为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为：y=4.9848x-0.0006，R2=0.9999，表明在0.003006～0.1503mg/mL浓度范围内，芦丁浓度C（mg/mL）与吸光度A之间具有良好的线性关系。

1.2.2 供试品溶液的制备 按课题组前期考察的荞麦总黄酮提取的最佳工艺条件提取样品。称取样品粉末0.5g，加入体积分数69%的乙醇21mL，回流提取90min，提取2次，过滤，回收溶剂，用体积分数69%的乙醇定容至25mL。吸取一定量样品溶液于比色管中，加入体积分数69%的乙醇补足至5mL，按1.2.1显色方法显色，离心后取上清液备用。

2 结果与讨论

2.1 精密度实验

以浓度为0.06012mg/mL的对照品溶液，重复测定吸光度6次，记录吸光度，吸光度RSD为1.51%，结果表明精密度良好。

2.2 重复性实验

取米荞1号粉末6份，按1.2.2供试品溶液制备方法制备，测定吸光度，吸光度RSD为1.44%，结果表明重复性良好。

2.3 稳定性实验

取供试品溶液，每隔0.5h测定吸光度值，连续测定4h，吸光度RSD为2.43%，结果表明，4h内样品稳定性良好。

2.4 加样回收率实验

称取已知含量的米荞1号样品6份，分别精密加入质量分数为已知含量样品中芦丁含量的120%、100%、80%芦丁对照品，按供试品溶液制备方法制备，测定吸光度，计算回收率。计算得总黄酮平均回收率为97.9%，RSD为1.95%。

2.5 样品含量测定结果

表1数据表明，比较各个栽培品种的荞麦种子总黄酮含量，米荞1号中总黄酮含量最高，黑丰1号、云南旱苦、苦刺荞、晋荞4号次之，川渝3号中总黄酮含量最低；苦荞的总黄酮含量在13.67～21.56mg/g之间，甜荞总黄酮含量在5.79～7.23mg/g之间，苦荞总黄酮含量总体高于甜荞。

表1 不同栽培种荞麦种子总黄酮含量Table 1 Concentration of total flavonoids in different cultivated species of buckwheat

表2 不同植物部位荞麦总黄酮含量Table 2 Concentration of total flavonoids in different parts of buckwheat

从表2可以看出，比较各个栽培品种荞麦的根、茎、叶、种子4个植物部位中总黄酮的含量，除西荞2号外，每种荞麦中叶的总黄酮含量均远高于根、茎和种子；比较这6个品种中叶的总黄酮含量，野苦6号叶中含量最高，西荞2号叶中含量最低。

表3 商品苦荞茶的总黄酮含量Table 3 Concentration of total flavonoids in commodities of buckwheat tea

从表3可以看出商品苦荞茶中总黄酮的含量，在彝乡人苦荞茶的4种商品中，彝乡人高寒苦荞茶中含量最高，彝乡人黑苦荞全皮茶中含量最低；三匠苦荞茶的4种商品中，三匠黑苦荞全株茶的含量最高，三匠黑苦荞全胚芽茶中含量最低；17种商品苦荞茶中，几木朵苦荞茶中含量最高，艺福堂苦荞茶中含量最低。

3 结论

各栽培品种的荞麦均采收于成都大学的荞麦实验田，所处的生长环境相同，但总黄酮含量有较大差距；如果这些荞麦品种能直接采收于原生长地，对之进行总黄酮含量的测定，将会为荞麦的研究利用提供更多的科学依据。本实验结果表明，叶提取的总黄酮含量最高，但是与目前人们仍然认为在商品茶中苦荞果实质优的观点不一致，本实验为综合和高效地利用荞麦植物资源提供了一定的科学依据。不同商品苦荞茶的总黄酮含量测定为课题组的系列研究提供了科学的实验数据，更为该类商品的质量评价提供了数据参考。

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