纤维素乙醇的原料预处理方法及工艺流程研究进展

杨 娟 ，滕 虎，刘海军 ，徐友海 ，吕继萍， 王继艳

（1大连理工大学生命科学与技术学院， 辽宁 大连 116024；2中国石油吉林石化公司研究院，吉林 吉林 132021）

能源问题已成为当今人类面临的最严峻的问题，发展生物质能源是解决能源问题的重要出路，其中燃料乙醇是化石类燃料的理想替代品。传统的淀粉质乙醇生产存在与人争粮、与粮争地的问题，而木质纤维资源是地球上现存量最大的生物质资源，用其来生产生物燃料可有效解决能源和环境两方面的问题，因此燃料乙醇的生产正在转向以纤维类原料为主[1]。然而，目前纤维素乙醇尚未产业化，不过据美国能源部门预测 2015年可以解决纤维素乙醇技术和经济问题，一些大公司也开始建立较大规模的试验性工厂，美国的Gulfoil Chemica公司建成了可处理 1 t/d纤维废料的中试车间，年产纯乙醇2亿升；加拿大的Iogen生物技术公司，采用稀酸结合蒸汽爆破预处理半纤维素，年产32万升乙了醇[2]；美国杜邦公司采用的氨纤维爆破工艺是碱法处理和爆破手段相结合[3]；芬兰科佰利公司采用甲酸替代传统的稀硫酸进行预处理；丹麦东能公司采用的是热水法进行原料预处理；新西兰朗泽公司则是采用合成气工艺。目前纤维素乙醇的预处理工艺流程并不成熟，没有通用的标准。美国NREL开发的稀酸预处理工艺是纤维素乙醇中试中较好的预处理工艺[4]，但仍需不断开发更优的工艺。我国也已将利用生物质废物制取燃料乙醇列为国家 863计划，同时在许多省市进行了试点应用。中粮集团采用连续蒸汽爆破预处理和酶水解工艺，建成年产500 t玉米秸秆纤维素乙醇试验装置[5-6]；上海华东理工大学能源化工系承担国家863计划的“农林废弃物制取燃料乙醇技术”研究已进入工业性试验阶段[2]。近年来，河南天冠集团与多个高校合作，攻克了多个用秸秆生产燃料乙醇的关键技术，2008其年产5000 t秸秆乙醇项目在南阳市建成并投入试运行，总投资6150万元[2]。

尽管木质纤维生物质是地球上最多的碳水化合物，来源广泛、价格低廉但同时其利用也面临很多挑战，如纤维生物质的结构的复杂、糖苷键对纤维素酶的不可及性、处理过程中可溶性抑制物的形成、混合糖的发酵效率低等均使得原料预处理成为限制木质纤维素利用工艺的瓶颈。研究证实预处理过程的费用占总成本的20%左右[7-8]，是除了原料成本之外比例最大的部分，因此开发一种高效率、低能耗、低成本的预处理方法是研究热点。

目前预处理的方法主要有物理法（球磨法、热水法）、化学法（酸法、碱法等）、物理化学法（蒸汽爆破法、氨蒸汽爆破法）等[9]。木质纤维素中主要包括纤维素、半纤维素、木质素等，其中纤维素和半纤维素可以转化成可发酵糖进而发酵生成乙醇，而木质素在纤维素周围形成保护层从而阻碍了酶对纤维素的水解作用。原料预处理的主要作用是去除木质素和半纤维素，降低纤维素结晶度以及提高基质的孔隙率，并避免抑制水解和发酵的副产物的产生，同时保证较好的经济性[10-11]。本文对几种典型的预处理方法作了介绍，并根据公开的文献和一些燃料乙醇公司的工艺流程绘制了相应的工艺流程简图，并对这些工艺和流程进行了对比分析，以期为燃料乙醇的工艺选择提供参考。

1 纤维质原料预处理方法

1.1 蒸汽爆破法

蒸汽爆破法的原理是纤维质物料在高温 160～260 ℃、高压0.69～4.83 MPa下蒸煮一段时间，高压蒸汽通过扩散作用进入木质纤维细胞壁内部，这样纤维结构的牢固性减弱，待处理结束时迅速降压降温，植物内部的高压气体释放出来，最终实现纤维物料膨胀破裂。图1为蒸汽爆破法工艺流程简图[12-13]，清洗后的物料经粉碎后与水混合并通入高温饱和蒸汽，随后送入反应器中并保持一段时间，此过程中半纤维素的乙酰基团水解产生醋酸和糖醛酸等酸性物质，它们能够催化半纤维素和木质素的水解生成木糖和葡萄糖[9]。最后，高温蒸煮后的物料被送入汽爆罐进行蒸汽爆破，介质和物料共同作用完成物理作用和能量释放；固含物送去进行水解糖化和发酵，蒸汽循环再利用以降低能耗。该工艺流程无环保或回收费用，但其投资成本较高，此外研究表明，蒸汽爆破处理前对原料进行水或酸、碱浸泡可大大提高预处理过程中原料的利用率[12-13]。

1.2 氨纤维爆破法

图1 蒸汽爆破法工艺流程图

图2 氨纤维爆破法工艺流程图

氨纤维爆破法类似于蒸汽爆破法，工艺也基本相同，只是在蒸煮过程中需要加入液氨，并要考虑氨的回收再利用，液氨可使木质素发生解聚反应，同时破坏木质素与糖类间的联接，部分脱除木质素，从而改变植物纤维的结构。图2为氨纤维爆破法工艺流程图[13-14]，物料清洗后与氨水一起通入到温度为60～100 ℃、压力1.73～2.07 MPa的反应器中反应5 min[15]，然后突然降压爆破，造成纤维素晶体的爆裂，木质素和纤维素之间的连接键断开，随着木质素和半纤维素的去除酶解率大大提高，随后固液混合物进入到后续糖化或发酵工段。汽爆过程中挥发出来的氨经过压缩重新回到反应器中重复利用。Chang等[16]以稻草为原料研究表明，AFEX预处理大大提高了稻草的消化性，葡萄糖和木糖的含量由未处理物料的18%和7%均提高到了80%，木质纤维原料被酶降解速率有很大提高。Alizadeh等[17]采用AFEX处理柳枝稷，葡聚糖转化率从16%提高到93%。此外这种预处理方法可以避免高温条件下糖的降解，且几乎没有发酵抑制物的生成，因此处理后不需要进行水洗[18]。

1.3 酸水解法

酸水解包括浓酸预处理和稀酸预处理，浓酸预处理对设备有腐蚀作用,处理后必须回收增加了生产成本，因此稀酸应用更广泛。稀酸水解一般在高温（160～220 ℃）高压（0.1 MPa）条件下进行，造成纤维素内部的氢键破坏，从而有利于纤维素的水解且稀酸水解木聚糖到木糖转化率很高[8]，糖转化率达80%～100%[19-20]。虽然稀酸水解法较其它方法相比有更高的水解率，但 Selig等[21]的研究表明采用稀酸130 ℃以上预处理木质纤维生物质时，温度超过木质素的相转换温度时会发生液化现象，在纤维素表面可能会形成一些由木质素和木质素与碳水化合物复合物形成的球状液滴，对酶糖化作用有5%～20%的抑制作用。图3为酸预处理工艺流程简图[22], 物料洗去杂质，经粉碎后再与稀酸混合，然后加热到160～220℃通入预处理反应器中，通过热交换器实现冷热流股的换热，以减少能耗，待反应结束进行碱中和，进而进行发酵。本工作采用的是同步糖化发酵。

图3 稀酸预处理工艺流程图

1.4 碱预处理法

碱预处理可有效破坏木质素与碳水化合物之间的连键，破坏生物质的结晶区，使木质素溶于碱溶液从而使酶水解易于进行。NaOH、Ca(OH)2、NH4OH是应用较多的预处理试剂。Mclntosh 等[23]在121 ℃ 条件下用0.75% 和2.0% 的NaOH 预处理麦秆30 min，结果表明分别有20% 和33%的半纤维素溶解，酶糖化作用较未处理组提高了6.3倍。Ca(OH)2价格便宜、操作安全，易回收。Chen等[24]采用Ca(OH)2处理TK-9芒草秸秆半纤维素的水解率>67.8%，木质素的去除率为43.1%。NH4OH对生物质的主要影响也是去木质素作用，但碳水化合物并没有很大程度上的减少[25-26]。氨很易挥发，通过加热很容易回收，预处理效果好。Kim等[26]发现15%NH4OH、60 ℃、1∶6的料液比，处理玉米秸秆12 h可以去除67%～71%的木质素，在酶用量足够多的条件下，几乎所有的纤维素都可被水解。图 4为 NH4OH 预处理工艺流程简图[27]，（NaOH、Ca(OH)2处理时流程有差异）纤维素经碱处理后，氨水首先使木质素发生解聚反应，固体经过水洗送去进行糖化发酵；液体中氨经蒸发回收利用，液体中包含的木质素、少量糖等残渣可作为燃料产生工艺所需的蒸汽和电，氨的消耗和回收是该法的主要成本，该工艺不太适用于大规模商业化运作[6]。

图4 氨回收浸没预处理工艺流程图

1.5 有机试剂法

有机试剂预处理广泛应用于处理各种木质纤维生物质的工艺中，主要包括一些低分子量的脂肪醇[28]、有机酸等。乙醇可以降低处理液黏度使得化学物质能够更好地扩散渗透到生物质中，有助于木质素的去除，还能够降低木质素重新沉降的速度从而减少木质素的凝结，并易于回收[29-30]。有机试剂预处理后的纤维素具有更好的漂白性以及黏度保持性，可以用来生产纤维胶和羧甲基纤维素，但考虑到全过程的经济性，有机试剂的回收是一个关键问题[31]。Pan等[32-33]用乙醇预处理杂交杨树和美国黑松发现它能有效提高酶的消化性使其转化率分别达到 85%和 97%。图 5为有机试剂预处理工艺流程图[13,31,34]。物料与 60%的乙醇和水混合，180 ℃维持90 min，反应器中液固比为6∶1[34]，反应后经闪蒸回收乙醇，然后混合物料进行固液分离，固体物质经过清洗，去除掉残渣，洗液与分离液通过超滤膜过滤将少量溶解的纤维素分离出来，然后将溶液进一步浓缩蒸出乙醇和水循环使用，浓缩液经过滤注入发酵罐中发酵。另外对于具有腐蚀性的有机试剂该工艺需采用耐腐蚀性设备。

1.6 热水预处理

图5 有机试剂预处理的工艺流程图

图6 热水预处理工艺流程图

热水预处理利用高温高压下水穿透生物质的细胞壁使得生物质中的半缩醛键断裂生成酸，从而促进醚键的断裂。高温时水就会发生自电离，介电常数较低有利于其对有机化合物的溶解[35-36]；同时有很高的电离常数，为整个体系提供酸性介质，这样通过水解醚键和酯键以及有利于半纤维素的水解从而促进生物质的转化[37-38]。热水预处理方法工艺流程见图 6[39-40]，采用高压使高温时水仍保持液体状态；将K2CO3及水泵入温度范围为150～220 ℃的3.4 MPa 高压反应器中，中和由于半纤维素降解产生的发酵抑制物，反应维持一段时间后迅速冷却降压去除掉醛等少量易挥发的抑制物，对热水解液中的可溶性有机物进行热液碳化回收碳，即对热解液中的可溶性碳进行回收，形成含碳丰富的微球，而这种微球有很好的燃烧值，可以作为固体燃料或功能性碳质材料[35]，热水解后的固体进行酶解，酶解液进行发酵。

1.7 气化法

在人们探索生物质液体燃料生产技术过程中，生物质合成气发酵生产乙醇无疑是一种新方法，合成气的来源主要是炼钢炼铁厂的废气以及生物质气化后得到的以 CO、H2为主的气体。新西兰LanzaTech 公司通过微生物发酵法已实现了钢厂尾气制乙醇，是国际上唯一一个可以利用此技术的公司。我国宝钢公司也正在实现这一国外技术的引进、利用、再创新。生物质合成乙醇法结合了热化学和生物发酵两种技术[41]。图7 为合成气发酵乙醇工艺流程图[42-43]，高温条件下（700～800 ℃）将生物质气化成为 CO、CO2、H2、CH4等高温合成气，操作时避免温度达到 850℃以上时生物质中的碱金属会融化形成黏性物质[44]，影响气化反应器的后续处理。气化反应器中产生的高温蒸汽用来发电。高温合成气经冷却、净化后，加压（目的是提高气体溶解度）送入发酵罐，然后利用一些厌氧微生物（如Clostridium ljungdahlii,Clostridium strain P11等[45-47]）通过厌氧的乙酰 CoA 途径将这些气体发酵为乙醇和乙酸等化学物质。但目前生物质气化制合成气技术尚不成熟，气化效率较低，仍需对技术进行不断改进。

图7 气化法工艺流程图

2 预处理方法及工艺对比

利用纤维素生产乙醇的工艺主要有两种，一种是纤维素水解发酵工艺，另一种是生物质合成气发酵工艺。水解发酵工艺需要先对原料进行预处理[48]，但预处理工艺流程并不成熟，仍处于试验阶段。虽然预处理方法较多，但每种方法作用机理以及特点不同，适用原料也不同，预处理后糖的收率和乙醇的产率及回收成本都有很大差异。针对不同原料设计特定处理工艺是实现木质纤维原料有效分离，减小能耗的最优方法。表1对不同预处理工艺优缺点、适用性、主要操作费用和产业化等方面进行了说明。几种方法中碱法对木质素的去除效果最好，气化法原料利用率高。表2对几种预处理工艺的葡萄糖和木糖产率或乙醇产量进行了比较。从表中可以看出采用不同的预处理工艺糖的得率和操作费用有较大的差异。对于木质素含量不高的玉米秸秆等农业残留物蒸汽爆破法、氨纤维爆破法和稀酸法处理后的木糖和葡萄糖产率很高均达理论产率的90%以上且差异不大，而对于木质素含量较高的杨树，蒸汽爆破法、稀酸法以及有机试剂法预处理效果较好。综合考虑这些因素对预处理方法的选择有一定的参考意义。

3 结论与展望

分析了几种木质纤维生物质生产乙醇的预处理方法的原理并对其工艺流程进行了简要说明和对比。尽管这些方法各有其优势，但现有的预处理技术均存在着许多不足，单一的一种技术存在成本高、效率低等弊端。因此不同预处理技术的合理结合使用可能成为有价值的尝试。另外，预处理过程被认为是木质素生物质转化成乙醇过程中花费较高的步骤，较好的过程设计能够降低成本，有利于整个过程的经济性，随着研究的深入，简单、高效、经济、实用的方法将会使纤维质原料发酵乙醇实现商业化。

表1 不同预处理工艺特点的比较

表2 不同预处理工艺作用效果的比较

[1]Limayem A, Ricke S C.Lignocellulosic biomass for bioethanol production：Current perspectives, potential issues and future prospects[J].Progress in Energy and Combustion Science, 2012, 38：449-467.

[2]杜风光, 冯文生.秸秆生产乙醇示范工程进展[J].化工进展, 2009,28（s1）：16-19.

[3]曹建业.美国纤维素乙醇产业化前景[J].产业综述, 2007, 12：44-47.

[4]Adeb A, Ruth M, Lbsen K, et al.Lignocellulosic biomass to ethanol process design and economics utilizingco-current dilute acid prehydrolysis and enzymatic hydrolysis for corn stover[R].US：National Renewable Energy Laboratory (NREL), 2002.

[5]姜芹, 孙亚琴, 滕虎, 等.纤维素燃料乙醇技术经济分析[J].过程工程学报, 2012, 12（1）：97-104.

[6]于斌, 齐鲁.木质纤维素生产燃料乙醇的研究现状[J].化工进展,2006, 25（3）：244-249.

[7]Banerjee S, Sen R, Giri B, et al.Commercializing lignocellulosic bioethanol：Technology bottlenecks and possible remedies[J].Biofuels Bioproducts and Biorefining, 2010, 4：77-93.

[8]Yang B, Wyman C E.Pretreatment：The key to unlocking low-cost cellulosic ethanol[J].Biofuels Bioproducts and Biorefining, 2008, 2（1）：26-40.

[9]崔永强, 林燕, 华鑫怡, 等.木质纤维素为原料的燃料乙醇发酵技术研究进展[J].化工进展, 2010, 29（10）：1868-1876.

[10]Mosier N, Wyman C, Dale B, et al.Features of promising technologies for pretreatment of lignocellulosic biomass[J].Bioresource Technology, 2005, 96（6）：673-686.

[11]Kumar P, Barrett D M, Delwiche M J, et al.Methods for pretreatment of lignocellulosic biomass for efficicent hydrolysis and biofuel production[J].Industrial and Engineering Chemistry Research, 2009,48（8）：3713-3729.

[12]Zhu J Y, Pan X J.Wood biomass pretreatment for cellulosic ethanol production：Technology and energy consumption evaluation[J].Bioresource Technology, 2010, 101（13）：4992-5002.

[13]Conde-Mejía C, Jiménez-Gutiérrez A, El-Halwagi M.A comparison for pretreatment methods for bioethanol production from lignocellulosic materials[J].Process Safety and Evironmental Protection, 2012, 90（3）：189-202.

[14]Martín M, Grossmann I E.Energy optimization of bioethanol productionviahydrolysis of switchgrass[J].American Institute of Chemical Engineers, 2012, 58（5）：1538-1549.

[15]Murnen H K, Balan V, Chundawat S P S, et al.Optimization of the ammonia fiber explosion (AFEX) treatment parameters for enzymatic hydrolysis of corn stover[J].Biotechnology Progress, 2007, 23（4）：846-850.

[16]Chang V S, Holtzapple M T.Fundamental factors affecting biomass enzymatic reactivity[J].Appl.Biochem.Biotechnol., 2000, 84-86（1-9）：5-37.

[17]Alizadeh H, Teymouri F, Gilbert T I, et al.Pretreatment of switchgrass by ammonia fiber explosion(AFEX)[J].Chemistry and Materials Science, 2005, 124（1-3）：1133-1141.

[18]肖明松, 王孟杰.燃料乙醇生产技术与工程建设[M].北京：人民邮电出版社, 2010.

[19]Saha B C, Iten L B, Cotta M A, et al.Dilute acid pretreatment,enzymatic saccharification and fermentation of wheat straw to ethanol[J].Process Biochemistry, 2005, 40：3693-3700.

[20]Sun Y, Cheng J J.Dilute acid pretreatment of rye straw and bermudagrass for ethanol production[J].Bioresource Technology,2005, 96（14）：1599-1606.

[21]Selig M J, Viamajala S, Decker S R, et al.Deposition of lignin droplets produced during acid pretreatment of maize stems retards enzymatic hydrolysis of cellulose[J].Biotechnology Progress, 2008,23（6）：1333-1339.

[22]Kumar D，Ganti M.Impact of pretreatment and downstream processing technologies on economics and energy in cellulosic ethanol production[J].Biotechnology for Biofuels, 2011, 4（1）：27-45.

[23]Mclntosh S, Vancov T.Optimisation of dilute alkaline pretreatment for enzymatic saccharification of wheat straw[J].Biomass and Bioenergy, 2011, 35（7）：3094-3103.

[24]Chen B Y, Chen S W, Wang H T.Use of different alkaline pretreatments and enzyme models to improve low-cost cellulosic biomass conversion[J].Biomass and Bioenergy, 2012, 39：182-191.

[25]Wang Z Y, Li R Y, Xu J L, et al.Sodium hydroxide pretreatment of genetically modified switchgrass for improved enzymatic release of sugars[J].Bioresource Technology, 2012, 110：364-370.

[26]Kim T H, Lee Y Y.Pretreatment of corn stover by soaking in aqueous ammonia at moderate temperature[J].Applied Biochemistry and Biotechnology, 2007, 136-140：81-92.

[27]刘荣厚, 梅晓岩, 颜涌捷, 等.燃料乙醇的制取工艺与实例[M].北京：化学工业出版社, 2008.

[28]胡秋龙, 熊兴耀, 谭琳.木质纤维素生物质预处理技术的研究进展[J].中国农学通报, 2011, 27（10）：1-7.

[29]Yáñez-S M, Rojas J, Castro B, et al.Fuel ethanol production from Eucalyptus globulus wood by autocatalized organosolv pretreatment ethanol–water and SSF[J].Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 2013, 88（1）：39-48.

[30]Zhao X B, Cheng K K, Liu D H.Organosolv pretreatment of lignocellulosic biomass for enzymatic hydrolysis[J].Applied Microbiology and Biotechnology, 2009, 82：815-827.

[31]González Alriols M, García A, Llano-ponte R, et al.Combined organosolv and ultraf i ltration lignocellulosic bioref i nery process[J].Chemical Engineering Journal,2010, 157：113-120.

[32]Pan X J, Gilkes N, Kadla J, et al.Bioconversion of hybrid poplar to ethanol and co-products using an organosolv fractionation process：Optimization of process yields[J].Biotechnology and Bioengineering,2006, 94：851–861.

[33]Pan X J, Xie D, Yu R W, et al.Pretreatment of lodgepole pine killed by Mountain pine beetle using the ethanol organosolv process：Fractionation and process optimization[J].Industrial and Engineering Chemistry Research, 2007, 46：2609–2617.

[34]González M, Tejado Á, Peña C, et al.Organosolv pulping process simulations[J].Industrial and Engineering Chemistry Research, 2008,47（6）：1903-1909.

[35]Kumar S, Kothari U, Kong L Z, et al.Hydrothermal pretreatment of switchgrass and corn stover for production of ethanol and carbon microspheres[J].Biomass and Bioenergy, 2011, 35 （2）：956-968.

[36]杨恒, 张素民.热水预处理法提取植物纤维中半纤维素的研究进展[J].制浆造纸工艺, 2011, 42（2）：25-43.

[37]Miyoshia H, Chen D, Akai T.A novel process utilizing subcritical water to recycle soda-lime-silicate glass[J].Journalof Non-Crystalline Solids, 2004, 337（3）：280-282.

[38]Kumar S, Gupta R B.Biocrude production from switchgrass using subcritical water[J].Energy Fuels, 2009, 23（10）：5151-5159.

[39]Ojeda K, Sánchez E, Kafarov V.Sustainable ethanol production from lignocellulosic biomass-Application of exergy analysis[J].Energy,2011, 36：2119-2128.

[40]Quintero J A, Cardona C A.Process simulation of fuel ethanol production from lignocellulosics using Aspen Plus[J].Industrial and Engineering Chemistry Research, 2011, 50：6205-6212.

[41]宋安东, 冯新军, 谢慧, 等.生物质合成气发酵制取燃料乙醇研究进展[J].食品与发酵工业, 2011, 37（6）：131-132.

[42]He J, Zhang W N.Techno-economic evaluation of thermo-chemical biomass-to-ethanol[J].Applied Energy, 2011, 88：1224-1232.

[43]Kundiyana D K, Huhnke R L, Wilkins M R.Syngas fermentation in a 100-L pilot scale fermentor：Design and process considerations[J].Journal of Bioscience and Bioengineering, 2010, 109（5）：492-498.

[44]李东，袁振宏，王忠铭, 等.生物质合成气发酵生产乙醇技术的研究进展[J].可再生能源, 2006（2）：57-61.

[45]Henstra A M, Sipma J, Rinzema A, et al.Microbiology of synthesis gas fermentation for biofuel production[J].Current Opinion inBiotechnology, 2007, 18：200-206.

[46]Younesi H, Najafpour G, Mohamed A R.Ethanol and acetate production from synthesisgasviafermentation processes using anaerobic bacterium,Clostridium ljungdahlii[J].Biochemical Engineering Journal, 2005, 27：110-119.

[47]Kellum R, Drake H L.Effects of cultivation gas phase on hydrogenase of theacetogen Clostridium thermoaceticum[J].Joural of Bacteriology, 1984, 160（1）：466–469.

[48]段黎萍.纤维素乙醇的商业化现状及经济分析[J].化工进展,2008, 27 （6）：867-877.

[49]曲音波.纤维素乙醇产业化[J].化学进展, 2007, 19（7-8）：1098-1108.

[50]Balat M.Production of bioethanol from lignocellulosic materialsviathe biochemical pathway：A review[J].Energy Conversion and Management, 2011,52（2）：858-875.

[51]Galbe M, Zacchi G.Pretreatment：The key to efficient utilization of lignocellulosic materials[J].Biomass and Bioenergy, 2012, 46：70-78.

[52]Elander R T, Dale B E, Holtzapple M, et al.Summary of fi ndings from the biomass ref i ning consortium for applied fundamentals and innovation (CAFI)：Corn stover pretreatment[J].Cellulose, 2009, 16（4）：649-659.

[53]Wyman C E, Dale B E, Elander R T, et al.Comparative sugar recovery and fermentation data following pretreatment of poplar wood by leading technologies[J].Biotechnology Progress, 2009, 25（2）：333-339.

[54]Kim S, Holtzapple, M T.Lime pretreatment and enzymatic hydrolysis of corn stover[J].Bioresource Technology, 2005, 96（18）：1994–2006.

[55]Wyman C E, Dale B E, Elander R T, et al.Comparative sugar recovery and fermentation data following pretreatment of poplar wood by leading technologies[J].Biotechnology Progress, 2009, 25（2）：333–339.

[56]Pan X, Gilkes N, Kadla J, et al.Bioconversion of hybrid poplar to ethanol and co-products using an organosolv fractionation process：Optimization of process yields[J].Biotechnology and Bioengineering,2006,94：851–861.

[57]Kim Y, Mosier N S.Enzymatic digestion of liquid hot water pretreated hybrid poplar[J].American Istitute of Chemical Engineer,2009, 25：340-348.