施肥对不同肥力水平春玉米农田土壤有机碳及其组分的影响

赵海超 ，刘景辉 ，张星杰，李立军，张磊

1. 内蒙古农业大学农学院，呼和浩特 010019；2. 河北北方学院农林科技学院，张家口 075131

土壤有机碳（soil organic carbon, SOC）对土壤的物理、化学和生物学特征具有调节作用，其微小的变化将对大气中CO2浓度产生重大的影响[1]。土壤活性有机碳（active soil organic carbon, ASOC）是土壤有机碳的活性部分，其生物有效性较高、易被土壤微生物分解矿化、能够直接供应植物养分[2-3]，在保持土壤肥力、改善土壤质量、维持土壤碳库平衡方面具有重要作用[4]。土壤中活性有机碳主要包括溶解性有机碳（dissolved organic carbon, DOC）、微生物量碳（microbial biomass carbon, MBC）、轻组有机碳（light fraction organic carbon, LFOC）等[5]，它们可以表征土壤物质循环特征、评价土壤质量，以及作为土壤潜在生产力和由土壤管理措施引起土壤有机碳变化的早期指标[6-7]。近年来关于农艺措施对土壤有机碳的影响进行了大量的研究[8-12]，而且对土壤活性有机碳组分影响的研究成为热点[4,13]。

土壤有机碳组分和数量受农艺措施以及外源有机物质输入的影响，有机肥是农田土壤有机碳的重要来源[10-12]，特别是动物粪肥含有大量易分解的脂肪酸，能够为微生物生命活动提供良好的碳源[14]，大量的研究[15-17]表明，有机无机配施能够提高土壤中微生物量碳、溶解性有机碳以及轻组有机碳等活性有机碳的含量；施用有机肥不仅可以增加土壤中活性有机碳的含量，还通过对土壤生物、物理和化学性状以及作物生长状况的改变，影响土壤中活性有机碳的结构、功能团及其迁移能力[18]。根据作物产量的高低可以将农田土壤分为低产田、中产田和高产田土壤，不同农田土壤因其理化性质不同而导致土壤中活性有机碳含量及组分存在差异[19]。本文以辽河灌区灌淤土为研究对象，探讨施肥对高、中、低产田土壤中活性有机碳组分的影响，为合理调控春玉米（Zea mays ssp. mays L.）农田土壤质量、提升土壤肥力提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究区域概况

研究区域在中国东北部西辽河平原内蒙古自治区通辽市科尔沁区（北纬42°15′～45°41′、东经119°15′～123°43′之间）进行，该区春玉米种植面积近70万hm2，占全内蒙古的近1/3。试验地点的无霜期为100～150 d，年降雨量为350～450 mm，主要集中在7—8月。试验区土壤主要为灌淤土，土壤质地由沙质土至壤质土，一般为壤质土。本文选肥力低（沙质土为主，产量(8.25±0.75) t·hm-2）、中（沙质土-壤质土，产量(10.50±0.75) t·hm-2）、高（壤质土，产量(12.75±0.75) t·hm-2）3种春玉米地块，其土壤理化性状如表1所示。

表1 不同质地土壤0～40 cm土层理化性状 Table 1 The physical and chemical properties of in different soil textures in 0-40 cm depths

1.2 试验处理

试验在2009—2011年进行，每种肥力水平土壤分别设不施肥和施肥两个处理，共6个处理，重复3次，共18个小区，小区排列采用随机取组；小区面积为10 m×20 m=200m2。施肥处理分别施用氮（N）202 kg·hm-2、磷（P2O5）67.5 kg·hm-2、钾（K2O）67.5 kg·hm-2和有机肥（牛粪）22.5 t·hm-2。肥料分别为尿素、磷酸二铵以及硫酸钾，牛粪含有机质14.7%、N 0.42%、P2O50.22%。氮肥以基肥和追肥两种方式施入土壤，其中1/4用于基肥，3/4用于追肥，其他肥料均用于基肥。种植玉米品种为，金山27（2009、2010年）和郑丹958（2010年），种植密度为75000 株·hm-2，田间管理同当地传统种植。

1.3 土壤样品采集

分别于试验前（2009年4月25日）和试验后（2011年9月29日）采集各处理不同层次（表层0～10 cm、耕层10～20 cm及犁底层20～40 cm）土壤样品，每个小区随机采集5个点位，现场混匀，放入塑封袋中带回实验室，4 ℃保存备用。

1.4 分析方法

土壤总有机碳（TOC）采用重铬酸钾-硫酸外加热法（GB 8834—1988）；活性有机碳（ASOC）采用333 mmol·L-1高锰酸钾氧化法[20]；轻组有机碳（LFOC）按照JANZEN等[21-22]的方法，采用比重分离法去除轻组有机质：称取5 g过0.149 mm筛的风干样品于100 mL离心管中，加入20 mL密度为1.7 kg·L-1的NaI溶液，超声波分离10 min，5000 r·min-1离心10 min，上清液过5 mm铜网，重复4～5次，收集铜网上物质，采用重铬酸钾-硫酸外加热法（GB 8834—1988）测定有机碳含量[23]。土壤微生物量碳、氮量的测定采用氯仿熏蒸培养法[24-25]，微生物量碳采用multi N/C 3100分析仪测定，微生物量氮采用FOSS 800-810-3363分析仪测定。土壤中DOC利用蒸馏水按固液比1∶20提取，提取液过0.45 μm滤膜，采用TOC-5000A测定。

1.5 数据处理

试验数据统计与作图采用EXCEL 2003软件，数据分析LSD检验采用SPSS 17.0软件进行。

2 结果与分析

2.1 施肥对高、中、低产田不同层土壤TOC的影响

春玉米高、中、低产田各层土壤w(TOC)变化如图1所示。试验前各农田土壤w(TOC)总体呈高产田＞中产田＞低产田，试验后土壤w(TOC)各处理均呈高产田＞低产田＞中产田。试验前后相比，试验后土壤w(TOC)仅有高产田耕层（10～20 cm）降低，通过LSD检验低产田试验前后不同处理均呈显著差异（P<0.05）。可见，连续3年种植春玉米能够明显的增加低产田土壤w(TOC)。处理间相比，施肥比不施肥各层土壤w(TOC)增加了-13.41%～7.54%，平均增加了0.16%。高产田表层土壤w(TOC)增加幅度最大且达到显著水平，低产田犁底层土壤w(TOC)显著降低。可见，有机无机配施并没有显著增加土壤w(TOC)，对中、高产田土壤w(TOC)的增加幅度大于低产田，对表层土壤w(TOC)的增加幅度大于耕层和犁底层。

2.2 施肥对高、中、低产田不同层次土壤ASOC的影响

春玉米高、中、低产田各层次土壤w(ASOC)变化如图2所示。试验前各农田土壤w(ASOC)总体呈高产田＞中产田＞低产田，试验后土壤w(ASOC)总体呈高产田＞低产田＞中产田。试验前后相比，各处理农田土壤w(ASOC)均值均高于试验前，通过LSD检验低、高产田达到显著水平，低、中产田犁底层土壤w(ASOC)增加显著，低、高产田表层土壤w(ASOC)增加显著。可见，连续3年种植春玉米能够明显的增加高、低产田土壤w(ASOC)。处理间相比，施肥比不施肥各层土壤w(ASOC)增加了-13.98%～72.22%，平均增加了15.82%。低产田犁底层和高产田耕层土壤w(ASOC)显著增加，中产田耕层土壤w(ASOC)显著降低。可见，有机无机配施对土壤w(ASOC)的增加幅度大于w(TOC)，且对低产田土壤w(ASOC)的增幅大于高、中产田。

图1 不同施肥处理高、中、低产田各层次土壤TOC含量变化 Fig.1 The variation of TOC content in high，middle and low yielding fields soil with different fertilization treatment

图2 不同施肥处理高、中、低产田各层次土壤ASOC含量变化 Fig.2 The variation of ASOC content in high, middle and low yielding fields soil with different fertilization treatment

2.3 施肥对高、中、低产田不同层次土壤LFOC的影响

春玉米高、中、低产田各层次土壤w(LFOC)变化如图3所示。试验前各农田土壤w(LFOC)总体呈高产田＞低产田＞中产田，试验后土壤w(LFOC)总体呈高产田＞低产田＞中产田。试验前后相比，试验后仅有低、高产田表层土壤w(LFOC)升高，其它土层均低于试验前，通过LSD检验试验前后差异显著。可见，连续3年种植春玉米能够明显的降低土壤w(LFOC)。处理间相比，施肥比不施肥各层土壤w(LFOC)增加了-42.60%～168.57%，平均增加了48.83%。中产田表层和犁底层、高产田表层和耕层土壤w(LFOC)显著增加，高产田犁底层土壤w(LFOC)显著降低。可见，有机无机配施对土壤w(LFOC)的增加幅度大于w(ASOC)，且对土壤w(LFOC)的增加幅度中产田＞高产田＞低产田，主要增加表层土壤w(LFOC)。

图3 不同施肥处理高、中、低产田各层次土壤w(LFOC)变化 Fig.3 The variation of LFOC content in high, middle and low yielding fields soil with different fertilization treatment

2.4 施肥对高、中、低产田不同层次土壤DOC的影响

图4 不同施肥处理高、中、低产田各层次土壤w(DOC)变化 Fig.4 The variation of DOC content in high, middle and low yielding fields soil with different fertilization treatment

春玉米高、中、低产田各层土壤w(DOC)变化如图4所示。试验前各农田土壤w(DOC)总体呈高产田＞低产田＞中产田，试验后土壤w(DOC)总体呈低产田＞中产田＞高产田。试验前后相比，土壤w(DOC)变化不大，试验后犁底层土壤w(DOC)均高于试验前。可见，连续3年种植春玉米对土壤w(DOC)影响较小，主要增加犁底层土壤w(DOC)。处理间相比，施肥比不施肥处理各层土壤w(DOC)增加了-42.74%～51.29%，平均增加了9.36%。中产田耕层和犁底层、高产田表层和耕层土壤w(DOC)显著增加，低产田耕层土壤w(DOC)显著降低。可见，有机无机配施对土壤w(DOC)增加幅度小于w(ASOC)，且对低产田土壤w(DOC)增加幅度较小，主要影响耕层土壤w(DOC)。

2.5 施肥对高、中、低产田不同层次土壤MBC的影响

春玉米高、中、低产田各层土壤w(MBC)变化如图5所示。试验前各农田土壤w(MBC)总体呈低产田＞高产田＞中产田，试验后土壤w(MBC)总体呈高产田＞中产田＞低产田。试验前后相比，总体上试验后土壤w(MBC)高于试验前。可见，连续3年种植春玉米能够增加土壤w(MBC)。处理间相比，施肥比不施肥各层土壤w(MBC)增加了-1.16%～19.97%，平均增加了9.32%，除中产田耕层土壤w(MBC)略有降低外其他土层土壤w(MBC)均有所增加，低产田耕层和高产田犁底层土壤w(MBC)增加显著。可见，有机无机配施可以不同程度的增加土壤w(MBC)，但增幅小于w(ASOC)和w(LFOC)，且主要影响耕层和犁底层土壤w(MBC)。

3 讨论

3.1 施肥对有机碳不同组分影响的差异

土壤有机碳的数量取决于有机碳的输入和土壤有机碳微生物分解之间的平衡[26]。有机无机肥料配施能够增加土壤有机碳储量[27-28]，同时施肥通过改善土壤环境促进土壤微生物对碳的利用增加碳的耗损，从而使土壤w(TOC)变动不大。土壤中活性越强的有机碳组分受生物及环境条件的影响更为剧烈，对土壤管理措施等反应更快[29]，短时间内会产生变化[30]，因此施肥与不施肥相比较，高、中、低产田土壤w(ASOC)变化幅度比w(TOC)大。LFOC主要为生物残体以及吸附在碎屑上的矿物质[31]，以及微生物的代谢产物，其周转速度快，生物活性高，对耕作经营措施、施肥等变化的响应非常敏感[32]，而且有机肥中含有大量LFOC，同时LFOC对施氮肥的响应比TOC的响应更明显[33]，因此施肥对土壤w(ASOC)的增幅大于w(TOC)。DOC是具有一定溶解性、在土壤中移动比较快、易氧化分解和矿化，对植物、微生物来说活性比较高的那部分土壤碳素[34]。有机无机肥配施一方面增加土壤w(DOC)，另一方面改善土壤环境促进微生物活性，在双重作用下不同层次土壤w(DOC)变幅较大。MBC是土壤有机碳中最活跃的和最容易变化的部分，受土壤有机碳含量、微生物活性和根系分泌物等影响[5]。因为施肥能够促进根系生长，增加土壤微生物活性，所以施肥处理能普遍增加土壤中w(MBC)。由于有机碳不同组分的结构、生物活性以及对农作措施份敏感程度的差异，使有机无机肥配施对有机碳不同组分的影响不同。

3.2 施肥对不同质地土壤有机碳组分的影响差异

图5 不同施肥处理高、中、低产田各层次土壤w(MBC)变化 Fig.5 The variation of MBC content in high, middle and low yielding fields soil with different fertilization treatment

高、中、低产田土壤理化环境及TOC本底值不同，施肥等农艺措施对各农田土壤有机碳组分影响存在差异。高产田由于TOC等组分本底值高，土壤透气性相对较低，施入有机肥可以增加深层土壤透气性，增强土壤微生物活性及根系活力从而促进犁底层（20～40 cm）土壤有机碳的消耗。LFOC在土壤中缺乏土壤胶体的保护[35]，因此施肥对粘粒含量较高的高产田土壤LFOC影响显著。低产田土壤透气性好微生物活性高，但养分含量较低，有机无机肥配施可以增加玉米生物量，而玉米根系分泌物及玉米残落物是土壤有机碳的重要来源[21]，因此施肥对低产田表层土壤有机碳具有显著提升作用；但是施肥后增加微生物碳源，增强微生物活性，促进耕层和犁底层土壤有机碳的消耗，因此低产田施肥处理耕层和犁底层土壤w(TOC)降低，主要使生物活性较高的DOC[34]和MBC[36]含量降低显著。中产田土壤w(TOC)较高，透气性较好，施有机肥一方面增加土壤中有机碳组分含量，另外施肥促进玉米及微生物对土壤有机碳的耗损，使耕层土壤有机碳组分含量变化显著，而表层和犁底层土壤有机碳收支稳定相对变化较小。施肥不仅能够为土壤提供有机碳，同时通过增加玉米残落物提高表层（0～10 cm）土壤w(TOC)，通过提高根系活性促进耕层土壤有机碳耗损，通过改善犁底层环境及促进根系下扎影响犁底层土壤w(TOC)。

表2 土壤有机碳组分与土壤营养指标含量及产量的相关性 Table 2 The correlations of the components of soil organic carbon and the content of soil nutrition with the yields of corn

3.3 有机碳不同组分的产量效益分析

土壤中TOC包含ASOC和稳定性有机碳，ASOC虽然只占TOC的一小部分但是对土壤肥力的影响较大，相关性分析可见（表2），土壤w(TOC)与w(ASOC)、w(LFOC)呈显著正相关，w(ASOC)与w(MBC)和w(LFOC)呈显著正相关，w(MBC)与w(DOC)呈显著负相关。土壤w(TOC)主要受w(ASOC)、w(LFOC)含量影响，w(ASOC)受w(MBC)和w(LFOC)影响，w(DOC)与微生物活性呈反比。根据各有机碳组分与土壤速效磷、速效钾、碱解氮和产量的相关性分析可见（表2），w(ASOC)、w(LFOC)和w(MBC)和w(速效磷)、w(碱解氮)均呈显著正相关，而w(TOC)相关性较小，同时0～40 cm土层w(ASOC)和w(MBC)与产量呈显著正相关。通过线性回归分析，对0～40 cm土壤SOC、ASOC、LFOC、DOC和MBC对产量的贡献率进行分析，多元回归方程为：（产量）=-4665.61-0.008×w(SOC) -0.421×w (ASOC)-0.777×w (LFOC) +5.370×w (DOC) +33.408×w (MBC)。表明ASOC可以作为土壤潜在生产力和土壤管理措施变化引起土壤有机碳变化的早期指标[37]，ASOC对土壤肥力的指示作用比TOC更准确，MBC能够反映土壤肥力的变化[5]。DOC与速效磷、速效钾、碱解氮和产量均呈负相关，表明DOC是生物利用的主要碳组分，因此在春玉米收获时土壤w(DOC)下降。耕层作为玉米根系的主要分布土层，是玉米养分的主要来源，因此该层次w(ASOC)、w(LFOC)、w(MBC)和w(DOC)各产田间变化差异较大，且施肥主要影响中、低产田该层土壤有机碳组分的变化。在农田培肥中应增加农田土壤中的w(ASOC)，以保持地力，使农田持续高产。

4 结论

（1）有机无机肥配施对高、中、低产田各层土壤中w(TOC)、w(ASOC)、w(LFOC)、w(DOC)和w(MBC)平均增加了0.16%、15.82%、48.83%、9.36%和9.32%，LFOC增幅最大，DOC变幅最大。有机无机肥配施，主要增加土壤活性有机碳含量，通过影响微生物、根系活性促进土壤有机碳活化，增加有机碳耗损。不同有机碳组分因其活性、结构不同对施肥的响应存在差异。

（2）高、中、低产田因土壤理化性状和有机碳本底值不同，施肥对其的影响存在差异，施肥明显增加低产田w(TOC)，促进中产田有机碳组分变化，增加高产田有机碳耗损。施肥明显增加了各农田表层土壤有机碳组分含量，降低了高产田犁底层土壤w(TOC)，影响耕层土壤有机碳组分的变化。

（3）土壤w(TOC)与w(ASOC)、LFOC呈显著正相关，w(ASOC)与w(MBC)和w(LFOC)呈显著正相关，w(MBC)与w(DOC)呈显著负相关，w(ASOC)和w(MBC)与土壤速效磷、速效钾、碱解氮和玉米产量呈正相关。土壤中有机碳组分与产量的回归方程为：（产量）=-4665.61-0.008×w（SOC）-0.421×w（ASOC）-0.777×w（LFOC）+5.370×w（DOC）+33.408×w（MBC）。ASOC和MBC具有土壤肥力的指示作用。农田培肥应主要增加土壤活性有机碳含量，已达到提高土壤肥力增加玉米产量。

[1] LAL R. Soil carbon sequestration impacts on global climate change and food security[J]. Science, 2004, 304: 1623-1627.

[2] MCLAUCHLAN K K, HOBBIE S E. Comparison of labile soil organic matter fractionation techniques[J]. Soil Science Society of America Journal, 2004, 68: 1616-1625.

[3] COOKSON W R, ABAYE D A, MARSCHNER P, et al. The contribution of soil organic matter fractions to carbon and nitrogen mineralization and microbial community size and structure[J]. Soil Biology and Biochemistry, 2005, 37: 1726-1737.

[4] 梁尧, 韩晓增, 宋春, 等. 不同有机物料还田对东北黑土活性有机碳的影响[J]. 中国农业科学, 2011, 44(17): 3565-3574.

[5] 王清奎, 汪思龙, 冯宗炜, 等. 土壤活性有机质及其与土壤质量的关系[J]. 生态学报, 2005, 25(3): 513-519.

[6] DOU F G, WRIGHT A L, HONS F M. Sensitivity of labile soil organic carbon to tillage in wheat-based cropping systems[J]. Soil Science Society of America Journal, 2008, 72: 1445-1453.

[7] SOON Y K, ARSHAD M A, HAQ A, et al. The in fluence of 12 years of tillage and crop rotation on total and labile organic carbon in a sandy loam soil[J]. Soil and Tillage Research, 2007, 95: 38-46.

[8] 徐尚起, 崔思远, 陈阜, 等. 耕作方式对稻田土壤有机碳组分含量及其分布的影响[J]. 农业环境科学学报, 2011, 30(1):127-132.

[9] 芦思佳, 韩晓增, 尤孟阳, 等. 施肥对黑土密度分组中碳、氮的影响[J]. 水土保持学报, 2011, 25(2): 177-180.

[10] 徐江兵, 李成亮, 何园球, 等. 不同施肥处理对旱地红壤团聚体中有机碳含量及其组分的影响[J]. 土壤学报, 2007, 44(4): 675-683.

[11] 安婷婷, 汪景宽, 李双异, 等. 施用有机肥对黑土团聚体有机碳的影响[J]. 应用生态学报, 2008, 19(2): 369-373.

[12] 陈茜, 梁成华, 杜立宇, 等. 不同施肥处理对设施土壤团聚体内颗粒有机碳含量的影响[J]. 土壤, 2009, 41(2): 258-263.

[13] 李辉信, 袁颖红, 黄欠如, 等. 长期施肥对红壤性水稻土团聚体活性有机碳的影响[J]. 土壤学报, 2008, 48(2): 259-266.

[14] CHANTIGNY M H, ANGERS D A, ROCHETTE P. Fate of carbon and nitrogen from animal manure and crop residues in wet and cold soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 2002, 34: 509-517.

[15] XU M G, LOU Y L, SUN X L, et al. Soil organic carbon active fractions as early indicators for total carbon change under straw incorporation[J]. Biology and fertility of soils, 2011, 47(7): 745-752.

[16] YANG X Y, REN W D, SUN B H, et al. Effects of contrasting soil management regimes on total and labile soil organic carbon fractions in a loess soil in China[J]. Geoderma, 2012(177/178): 49-56.

[17] GONG W, YAN X Y, WANG J Y, et al. Long-term manure and fertilizer effects on soil organic matter fractions and microbes under a wheat-maize cropping system in northern China[J]. Geoderma, 2009, 149: 318-324.

[18] 高忠霞, 周建斌, 王祥, 等. 不同培肥处理对土壤溶解性有机碳含量及特性的影响[J]. 土壤学报, 2010, 47(1): 115-121.

[19] 薛萐, 刘国彬, 卜书海, 等. 黄土丘陵区不同农田类型土壤碳库管理指数分异研究[J]. 西北农业学报, 2011, 20(10): 192-195.

[20] LEFROY R D B, BLAIR G J. Changes in soil organic matter with cropping as measured by organic carbon fractions and13C natural isotope abundance[J]. Plant Soil, 1993(155/156): 399-402.

[21] JANZEN H H, CAMPBELL C A, BRANDT S A, et al. Light-fraction organic matter in soils from long-term crop rotations[J]. Soil Science Society of America Journal, 1992, 56: 1799-1806.

[22] CURTIND M F M, WILLIAMS P H. Phosphorus in light fraction organic matter separated from soils receiving long-term applications of superphosphate[J]. Biology Fertility Soils, 2004, 37: 280-287.

[23] 武天云, SchoenauJ J, 李凤民, 等. 土壤有机质概念和分组技术研究进展[J]. 应用生态学报, 2004, 15 (4): 717-722.

[24] 吴金水, 林启美, 黄巧云, 等.土壤微生物生物量测定方法及其应用[M]. 北京: 气象出版社, 2006.

[25] RAPHAËL C X, SYLVIE B, OLIVIER C, et al. Impact of organic amendments on the dynamics of soil microbial biomass and bacterial communities in cultivated land[J]. Applied Soil Ecology, 2007, 35: 511-522.

[26] JIANG P K, XU Q F. Abundance and dynamics of soil labile carbon pools under different types of forest vegetation[J]. Pedosphere, 2006, 16(4): 505-511.

[27] PURAKAYASTHA T J, RUDRAPPA L, SINGH D, et al. Long-term impact of fertilizers on soil organic carbon pools andsequestration rates in maize-wheat-cowpea cropping system[J]. Geoderma, 2008, 144: 370-378.

[28] BANGER K, TOOR G S, BISWAS A, et al. Soil organiccarbon fractions after 16-years of applications of fertilizers andorganic manure in a TypicRhodalfs in semi-arid tropics[J]. Nutrient Cycling in Agroecosystems, 2010, 86: 391-399.

[29] GREGORICH E G, CARTER M R, ANGERS D A, et al. Towards a minimum data set to assess soil organic matter quality in agricultural soils[J]. Canadian Journal of Soil Science, 1994, 74: 376-385.

[30] LUNDQUIST E J, JACKSON L E, SCOW K M, et al. Changes in microbial biomass and community composition, and soil carbon and nitrogen pools after in corporation of rye into three California agricultural soils[J]. Soil Biology Biochemistry, 1999, 31: 221-236.

[31] BESNARD E, CHENU C, BALESDENT J, et al.Fate of particulate organic matter in soil aggregates during cultivation[J]. European Journal of Soil Science, 1996, 47: 495-503.

[32] 谢锦升, 杨玉盛, 解明曙, 等. 土壤轻组有机质研究进展[J]. 福建林学院学报, 2006, 26(3): 281-288.

[33] MALHI S S, HARAPIAK J T, NYBORG M, et a1. Total and light fraction organic C in a thin Black Chernozemic grassland soil as afected by 27 annual applications of six rates of fertilizer N[J]. Fertilizer research, 2003, 66: 33-41.

[34] SHEN H, CAO Z H, HU Z Y. Characteristics and ecological effects of the active organic matter in soil [J]. Chinese Journal of Ecology, 1999, 18 (3): 32-38.

[35] SKJEMSTAD J O, DALAL R C, BARRON P F. Spectroscopic in vestigetions of cultivation effects on organic matter of vertisols[J]. Soil Science Society of America Journal, 1986, 50: 354-359.

[36] SPARLING G P, ROSS D J. Biochemical methods to estimate soil microbial biomass: current developments and applications[C]//MULONGOY K, MERCKX R. Soil organic matter dynamics and sustainability of tropical agriculture, Wiley-Sayce. Leuven, 1993: 21-17.

[37] HAYNES R J, BEARE M H. Aggregation and organic matter storage in meso-thermal, hum id so ils[C]//CARTER M R, STEWART B A. Structure and organic matter storage in agriculture soils. Advances in soil science. CRC Lew is Publishers, Boca Raton, 1996: 213-262.