芎钩天麻丸中芍药苷的含量测定方法

高德荣

【摘 要】目的：建立高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量。方法：采用Agilengt Eclipse Plus-C18色谱柱，流动相：乙腈-0.1%磷酸（14：86）；流速：0.6 ml·min-1；检测波长230nm。结果：芍药苷在0.4800～8.160μg范围内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为98.94%，RSD=0.36%（n=6）。结论：本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量。

【关键词】含量测定；技术

芎钩天麻丸是由川芎、钩藤、当归、石决明、桑寄生、细辛、珍珠母、黄芩、白芍、天麻等14 味药材加工制成的医院制剂，具有滋肾平肝、潜阳熄风、除晕止痛、降血压之功效，主治肝阳上亢、血虚失养引起的高血压，紧张性、血管性神经性头疼、头晕[1]。白芍为方中君药，芍药苷为白芍的主要有效成分，具有扩张血管、保护脑缺血、抗血栓、抗血小板聚集、抗高血脂等作用，对芎钩天麻丸疗效的发挥起重要作用。现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。本文以芍药苷为指标成分，建立了测定芎钩天麻丸中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。

1.仪器与试药

1.1仪器

Agilengt 1260高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平 DSQ10260超声仪。

1.2试药

芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-201035）；乙腈为色谱纯，水为本单位自制重蒸馏水，其余试剂为分析纯。芎钩天麻丸由柘城县人民医院提供。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Agilengt Eclipse Plus-C18色谱柱（4.6×100mm）

流动相：乙腈-0.1%磷酸（14：86）为流动相[2]；流速0.6ml·min-1；检测波长230nm；进样量10μl；理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

2.2线性关系考察

取黄芩苷对照品约12.0mg，精密称定，置25ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照“2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9、11、13、15、17μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程：Y=235.05674X+12.52003 r=0.9999。结果表明，黄芩苷对照品在0.4800～8.1600μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。

2.3供试品溶液及阴性对照溶液的制备

取本品约0.1g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。另取缺白芍的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。

2.4干扰试验

取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，黄芩苷的保留时间为8.818 min，理论塔板数为3512，黄芩苷与相邻峰的分离度大于1.5，峰型对称。阴性样品无干扰。

2.5精密度试验

取2.2对照品溶液，重复进样6 次，每次10μl，记录绿原酸峰面积，RSD=0.39%（n=6），表明精密度良好。

2.6稳定性试验

取同一对照品溶液，分别在0、2、4、8、12、16、24h进样测定，RSD=0.43%，供试品溶液在24 小时内峰面积基本稳定。

2.7加样回收率试验

称取6 份已知含量为6.173mg/g的样品约0.05g，精密称定，分别置1～6 号锥形瓶中，分别精密加入对照品储备液1ml，按照“4、”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。

2.8样品测定

取3批样品，按“4、”项下方法制备供试品溶液，各进样10μl，按外标法计算绿原酸的含量，结果见表2。

3.讨论

3.1提取溶剂的选择

有文献报道以稀乙醇为提取溶剂，经过比较发现以甲醇为溶剂测定含量所得的含量高。

3.2流动相选择

本试验曾用甲醇-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液（40∶65）为流动相，主成分峰出峰效果较差，而采用乙腈-0.1%磷酸（14：86）为流动相，色谱峰显示，黄芩苷与相邻的组分分离度大于1.5，具有较好的分离效果，且理论板数较高。

【参考文献】

[1]朱德杰.高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量.

[2]谢文健.HPLC法测定莪棱胶囊中芍药苷的含量[J].中国药师，2010，13（4）：592-593.