硒对酒精所致小鼠睾丸组织酶损伤影响的实验研究

陈 鹏 许秀举*

（包头医学院第一附属医院，包头医学院营养教研室，内蒙古 包头 014060）

硒对酒精所致小鼠睾丸组织酶损伤影响的实验研究

陈 鹏 许秀举*

（包头医学院第一附属医院，包头医学院营养教研室，内蒙古 包头 014060）

目的 通过实验，研究硒对酒精性睾丸损伤小鼠的保护作用。方法 采用分光光度法对小鼠睾丸组织琥珀酸脱氢酶和丙二醛进行检测。结果 硒中剂量组和硒高剂量组琥珀酸脱氢酶含量高于空白对照组和白酒对照组；空白对照组、硒低剂量组、硒中剂量组和硒高剂量组丙二醛含量低于白酒对照组。并且高剂量的硒对琥珀酸脱氢酶作用更明显，中剂量的硒对丙二醛的作用更明显。结论 硒有效地降低酒精对小鼠的睾丸组织酶的损伤。

硒；睾丸；酒精；丙二醛；琥珀酸脱氢酶

1957年Schware和Fortz发现硒能使免于膳食性肝坏死，并提出硒是机体不能缺少的、必需的微量元素，硒对动物的有益作用才开始为人们所认识[1]。1913年Rorruck发现硒是谷胱甘肽过氧化物酶的成分，揭开了硒具有抗氧化功能之谜[2]。硒在免疫细胞功能、甲状腺激素功能，精子的形成和游动及前列腺素的功能等方面，都起一定作用。本研究主要探讨硒对酒精所致小鼠睾丸组织酶的损伤有无保护作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象

昆明种小鼠，均为雄性，体质量18～24g，由内蒙古大学实验动物中心提供，为清洁级动物。

1.2 仪器及试剂

721分光光度计，TG328A电光分析天平，TGL-16B高速台式离心机，富硒胶囊（天津生物工程有限公司），丙二醛检测试剂盒、琥珀酸脱氢酶检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

1.3 研究方法

本研究采用动物实验方法进行，试剂采用南京建成研究所提供试剂盒的方法测定丙二醛和琥珀酸脱氢酶，统计采用SPSS11.5统计软件分析。

1.3.1 动物分组及处理

将50只健康昆明种雄性小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组，白酒对照组，硒低、中、高三个剂量组，含硒剂量分别为4.17µg/kg、8.33mg/kg、16.67mg/kg。其中空白对照组和白酒对照组饮用自来水，其他各组分别饮用自由溶于水的富硒胶囊溶液。各组大鼠均采用自由饮用的方式，连续饮用30d。第30天时对小鼠进行空腹白酒灌胃实验。实验时采用一次大剂量白酒灌胃的方法，按12mL/（kg·bw）剂量灌胃各组小鼠，16h后处死小鼠，取小鼠睾丸组织测定各项指标。

1.3.2 睾丸组织匀浆的制备

处死小鼠后立即打开腹腔取出睾丸组织，在冰盘上用冷生理盐水冲洗，除去血液，滤纸拭干，放在小烧杯中用移液器加入冷生理盐水，然后用小剪刀尽快剪碎组织，放入玻璃匀浆管，补足冷生理盐水制成组织匀浆。组织匀浆用低温离心机2500rpm离心10min，取适量上清液进行琥珀酸脱氢酶、丙二醛的测定。

2 结 果

2.1 小鼠睾丸组织琥珀酸脱氢酶检测情况

硒中剂量组、硒高剂量组与白酒对照组比较，结果有统计学差异（P＜0.05）；硒高剂量组与空白对照组比较，结果有统计学差异（P＜0.05）。提示补充硒元素对酒精损伤睾丸的琥珀酸脱氢酶的升高有一定的作用，并且高剂量的硒作用更加明显。结果见表1。

表1 硒对小鼠睾丸组织琥珀酸脱氢酶检测结果

2.2 小鼠睾丸组织丙二醛检测情况

空白对照组、硒低剂量组、硒中剂量组和硒高剂量组与白酒对照组比较，结果有统计学差异（P＜0.05）；白酒对照组与空白剂量组比较，结果有统计学差异（P＜0.05）。提示补充硒元素对酒精损伤睾丸的丙二醛的降低有一定的作用，并且中剂量的硒作用更加明显。结果见表2。

表2 硒对小鼠睾丸组织丙二醛检测结果

3 讨 论

目前关于男性生殖方面的研究已受到广泛关注，有学者对重金属、细胞毒药物及免疫抑制剂、生殖激素等对精子发生的影响做了深入的研究[3]，大量临床观察和流行病学调查证实男性酗酒可影响身体健康并引起后代发育异常[4]，男性酗酒可使性功能减退并引起后代发育和行为异常[5]。

琥珀酸脱氢酶（SDH），是线粒体内膜的结合酶，为线粒体的一种标志酶。作为参与三羧酸循环的关键酶，琥珀酸脱氢酶是反映线粒体功能的标志酶之一，其活性一般可作为评价三羧酸循环运行程度的指标，对于评价精子线粒体功能等具有重要意义[6]。丙二醛（MDA）是氧自由基与生物膜多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，与氧自由基的量一致，由乙醛和甲酸乙酯在碱作用下缩合而得，可在高真空下升华精制，与蛋白质不相容，有潜在的致癌性。脂质氧化终产物丙二醛在体外影响线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性。

酒精及其代谢物乙醛可以在体内产生攻击膜上的不饱和脂肪酸即可诱发脂质过氧化的自由基，而易受过氧化攻击进而影响精子功能的不饱和脂肪酸富含在睾丸线粒体膜、精子之中。生物组织中不饱和脂肪酸过氧化分解形成丙二醛，通过测定丙二醛能有效判断脂质过氧化程度。研究表明[5]，长期摄入乙醇可引起睾丸丙二醛增多、还原型谷胱甘肽降低。酒精中毒者有不同程度的睾丸萎缩。有报道酒精对18岁以前男性生殖系统的危害比成人更严重。

本研究显示，在小鼠进行补硒后，可提高琥珀酸脱氢酶的浓度，并降低丙二醛的浓度，使得酒精对小鼠睾丸的损伤降低，起到一定的保护作用；根据对小鼠补硒的不同剂量，可以从研究中得出高剂量的硒对琥珀酸脱氢酶的提高作用更明显，中剂量的硒对丙二醛的降低作用更明显。

[1]曹纯章,卜丽莎,高申,等.硒对培养大鼠心肌细胞抗氧化损伤作用的研究[J].营养学报,2000,22(4):298-302.

[2]袁建敏,呙于明.硒的生物学功能及其在蛋鸡生产中的作用[J].中国饲料,1998(1):59-61.

[3]廖晓岗,李维信.镉对大鼠睾丸间质细胞损伤及锌对其保护的形态学研究[J].生殖与避孕,1999,19(5):290.

[4]Ledig M,Misslin R,Vogel E,et al.Paternal alcohol exposure: developmental and behavioral effects on the offspring of rats[J].Neurop harmacology,1998,37(1):57.

[5]Emanuele MA,Emanuele N.Alcohol and the male reproductive system[J].J Alcohol Res Health,2001,25(4):282-287.

[6]Grattagliano I,Vendemiale G,Errico F,et al.Chronic ethanol intake induces oxidative alterations in rat testis[J].J ApplToxicol,1997, 17(5):307-311.

R-03

：B

：1671-8194（2013）07-0092-02

*通讯作者Email：xuxiuju8629@163.com