HPLC法测定消渴平片中盐酸小檗碱的含量

梁玉香 洪岩斌 贺 玲

（1 辽宁富东制药有限公司，辽宁 本溪 117004；2 沈阳三电有限公司，辽宁 沈阳 110045）

HPLC法测定消渴平片中盐酸小檗碱的含量

梁玉香1洪岩斌2贺 玲1

（1 辽宁富东制药有限公司，辽宁 本溪 117004；2 沈阳三电有限公司，辽宁 沈阳 110045）

目的 建立消渴平片的含量测定方法。方法 样品经处理后用 HPLC 法，选择 265nm 作为检测波长。结果 回收率 RSD=1.30%，重复性 RSD=1.50%，精密度 RSD=1.51%。结论 HPLC 法测定消渴平片含量的方法准确、可靠，可作为其质量控制方法。

高效液相；消渴平片；盐酸小檗碱；含量测定

1 实验材料

1.1 仪器

LC-10UV检测器、LC-10P液相泵（大连江申分离科学技术公司）流动相：以乙腈-0.1%磷酸的溶液（每100mL加十二烷基磺酸钠0.1g）比例（48∶52）；流速：1mL/min；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱的峰面积计算应不低于4000。

1.2 试药

乙腈为色谱纯（天津市四友生物医学技术有限公司），甲醇、盐酸、十二烷基磺酸钠、磷酸为分析纯，水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 绿原酸测定波长的选择吸取盐酸小檗碱对照品溶液（含量为1mg/ mL）50μL，在UV-260紫外分光光度计上于400～200nm波长范围内扫描，结果表明：盐酸小檗碱对照品稀释溶液在265nm的附近均有强吸收峰。

2.2 色谱条件与系统适用性的试验。用十八烷基硅烷键合硅胶做为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸的溶液（每100mL加十二烷基磺酸钠0.1 g）比例（48∶52）；流速：1mL/min；检测波长为265nm。理论板数以盐酸小檗碱的峰面积计算应不低于4000。

2.3 对照品溶液制备。用十万分之一的天平秤取盐酸小檗碱的对照品适量，精密称定，加甲醇配制成每1mL约含10μg的溶液，摇匀，即得。

2.4 供试品溶液的制备。取消渴平片重量差异项下20片，研细，取约0.3 g，精密称定，放置在具塞锥形瓶中，精密量取盐酸-甲醇（1∶100）50mL，将具塞瓶密塞，称定重量，置60℃水浴中加热15min后，取出，超声处理（功率为250W，频率为40kHz）30min，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇（1∶100）补足减失的重量，摇匀，滤过。

2.5 对照品重复性试验精密吸取盐酸小檗碱对照品稀释溶液（0.01mg/ mL）5μL，注入液相色谱仪中，连续进样6次，测定峰面积，其实验结果表明：对照品精密度实验良好，RSD1.30%。

2.6 空白试验按消渴平片处方比例取各药材（除去黄连），按消渴平片制备工艺制成阴性对照品，再按“含量测定”项下试验，制备成阴性对照溶液。同时将阴性对照溶液、供试品溶液及对照品溶液各5μL，分别注入大连江申液相色谱仪中，测定结果表明，阴性对照溶液的图谱在绿原酸色谱峰保留时间处无其它色谱峰干扰。

2.7 稳定性试验取本品20片，用乳钵研成细粉，取0.3g，用万分之一天平精密称定，按“含量测定”项下的供试液制备方法试验，分别在放置了0、4、8、12和24h时，吸取供试液5μL，分别注入大连江申液相色谱仪中，测定盐酸小檗碱色谱峰峰面积，计算。结果表明，供试液放置24h，盐酸小檗碱含量基本稳定，RSD1.50%。

2.8 精密度试验取样品20片，称定重量，研成细粉，取0.3g，精密称定，按“含量测定”项下的供试液制备方法试验，精密吸取供试液5μL，共计6份，分别注入江申液相色谱仪中，测定盐酸小檗碱峰面积。结果可知，本测定方法，供试品溶液盐酸小檗碱精密度良好。RSD为1.51%。

2.9 回收率实验取样品20片，称定重量，研细，约取0.2g，精密称定，共计六份，分别精密加入5μg/mL的盐酸小檗碱对照品的溶液各1.0mL，按照“含量测定”项下试验，测定并计算加标样品中绿原酸，得出本次试验含量测定方法下绿原酸的回收率。结果显示，本方法回收率良好。RSD为1.28%。

2.10 样品的含量测定取不同批号的消渴平各20片，称定重量，研细，取约0.3g，精密称定，按“含量测定”项下供试液制备的方法试验，测定并计算盐酸小檗碱含量，其结果见表1。

表1 样品含量

3 小 结

①检测波长的选择：本实验采用UV-260紫外分光光度计对含有盐酸小檗碱对照品溶液在400-200 nm波长范围内进行扫描，结果显示在265 nm波长处有强吸收峰，因此，选定265nm做为检测波长。流动相的选择：曾试用过甲醇-磷酸二氢钾的溶液（0.05 mol/L）（25∶75），乙腈-磷酸二氢钾的溶液（0.05 mol/L）（35∶65），它们的分离效果与保留时间均不够理想，发现以乙腈-0.1%磷酸溶液（每100mL加十二烷基磺酸钠0.1g）（48∶52）时，分离效果良好，故确定以上色谱条件为含量测定条件。②本方法中，消渴平片溶液中的盐酸小檗碱与杂质得到了良好的分离，实验结果充分的满足了药典规定的方法及系统适应性要求。③本方法准确度高，重复性好，可见高效液相色谱系统完全能够达到中国药典（2010版）当中对消渴平片中盐酸小檗碱含量的测试要求。④结果显示，本厂所生产的消渴平片样品中盐酸小檗碱含量0.60%，满足药典要求的不低于0.50%的含量。

[1]毛 春芹,谢辉,池 玉梅,等.高 效 液相色谱 法测定 岩黄 连 药材中3种生物碱[J].中成药,2011,33(8):1368-1370.

[2]高 效 液相色谱 法测定 双黄 消炎 片中盐酸 小 檗碱含 量[A].第九 届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集[C].2007.

[3]国家药典委员会.中国药典2010版(二部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:附录9.

R927.2

：B

：1671-8194（2013）10-0078-02