产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床感染分布及耐药性分析

陈 丽，杨卫萍

（江汉大学 附属医院检验科，湖北 武汉 430015）

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床感染分布及耐药性分析

陈 丽，杨卫萍

（江汉大学 附属医院检验科，湖北 武汉 430015）

目的：探讨医院产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的临床感染分布及耐药情况，为临床抗感染治疗合理选择抗生素、减少耐药发生提供依据。方法：收集2010年8月-2011年12月从临床送检标本中分离的大肠埃希菌264株，药敏试验采用K-B纸片扩散法。根据美国临床检验室标准化委员会（CLSI）推荐的纸片扩散法，严格按照其制定的标准进行ESBLs确证实验。采用WHONET 5.4软件进行统计学分析。结果：264株大肠埃希菌中检出134株（50.8%）产ESBLs大肠埃希菌，标本分布以痰标本最高（47.76%），而科室分布以普外科最高（12.61%）。在药敏实验中，产ESBLs菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、头孢西丁的耐药性较低（0%～15.5%）；环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、复方新诺明，阿莫西林/克拉维酸的耐药性较高（41.3%～82.8%）；青霉素类、头孢菌素类及ATM耐药性高（100%），临床不宜选用。结论：产ESBLs大肠埃希菌存在多重耐药性，临床实验室应加强产ESBLs菌株的监测，根据临床药敏结果合理选用抗生素。

产超广谱β－内酰胺酶；大肠埃希菌；耐药性；监测

超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）主要是由质粒介导的能水解含氧亚氨基的β-内酰胺类抗生素的一类β-内酰胺酶，并可被β-内酰胺酶抑制剂（如克拉维酸）所抑制，主要以TEM、SHV、CT X-M型为多见［1］。其存在是导致细菌耐药的重要因素。ESBLs的产生和播散给临床感染的治疗带来极大挑战。因此，及时、准确地监测产ESBLs菌株对指导临床合理使用抗生素，有效控制耐药菌的产生、播散及流行具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集2010年8月-2011年12月在江汉大学附属医院住院患者送检的痰液、血液、尿液、胆汁、脓液和分泌物等标本264株中分离出的产ESBLs大肠埃希菌，共134株。

1.2 菌种鉴定

采用MicroScan WalkAway96全自动细菌鉴定仪及NC-31鉴定药敏复合板鉴定，结合《全国临床检验操作规程》鉴定到种。

1.3 质控菌株

大肠埃希菌ATCC25922，非产ESBLs的全敏株，购自卫生部临床中心。

1.4 药敏纸片和培养基

头孢噻肟（CTX）、头孢他啶（CAZ）、头孢哌酮/舒巴坦（SCF）、氨苄西林（AMP）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、阿米卡星（AK）、庆大霉素（GN）、环丙沙星（CIP）、亚胺培南（IPM）、复方新诺明（SXT）、左氧氟沙星（LEV）、头孢吡肟（FEP）、头孢曲松（CRO）、美罗培南（MEM）、呋喃妥因（F）、氨曲南（ATM）、头孢他啶/克拉维酸（CD02）、头孢噻肟/克拉维酸（CD03）药敏纸片均购自英国Oxoid公司，M-H培养基购自广州迪景微生物科技有限公司。

1.5 方法

1.5.1 ESBLs检测的筛选和确证试验 按照CLSI［2］2007年版标准：当头孢他啶的抑菌环直径≤22 mm，氨曲南的抑菌环直径≤27 mm，头孢噻肟的抑菌环直径≤27 mm，头孢曲松的抑菌环直径≤25 mm时，提示可能产生ESBLs；做双纸片扩散法进行确证实验，将头孢他啶30 μg、头孢他啶/克拉维酸 30/10 μg和头孢噻肟 30 μg、头孢噻肟/克拉维酸30/10 μg贴于涂抹好菌液M-H平板上，孵育16～18 h，分别测定抑菌环直径，两个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5 mm时，判定为产ESBLs。

1.5.2 药敏试验 采用K-B法，结果的判定依照CLSI2007版提供的抗微生物药物敏感性试验标准执行。

1.5.3 统计学方法 采用WHONET 5.4软件进行统计分析。

2 结果

2.1 产ESBLs的检出率

264株大肠埃希菌中检出134株产ESBLs菌，检出率为50.8%。

2.2 标本分布

134株产ESBLs大肠埃希菌中，标本分布以痰标本最高，占47.76%，详见表1。

表1 134株产ESBLs菌在各种标本中的分布及构成比

2.3 科室分布

134株产ESBLs大肠埃希菌中，科室分布以普外科最高，占24.63%，详见表2。

表2 134株产ESBLs菌在各科室的分布及构成比

2.4 产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析

134株产ESBLs大肠埃希菌对抗生素药敏结果显示：产ESBLs菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、头孢西丁的耐药性较低（0%～15.5%）；环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、复方新诺明，阿莫西林/克拉维酸的耐药性较高（41.3%～82.8%）；青霉素类、1～3代头孢菌素类及单环内酰胺类如ATM耐药性高（100%），具体结果见表3。

表3 产ESBLs大肠埃希菌对18种抗生素的耐药率

3 讨论

大肠埃希菌是医院感染的重要致病菌之一。近年来由此菌引起的各种感染率呈上升趋势，且此菌对多种抗生素耐药。进入20世纪80年代后，随着第三代头孢菌素的应用，诱发细菌耐药株的不断增加，尤其是多重耐药性的出现，常导致临床抗生素治疗的失败和病程迁延。因此，研究产ESBLs大肠埃希菌耐药分布，可以为临床合理用药、减少耐药发生提供依据。

通过对本院134株产ESBLs大肠埃希菌调查显示，产ESBLs菌的检出率为50.8%，低于张淑青等［3］的报道（67.3%），但高于杜迎雪等［4］的报道（38.6%）。这种耐药性的差异可能与检测方法、地域、抗菌药物用量有关。

从表1结果可见，产ESBLs菌来源于痰液有64株（47.76%），其次为尿液36株（26.87%），脓及分泌物15株（11.19%）等，表明产ESBLs大肠埃希菌主要引起呼吸道、泌尿道、手术切口等部位感染，因此临床医务人员应密切注意上述感染部位，早期发现，合理治疗。从表2结果可见，产ESBLs菌株以普外科、干部科、泌尿外科、呼吸内科、ICU为高感染科室，可能是由于外科患者手术等各种开放性操作多，广谱抗生素的使用有关；内科患者住院时间长基础疾病多等有关；ICU患者存在严重的的基础疾病、粒细胞减少或者褥疮，患者长期暴露于不同抗生素下，大量应用免疫抑制剂、化疗药物和肾上腺皮质激素治疗使机体免疫力下降等有关。

134株产ESBLs大肠埃希菌对18种抗生素的药敏结果显示：产ESBLs菌株对亚胺培南、美罗培南的敏感率为100%，因此，治疗产ESBLs大肠埃希菌引起的感染首选碳青酶烯类药物，但随着碳青酶烯类药物应用增多，已经有耐亚胺培南和美罗培南的产ESBLs大肠埃希菌［5］。对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦，呋喃妥英的耐药性较低，也作为临床常规选择用药。对其他抗生素耐药率均较高（≥41.3%），这表明产ESBLs菌不仅对第三代头孢菌素类呈现耐药，而且对氨基糖甙类、氟喹诺酮类和磺胺类等药物也有多重耐药现象，这是可能因为该类菌株同时携带了多种药物的耐药基因［6］。

临床上广谱头孢菌素类，尤其是第三代头孢菌素的广泛使用和滥用，是导致产ESBLs菌株增多的主要原因。ESBLs的出现给临床抗感染治疗带来众多问题，如病人住院时间延长、治疗经费增高、治疗药物可选择范围变窄、预后差、病死率上升和院内感染几率升高等。因此，临床实验室应重视对产ESBLs细菌的检测与监测，防止并控制由其引起的医院感染。

［1］ 张永标，张扣兴，唐英春，等.产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2004，24（7）：577-582.

［2］ Clinical and laboratory standards institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing；sev⁃enteenth informational supplement［S］.CLSI，2007，M100-S17.

［3］ 张淑青，王贺水，李宏芬，等.大肠埃希菌感染的临床分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2012，22（15）：3385-3386.

［4］ 杜迎雪，于魁忠，郭晓红，等.临床产ESBLs大肠埃希菌的分布特征及耐药性监测［J］.中国民康医学，2007，19（5）：336，351，386.

［5］ 任志强，刘丽君，郭民，等.产ESBLs肺炎克雷伯和大肠埃希茵耐药性分析［J］.中南药学，2008（5）：630-632.

［6］ Weisser J，Wiedemann B.Inhibition of R-plasmid trans⁃fer in Escherichia coli by 4-quinolones［J］.Antimicro⁃bial Agents and Chemotherapy，1987，31（4）：531-534.

Distribution of Extended-spectrum-β-lactamases-producing Escherichia coli and its Antibiotic Resistance Analysis

CHEN Li，YANG Wei-ping
（Department of Clinical Laboratory，Affiliated Hospital，Jianghan University，Wuhan 430015，Hubei，China）

Objective：To explore the distribution and antibiotic resistance of extended-spec⁃trum-β-lactamases（ESBLs）-producing Escherichia coli in the hospital，so as to provide reference for reasonable utilization of antibiotic and reducing of drug resistance.Methods：From Aug，2010 to Dec，2011，264 E.colis were isolated from clinical specimens，the antibiotic susceptibility was test⁃ed by K-B method.According to CLSI standard，ESBLs was confirmed，statistical analysis was tak⁃en with WHONET 5.4 software.Results：Among 264 E.coli isolates，134（50.8%）were ESBLs-pro⁃ducing strains.The sputum was the highest sources of specimens（47.76%），the department of gen⁃eral surgery was the highest section-office of distribution（12.61%）.The resistance rates for ES⁃BLs-producing E.coli to imipenem，meropenem，piperacillin/tazobactam，cefoperazone/sulbactam，amikacin，cefoxitin and nitrofurantoin were lower and between 0%to 15.5%；The resistance rates to ciprofloxacin，levofloxacin，gentamicin，compound sulfamethoxazole and amoxicillin/clavulanate were higher and between 41.3%to 82.8%；The resistance rates to penicillins，cephalosporins and aztreonams were highest and reached 100%，so they are not suitable for clinic.Conclusion：ES⁃BLs-producing E.coli has multidrug-resistant，so it is necessary to strengthen the surveillance in clinical laboratory，to use antibiotics according to antibiotic susceptibility test.

extended-spectrum-β-lactamases-producing；Escherichia coli；drug resis⁃tance；surveillance

R446.5；R197.323.4

：A

：1673-0143（2013）06-0076-03

（责任编辑：范建凤）

2013－04－18

陈 丽（1980—），女，医师，硕士，研究方向：微生物检验临床。