渗透树脂对乳、恒磨牙邻面早期龋损渗透能力的对比研究

2013-05-10 01:29刘永红葛立宏陈惠珍
华西口腔医学杂志 2013年2期

刘永红 葛立宏 陈惠珍

[摘要] 目的 比较渗透树脂在乳、恒磨牙邻面早期龋损中的渗透能力。方法 选取邻面呈白垩色改变的早期龋损离体乳磨牙32颗、恒牙(磨牙或前磨)36颗,垂直于龋损表面将牙齿切开,在体视显微镜下进行病损的组织学分

级(C1~C4),C1:龋损位于釉质外1/2;C2:龋损位于釉质内1/2;C3:龋损位于牙本质外1/2;C4:龋损延伸至牙

本质内1/2。C4被排除。随后病损用15%的盐酸酸蚀2 min后,进而使用渗透树脂渗透5 min。制作牙切片,使用双荧光染色技术,在激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)下观察样本。分别测量乳、恒牙的病损深度(LD)和渗透树脂的渗透深度(PD),计算渗透百分数(PP),并对其进行统计学分析。结果 在所有组织学病损分级(C1~C3级)中,乳、恒磨牙PP间的差异无统计学意义(P>0.05);但是,在C1组织学病损分级中,乳牙的渗透能力优于恒牙(P<0.05),在C2和C3组织学病损分级中,乳、恒牙PP间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 渗透树脂对乳、恒磨牙邻面早期

龋损均有很好的渗透作用。尤其对较浅的早期龋(C1级),渗透树脂治疗乳牙的效果优于恒牙。

[关键词] 早期龋; 渗透树脂; 激光扫描共聚焦显微镜; 渗透百分数

[中图分类号] R 781.05 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.02.012

早期龋在临床上表现为白垩色斑块,典型的病理损害是釉质表层相对完整而表层下严重脱矿,其微观结构显示有许多微小孔隙,这些小孔隙对有机酸的扩散、矿物质的进出提供了通道,但同时也为树脂的渗入提供了便利。

渗透树脂是一种新型材料,它可以进入早期龋损的微小孔隙,堵塞和封闭其通道,进而阻止龋损的进展[1]。已有研究结果显示:渗透树脂可以深入地进入乳牙[2]和恒牙[3]的邻面早期龋损,阻止病损的进展。但是渗透树脂在乳、恒牙早期龋损中的渗透能力有无区别,孰强孰弱,目前尚无相关报道。本研究旨在通过对渗透树脂在乳、恒牙邻面早期龋损中渗透能力的比较,了解其渗透能力的差异,进而为渗透树脂在乳、恒牙早期龋损中的临床应用提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料和设备

渗透树脂包括酸蚀剂(Icon-Etch)和渗透剂(Icon-Infiltrant)(DMG公司,德国),罗丹明B染料、荧光素钠染料(Sigma公司,美国),激光扫描共聚焦显微

镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)、体视显微镜(Olympus公司,日本)。

1.2 样本的选取

选取2011年9—12月河北医科大学第二医院口腔颌面外科门诊新鲜拔除或自然脱落的乳磨牙32颗和恒牙(磨牙或前磨牙)36颗为研究对象,磨牙邻面显示有白垩色斑的非洞早期龋损,标准符合国际龋病检测和评估系统的第二类(ICDAS 2)[4]。去除牙根并清理软组织后,将牙齿置于0.1%的麝香草酚溶液中备用[5-6]。

1.3 试件的制备

垂直于龋损表面将牙齿一切为二后,置于20倍体视显微镜下进行观察,并进行病损的组织学分级[5],具体如下。C1:龋损位于釉质的外1/2;C2:龋损延伸至釉质的内1/2;C3:龋损延伸至牙本质的外1/2;C4:龋损延伸至牙本质的内1/2。排除标准:20倍体视显微镜下观察有龋洞或表面有损坏的样本、C4级样本。随后将乳、恒牙样本分别用渗透树脂进行如下处理[6]。1)将耐酸指甲油涂布于牙切面后,使用

15%的盐酸凝胶(Icon-Etch)酸蚀龋损表面2 min,用水枪彻底冲洗30 s,无油压缩空气吹干。2)将样本牙放入0.1%的罗丹明B乙醇溶液里染色12 h,让红色荧光染料充分标记龋损的微孔。3)用压缩空气干燥样本牙10 s,将渗透树脂(Icon-Infiltrant)涂抹于病损

面,静置5 min,用棉卷擦掉多余材料后光固化60 s。4)把样本牙放入30%的过氧化氢溶液中,静置于37 ℃恒温箱12 h,将未被渗透树脂封闭的罗丹明B染料漂白,随后用水枪冲洗样本60 s。5)去除吸附在样本切面上的指甲油,将样本牙用慢速砂片平行于牙切面切成厚约3 mm的试件,然后用不同表面粒度的砂纸由粗到细依次打磨、抛光,直至试件透光。6)为了标记未被渗透树脂渗入病损的微孔结构,将试件置于含有100 μmol·L-1荧光素钠的50%乙醇溶液中浸泡3 min,然后用去离子水冲洗10 s,随即在CLSM下进行观察。

1.4 罗丹明B和荧光素钠在CLSM下的观察

罗丹明B激发波长为568 nm,发射波长为590 nm;荧光素钠激发波长为488 nm,发射波长为525 nm。罗丹明B显示红色,荧光素钠显示绿色。被渗透树脂渗入的病损显示为红色,没有被渗透的病损微孔显示为绿色。在CLSM图像的6个指定点上测量病损深度(lesion depth,LD)和渗透深度(penetration depth,

PD)(用100 μm的格子标识)。PD和LD为从釉质表面分别到红色和绿色荧光最深点的距离,并计算渗透百分数(percentage penetration,PP),公式为:PP=PD/LD×100%。

1.5 统计学分析

采用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析。经正态性检验,数据呈非正态分布,故采用中位数(下

四分位数,上四分位数)表示。使用两独立样本秩和

检验(Wilcoxon rank test)比较乳、恒磨牙的PP。检验水准为双侧α=0.05。

2 结果

2.1 乳、恒磨牙病损的组织学分级

组织学病损分级为C1~C3的乳磨牙分别为11、14、7颗;组织学病损分级为C1~C3的恒磨牙分别为10、15、11。乳、恒磨牙的组织学病损分级差异无统计学意义(χ2=0.738,P=0.691)。

2.2 在双荧光染色下乳、恒牙CLSM图像的比较

渗透树脂治疗后乳、恒磨牙早期龋损的观察结果见图1。由图1可见,渗透树脂渗入的病损显示为红色,而病损剩余的微孔被荧光素钠染成绿色,黄色为红绿荧光叠加。没有微孔的健康釉质或表层呈黑色。

2.3 乳、恒磨牙PP的比较

乳、恒磨牙PP的计算结果见表1。由表1可见,在所有组织学病损分级中,乳、恒磨牙PP间的差异无统计学意义(P>0.05),但是在C1组织学病损分级中,乳牙的渗透能力优于恒牙(P<0.05),而在C2和C3组织学病损分级中,乳、恒牙PP间的差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

牙齿邻面由于位置隐蔽、不易清洁或清洁不彻底,易导致菌斑堆积,且牙齿邻面釉质表层存在较多微孔[7],使得牙齿邻面容易患龋。研究发现:乳磨

牙邻面患龋率最高,其次为面[8]。也有研究表明:即使在患龋率很低的人群,通过翼片检查发现也有相当比例的儿童乳磨牙邻面患龋[9]。而对于恒牙[10],

龋损的好发牙面也以咬合面、邻面居多。目前,对于邻面早期龋损的临床治疗主要采用微创疗法,常使用牙线控制菌斑和局部用氟[11],然而对于依从性

较差的人群,治疗效果不佳。至于创伤性治疗邻面龋,即使是微小的牙体预备,也会导致健康牙体硬组织不必要的损失,且充填体容易脱落。现今,龋损渗透技术[1-3,5-6]是运用低黏度光固化渗透树脂通过毛细作用渗入到病损微孔内,堵塞和充填微孔,替代因脱矿丢失的硬组织,并形成扩散屏障,无创、有效地终止病变进展。

实验室研究发现:渗透树脂能有效甚至完全地渗入到乳[12]、恒牙[3,5]邻面早期龋损中。临床研究表明:用渗透树脂能够有效地减少恒牙邻面早期龋的进展[13]。另有研究表明:应用渗透树脂治疗乳磨牙

邻面早期龋,随访1年,结果发现渗透树脂治疗的效果优于使用氟保护漆[14]。

本实验使用CLSM作为实验研究的检测仪器,通过龋损荧光分布情况观测龋损部位的深浅以及渗透树脂的PD,并计算PP。PP能够准确、客观地反映渗透能力,所以本研究旨在通过对渗透树脂在乳、恒磨牙邻面早期龋损中渗透能力的比较,了解其渗透能力的差异,进而为渗透树脂在乳、恒牙早期龋损中的临床应用提供理论依据。本实验发现:渗透树脂对乳、恒磨牙早期龋均有很好的渗透作用,这与国外的研究报道是一致的[2-3,5,12]。本实验还发现:在C1组织学病损分级中,乳牙的渗透能力优于恒牙。笔者认为这与乳、恒牙的釉质结构不同有关。与恒牙相比,乳牙釉质中有机质含量高,矿化程度低[15];易磨耗,硬度差;乳牙釉质的厚度薄,约为恒牙釉质厚度的1/2;乳牙的釉柱比恒牙弯曲少,排列整齐;扫描电子显微镜下观察发现,乳牙的平滑面常见小孔,而且越近牙颈部小孔的发生率越高,明显高于恒牙[16];并且乳牙邻面牙颈部集中存在微小龟裂,与其易患龋有关。

总之,对于乳、恒磨牙邻面早期非洞龋损,渗

透树脂能够渗入、甚至完全渗入到龋损内,无创、有效地终止病变的进展,尤其对乳牙较浅的早期龋,渗透树脂的治疗效果更佳。但是,在临床上要严格把握适应证,应用于光滑面和邻面的早期非洞龋损。注意使用橡皮障,防止盐酸凝胶损伤牙周组织,并定期随访,观察疗效。

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(本文编辑 杜冰)