维药阿那其根醇提物及原粉胶囊的急性毒性试验※

金小越王智颖郭世民

维药阿那其根醇提物及原粉胶囊的急性毒性试验※

金小越1王智颖1郭世民2

目的测定阿那其根醇提物及原粉胶囊剂对小鼠的急性毒性，评价其安全性，为临床安全用药提供依据。方法采用最大给药量测定法，将180只小鼠（雌、雄分开）随机分成三组，每组60只，再按高、中、低三个剂量平行分为两组，用小鼠灌胃给药法测定阿那其根醇提物（1g/1ml）、胶囊剂（过200目筛原药粉）的最大给药量，连续观察14d，研究其安全性。结果阿那其根醇提物、胶囊剂的毒性都很低。胶囊剂最大给药量为48g/kg，相当成人60kg用量的80倍以上；醇提物最大给药量为96g/kg，相当成人60kg用量的480倍以上。未测得灌胃给药小鼠半数致死量LD50。结论阿那其根无明显毒性，临床常用量安全可行。

阿那其根；急性毒性试验；最大给药量

阿那其根为菊科植物罗马除虫菊的根。罗马除虫菊Anacyclus pyrethrum.DC.多年生草本，高15～45cm，多具长柔毛，根粗壮，圆柱形或长倒圆锥形，支根少。分布于北非或南部欧洲，我国新疆亦有分布。其根含墙草碱（Pellitorine）、除虫菊酯、菊糖[1]。具有生干生热，祛寒强筋，开通阻滞，祛风止痛，燥湿化痰，滋补神经等功效；主治湿寒性或黏液质性疾病。阿那其根在临床应用多年，主要应用于白癜风、肿瘤、膝骨关节炎等疾病的治疗。在维医药临床治疗中抗炎镇痛作用明显[2]。本文对阿那其根醇提物、原粉胶囊进行急性毒性试验研究，旨在为阿那其根安全性做出评估，为其临床用药提供参考，也为开展药效学等研究提供理论基础和科学依据。

1 资料与方法

1.1 试验动物昆明种小鼠，体质量（20±2）g，雌雄各半（购自新疆疾研所动物饲养中心）。小鼠分性别饲养于空调室内，室温（22±2）℃，湿度（70 ±5）%，小鼠专用料饲喂，自由饮水和摄食，自然光照。试验前小鼠饲养3d，观察其健康状况。选择健康、营养状况良好的小鼠进行试验。

1.2 药物阿那其根原粉胶囊（自制）：将购置的阿那其根药材粉碎，并过200目筛，装入胶囊中（0.27g/粒）。阿那其根的醇提液制备：取阿那其根药材500g，用4倍量的95%乙醇50℃回流提取1.5h，共2次，提取液过滤浓缩，制成1g：1ml药液。

1.3 仪器R-200D电子分析天平（德国，Sartorius）、w-201B数显恒温水浴锅（江苏金坛市医疗仪器厂）、鼠笼（带饲喂器、饮水器和垫料）、小鼠饲料、酒精棉球、镊子、剪刀等。

1.4 半数致死剂量（LD50）的测定预试验：选取昆明种小鼠30只，雌雄各半，适应性喂养3d后，随机分为三组，即对照组、阿那其根醇提组、原粉胶囊组。禁食不禁水16h后，对照组给予同体积蒸馏水，阿纳其根醇提液组、原粉胶囊组分别以最大给药浓度（0.40g•ml-1），最大给药体积（0.04ml•g-1）口服一次性给药。给药后常规饲养，连续观察7d，结果表明，小鼠全部存活，未出现任何中毒现象。口服给药无法测出本品的半数致死剂量（LD50），故测定最大给药量或最大耐受量[3]。

1.5 最大给药量试验选择健康且体质量符合要求的昆明种小鼠180只，雌雄各半，适应性喂养3d后，随机分为三组，即对照组、阿那其根醇提组、原粉胶囊组，每组60只小鼠。禁食不禁水12h后，对照组给予同体积蒸馏水，阿纳其根醇提液组、原粉胶囊组分别以最大给药浓度（0.40g•ml-1），最大给药体积（0.04ml•g-1）灌胃一次性给药。给药容量40ml/kg•bw，24h内给药3次，并将剂量分成高、中、低三个组，每个浓度梯度组平行两组。间隔期间禁食不禁水。给药组小鼠灌胃给予 0.4g/ml×3，24h内累计给药48.00g/kg，连续观察14d，详细记录对照组、醇提取物组、原粉胶囊组动物每天一般状态及体质量变化、摄食量变化和死亡情况。

1.6 统计学分析采用SPSS 13.0统计软件进行数据处理，所有数据均用（±s）表示，组间比较采用t检验。P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果

2.1 剂量设计小鼠临床等效量（按照成人每日用量1.08g/60kg）×70kg×0.0026/0.02kg=0.1638g/kg；以此临床等效量作为小鼠的给药低剂量，并以此剂量的8倍、16倍、32倍常用量分别代表低、中、高三个剂量，依次为1.31、2.62、5.24g/kg。阿那其根原粉胶囊、醇提物的总给药量分别为 14.00g/kg、48.00g/kg。胶囊剂的平均最大给药量相当于临床用药量的82倍；醇提物平均最大给药量相当于临床用药量的240倍。

2.2 小鼠体质量的变化从表1可以看出，醇提物组小鼠体质量增量、相对增量都略低于对照组，原粉胶囊组小鼠体质量增量、相对增量都略高于对照组。

表1 阿那其根醇提物和胶囊剂对小鼠灌胃最大给药量试验结果(±s)

表1 阿那其根醇提物和胶囊剂对小鼠灌胃最大给药量试验结果(±s)

醇提物 21.23±1.12 29.71±2.32 33.02±3.13 11.79±2.01 0.56±2.12 ＞0.05相对增量(%) P胶囊剂 20.98±0.93 29.46±3.01 34.18±3.25 13.20±2.32 0.63±2.09 ＞0.05对照组 21.11±1.04 30.06±2.99 33.74±3.64 12.63±2.60 0.60±2.34 ＞0.05

2.3 小鼠临床表现和剖检变化大剂量给药当天，给药组（阿那其根原粉胶囊、醇提液）两组小鼠精神状态良好，皮毛未见明显异常，进食饮水量无异常，体重正常增长。连续观察14天，所有小鼠皮毛有光泽，采食、活动均正常，试验期间无小鼠死亡。试验结束时，给药组和对照组小鼠解剖后肉眼观察皮下、心、肝、脾、肺、肾和胃肠道等器官无明显眼观异常。表明阿那其根原粉、醇提物未引起实质性脏器的病理损伤。

3 结论与讨论

许多民族药物毒性较小，尤其是维药，大部分是药食同源，常无法测出LD50，多采用最大给药量或最大耐受剂量测定试验动物的耐受量。试验结果表明，阿那其根醇提物及胶囊剂以最大给药浓度、最大给药体积每日3次灌胃给药后，小鼠无死亡及异常情况出现。与Kuttan S等[4]报道的阿那其根醇提物的慢性毒性试验结果相一致。本次试验小鼠用量胶囊剂相当于成人60kg用量的82倍，醇提物小鼠用量相当于成人60kg用量的240倍，可提供临床应用。阿那其根急性毒性试验还应结合长期毒性试验及多种检查结果综合分析评价其安全性，此方面的研究正在深入进行。

[1] 刘勇民.新疆维吾尔药志(下册)[M].乌鲁木齐：新疆人民出版社,2009：434-435.

[2] 帕尔哈提尔•赛买提,玉素甫•买提努尔,热甫开提•赛吾力丁,等.维药阿那其根散剂外敷治疗膝骨关节炎的临床疗效评价研究[J].中国民族医药杂志,2012(9)：1-3.

[3] 王东升,李锦宇,罗超应,等.白术提取液急性毒性试验[J].西北农业学报,2011,20(5)：40-43.

[4] Kuttan S,Ronald D,Venkatesan S. Toxicological evaluation of ethanolic extrac of Anacyclus pyrethrum in albino wistar rats[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Disease.Disea,2012,2(6)： 437-441.

R965

A

1673-5846(2013)09-0031-02

1新疆医科大学第六附属医院，新疆乌鲁木齐 830002

2云南省中医中药研究院，云南昆明 650223

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目（2013211A056）

金小越（1961-），女，副教授，研究方向：药物分析。