大耳兔去势手术及脊椎骨的CT观察

赵爱莲 杨 林 刘建民

（遵义医学院第五附属（珠海）医院 广东 珠海 519000）

骨质疏松症是危及老年人健康的三大疾病之一，关于骨质疏松的预防及治疗仍没有令人满意的方法，临床上关于骨质疏松的实验研究很多，主要基于建立骨质疏松症动物模型，兔是比较常用的动物之一，本文叙述大耳兔去势手术方法，并对脊柱骨质的CT形态及QCT骨密度进行研究，分析兔脊柱骨在手术后形态与骨密度的改变。

1 方法

将16只5月龄雌性大耳兔随机分为手术组和伪手术组，每组各8只。

麻醉使用丙泊酚注射液，用生理盐水按1∶5稀释，用量为2.0－2.5mg／Kg体重，经耳缘静脉缓慢注射，一边注射一边观察兔的角膜反应、肌松程度、痛疼反应，达到麻醉状态后立即停止注药，以防出现麻醉意外；待麻醉生效后保留静脉通道，开始进行手术，术中根据兔麻醉情况适当追加剂量，保证手术正常进行。

麻醉生效后首选进行备皮，用剪毛剪剪去兔腹部皮毛，用碘伏皮肤消毒，铺无菌巾，用左手拇、食二指横向绷紧腹壁，右手用手术刀在腹正中纵向切一小口，并切透腹膜，然后用食指和中指伸入切开的小口，用手术剪在两手指之间小心地沿腹正中线向上将腹膜、肌肉、皮肤一次剪开4～5cm，注意不要损伤腹内器官；腹壁切开后，将肠管轻轻向一边拨开，在肾脏后面寻找淡红色的卵巢；如果没有发现可沿着子宫输卵管，于输卵管末端，脊柱两侧寻找；找到卵巢后，手术组首先结扎卵巢两端组织及血管，然后分别切除两侧卵巢，关闭腹腔（注意不要把卵巢掉入腹腔）；伪手术组打开腹腔并找到卵巢不做特殊处理后即关闭腹腔，用消毒过的肠线将腹膜、肌肉一次缝合，然后在伤口区洒上青霉素G80万单位，再用螺旋缝合法缝合皮肤，伤口缝合后在伤口上涂碘酊消毒；术后3天内肌注青霉素G80万单位，每天1次。术后兔自由喂食、饮水，饲养温度20－25℃，相对湿度为40%－70%。

脊柱骨的CT检测用Siemens Somatom CT机、CT机配套的骨密度检测模型及配套软件；术前、术后1月、2月、3月及4月分别做CT腰椎骨层厚1mm薄层容积扫描；进行QCT骨密度检测，并称体重；做CT检查对兔进行麻醉，麻醉方法和手术麻醉一样；术后用薄层扫描数据做冠状位及矢状位多平面重组以及SSD重建。

QCT检测：将麻醉后的兔仰卧放在骨密度测量模型上面，测量靠近脊柱骨两端的松质部分，用3mm层厚序列扫描，通过机器配置的骨密度测量软件自动计算骨密度，每次复查检测对比部位距腰椎骨端的距离一致。

2 统计学方法

采用SPSS 15.0for windows统计软件，组间均数比较用独立样本t检验，手术前后均数比较用配对t检验。

3 结果

16只兔手术均一次成功，术后兔均正常生活至实验结束，其中12例顺利在肾背后方找到卵巢，4例顺着卵巢找到位于肾旁的卵巢，手术时间10分至25分钟，平均约15分钟；伪手术组时间比手术组平均短约2分钟。

脊柱骨在术后3月密质骨明显变薄，两端松质骨密度减低，松质部分范围缩小，伪手术组变化不明显。

手术组及伪手术组术前腰椎骨端松质骨平均骨密度无差异；手术组术后松质骨密度逐渐下降，但1、2月与术前比较无统计学意义；3、4月与术前比较骨密度减少有显著差异（P＜0.01），术后第4个月松质骨密度较术前减低27.14%（符合骨质疏松诊断标准）。伪手术组术后各月变化没有统计意义，两组间的腰椎骨端松质骨骨密度在术后1、2月无统计学差别，3、4月份两组间都有显著差异（P＜0.01）。

4 讨论

骨质疏松症是以骨组织显微结构退化，骨矿物成分和骨基质等比例地减少，骨皮质变薄，骨小梁数量减少，骨脆性增加和骨折危险度升高的一种全身骨代谢障碍的疾病，严重危及老年人健康，临床上有很多关于骨质疏松的研究，主要基于动物实验，在骨质疏松症动物模型的报道中，选用的动物多为大鼠，而大鼠的骨体积小、骨量较少；一些作者［1，2］选用兔制作骨质疏松模型，兔具有以下优点：性情温顺，易于获取，便于饲养，成本低廉，取血方便而利于动态观察。骨骼转化快，约为人的三倍，故短期内即可观察到骨组织的改变［3］；兔骨质疏松模型的建立主要方法也是去势法，详细介绍雌兔去势手术的文章不多。

兔的卵巢为卵圆形，长1.0－1.7cm，宽0.3－0.7cm，淡红色，表面常有半透明的颗粒状突起，形似桑椹，位于腹腔背侧脊柱两侧缘，输卵管的前端附近［4］，Merle［5］指出卵巢一般位于肾脏的背侧尾端脂肪内，卵巢悬韧带的足够长，这样就容易将卵巢、输卵管和子宫角拉出卵巢窝，方便手术。

Merle对兔在内的啮齿类去势手术方式采取俯卧，从背部做小切口，然后从脊柱两旁最后面了骨下缘进入腹内切除卵巢，这种方法创伤小，但操作难度大，要求手术者必须非常熟练，并且容易损伤肝脾及肾。

卢庆琢［6］的方法是自膝皱褶前缘向腹中线作垂线，其交点为切口部位，沿腹正中线向前将腹膜、肌肉、皮肤一次剪开4－5cm，，这种方式切口大，利于寻找并切除卵巢；术后无需特殊护理。

我们采用兔仰卧，腹部正中切口，根据视野可适当扩大切口，一般从肠管侧缘找到肾脏，在肾脏的背后侧常常都能顺利找到卵巢，少数是通过子宫角、卵巢找到卵巢。

腹壁采用分两次缝合，在腹膜肌肉层缝合后在伤口上涂抹青霉素G，术后注射三天，全组未出现感染及其它并发症。

本实验显示手术组腰椎骨端松质骨骨密度在手术后2月开始下降，第3、4月下降明显，与手术组术前及伪手术组术后同时间比较都有统计学的差异（P＜0.01）；第4月时与术前骨密度比较减低大于25%，根据中国人骨质疏松症建议诊断标准（第二稿）［7］，符合骨质疏松诊断标准。伪手术组术前及术后1－4月松质骨骨密度密没有统计学差异，说明本手术方法可靠，达到去势建立骨质疏松模型的效果。

5 结论

去势法建立兔骨质疏松症模型切实可行，用通过腹部正中切口是一个操作简便、安全可靠的方法。

［1］ 张娟，黄少慧，吴湘慧，等.骨灵片对去势大鼠骨小梁三维结构／骨强度的干预研究［J］.热带医学杂志，2008；8（5）：429－432

［2］ 宫琳，周延民，李春艳，等.快速建立兔骨质疏松症动物模型的方法［J］.吉林大学学报（医学版），2008；34（5）：903－906

［3］ 陈旭.骨质疏松动物模型的研究进展（综述）［J］.中国城乡企业卫生2009，132（4）：51－54

［4］ 胡建华，姚明，崔淑芳.实验动物学教程［M］.上海：上海科学技术出版社；2009：446－447

［5］ Merle E.Olson and Jim Bruce；Ovariectomy，Ovariohysterectomy and Orchidectomy in Rodents and Rabbits［J］.Can Vet J Volume 27，No.12December 1986525－527

［6］ 卢庆琢，鲍胜森，刘正吉.母兔的卵巢摘除术［J］；中国兽医杂志，1994，11（20）：34

［7］ 刘忠厚，杨定焯，等.中国人骨质疏松症建议诊断标准（第二稿）［J］.中国骨质疏松杂志，2002；6（1）：1