广豆根的化学成分研究

施顺东　袁小红　李丽梅等

摘要：为研究广豆根（Sophora subprostrata Chunet T. Chen）中的化学成分，采用硅胶柱、Sephadex LH-20 柱色谱法等进行分离纯化，并根据其理化性质和波谱特征鉴定了其化学结构。结果表明，从广豆根中分离得到5个化合物，经过波谱解析确定化合物为：（+）-羽扇豆醇、β-谷甾醇、广豆根素、高丽槐素、山豆根色烯素。通过柱层析和结晶的方法首次从该植物中分离得到山豆根色烯素。

关键词：广豆根（Sophora subprostrata Chunet T. Chen）；化学成分；分离

中图分类号：R286.0；O657 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）07-1654-02

广豆根（Sophora subprostrata Chunet T. Chen）又称越南槐、山豆根，为豆科槐属蔓生性矮小灌木的干燥根及茎，是山西著名道地药材。广豆根味苦、性寒，具有清热解毒、消肿利咽的功效[1]，临床上用于治疗咽喉炎、湿热黄疸等病症[2]。药理研究表明广豆根的提取物有抗肿瘤、抗心律失常、保肝等作用[3]。广豆根主要化学成分为喹诺里西啶类生物碱、黄酮类、萜类成分[4]。其中生物碱为主要活性成分，具有抗乙肝病毒活性，对乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌及白血病等有一定疗效[5]。黄酮、萜类成分是否对总提物的药理作用有贡献尚是一个值得探讨的问题。为了综合开发利用广豆根资源，本研究对其成分进行了研究，分离得到5种成分，经鉴定确认分别是（+）-羽扇豆醇、β-谷甾醇、高丽槐素、广豆根素、山豆根色烯素。首次得到广豆根素的白色晶体，有别于其他文献分离得到的黄色油状物，并从该植物中分离得到山豆根色烯素。

1 材料与方法

1.1 材料、仪器和试剂

广豆根药材购自广西，经西南科技大学侯大斌教授鉴定为广豆根（Sophora subprostrata Chunet T. Chen）的干燥根。

Bruker Avance-600型核磁共振仪（德国布鲁克公司，TMS为内标）；Finnigan LCQDECA质谱仪（美国阿美特克有限公司）。

柱层析用硅胶（60-100目；200-300目，青岛海洋化工厂）；反相硅胶（0.040～0.075 mm，YMC公司）；Sephadex LH-20（Amersham Phar-macia Biotech AB公司）；试剂均为分析纯。

1.2 试验方法

称取10 kg广豆根粗粉，用10 L乙酸乙酯60 ℃加热回流提取3次，每次4 h，合并，蒸干，浸膏经硅胶柱层析，石油醚/氯仿（2∶1，V/V）洗脱至硅胶薄层分析无成分时换成石油醚/氯仿（1∶1，V/V），得到A1-A4。A1经硅胶柱层析，石油醚/丙酮（8∶1，V/V）洗脱至硅胶薄层分析无成分时换成石油醚/丙酮（3∶1，V/V），分段得到两部分A11、A12溶于丙酮分别结晶得到化合物1和化合物2。A2部分经硅胶柱层析，石油醚/丙酮（8∶1，V/V）洗脱至硅胶薄层分析无成分时换成石油醚/丙酮（3∶1，V/V），得到A21-A25，A25溶于丙酮中，加石油醚析出结晶，得到化合物3。A24经反相柱层析（50%～100%甲醇水溶液梯度洗脱，硅胶薄层分析无成分时将50%甲醇浓度提高至100%甲醇），再经LH-20柱层析（丙酮洗脱）后得到化合物4和化合物5。

2 结果与分析

5种化合物的分析结果如下：

化合物1白色针晶：核磁共振氢谱（三氯甲烷，400 MHz）化学位移：4.69（1H，brd，J=2.4 Hz，H-29），4.56（1H，dd，J =2.4，1.3 Hz，H-29），3.19（1H，dd，J=11.2，5.0 Hz，H-3α），2.39（1H，dt，J =11.1，5.8 Hz，H-19），1.68（3H，brs，Me-30），1.03，0.98，0.92，0.86， 0.79，0.76（3H，s，CH3-23，24，25，26，27，28）；核磁共振碳谱（三氯甲烷，300 MHz），化学位移：38.9（C-1）、27.99（C-2）、79.0（C-3）、38.7（C-4）、55.3（C-5）、18.3（C-6）、34.3（C-7）、40.8（C-8）、50.5（C-9）、37.2（C-10）、20.9（C-11）、25.2（C-12）、38.1（C-13）、42.8（C-14）、27.46（C-15）、35.6（C-16）、43.0（C-17）、48.0（C-18）、48.3（C-19）、151.0（C-20）、29.9（C-21）、40.0（C-22）、28.0（C-23）、15.4（C-24）、16.1（C-25）、16.0（C-26）、14.6（C-27）、18.0（C-28）、109.3（C-29）、19.3（C-30）。将其核磁数据与文献对照鉴定化合物为（+）-羽扇豆醇[6]。

化合物2白色针晶：其核磁共振氢谱与文献报道β-谷甾醇数据吻合，且其Rf值与标准品一致，所以化合物2鉴定为β-谷甾醇[7]。

化合物3白色方晶：质谱（m/z）：284[M]+。核磁共振氢谱（丙酮，300 MHz）化学位移：7.14（1H，d，J=4.2 Hz，H-5），6.56（1H，s，H-2），6.40（1H，d，J=4.2 Hz，H-6），6.26（1H，m，H-5），6.21（1H，s，H-8），5.72（2H，m，-O-CH2-O-），5.29（1H，d，J=3.5 Hz，H-4a），4.03（1H，dd，J=2.5，5.5 Hz，H-5），3.45（1H，t，J=5.5 Hz，H-2b），3.31（1H，m，H-2a）；核磁共振碳谱（丙酮，300 MHz）化学位移：71.5（C-2）、45.3（C-3）、83.8（C-4）、123.3（C-5）、110.0（C-6）、163.5（C-7）、108.6（C-8）、161.7（C-9）、115.1（C-10）、116.8（C-1）、109.9（C-2）、137.0（C-3）、146.8（C-4）、98.7（C-5）、159.4（C-6）、106.4（-O-CH2-O-）。以上波谱数据与高丽槐素一致，故确定其为高丽槐素[8]。

化合物4白色针晶。核磁共振氢谱（氯仿，400 MHz）化学位移：5.29（1H，m，H-2），6.56（1H，d，J=8.8 Hz），7.14（2H，s），3.32（2H，brs），3.43（2H，br s）； 核磁共振碳谱（氯仿，300 MHz）化学位移：82.3（C-2）、45.3（C-3）、212.2（C-4）、123.3（C-5）、 110.0（C-6）、163.5（C-7）、115.1（C-8）、161.7（C-9）、115.1（C-10）、137.0（C-1）、123.3（C-2）、137.0（C-3）、153.1（C-4）、137.0（C-5）、123.3（C-6）、34.7（C-1”）、71.4 （C-2”）、 146.7 （C-3”）、109.9（C-4”）、123.3（C-7”）、137.0（C-8”）、123.3（C-12”）、137.0（C-13”）。化合物4鉴定为广豆根素[9]。

化合物5白色针晶：质谱（m/z）：284[M]+。核磁共振氢谱（氯仿，300 MHz）化学位移：7.71（1H，d，J=4.3 Hz，H-5），7.01（1H，s，H-6），6.89（1H，s，H-2），6.49（1H，d，J=4.3 Hz，H-6），6.28（1H，d，J=4.9 Hz，H-4），5.60（1H，d，J=4.9 Hz，H-5），5.29（1H，dd，H-2），5.23，5.22（1H，-CH=），3.38，3.25（2H，d，J=3.6 Hz，CH2），2.96（1H，dd，H-3eq），2.76（1H，dd，H-3ax），1.71，1.70（6H，s，2×CH3），1.53， 1.40（3H，s，CH3）。以上波谱数据与山豆根色烯素一致，故确定其为山豆根色烯素[10]。

3 小结与讨论

本研究从广豆根中分离得到5种化合物，分别是（+）-羽扇豆醇、β-谷甾醇、广豆根素、高丽槐素、山豆根色烯素。研究表明发现柱层析和结晶的方法能够较快地将广豆根素分离得到，并首次得到其白色晶体；化合物山豆根色烯素首次从该植物中分离得到。广豆根中的化学成分的分析为广豆根的药理活性研究提供了基础，也为广豆根进一步的开发利用提供了依据。

参考文献：

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[3] 何晓艳，周应军，田 洪.山豆根化学成分及药理作用研究进展[J].中南药学，2011，9（11）：525-528.

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[5] 王君明，崔 瑛.山豆根化学成分、药理作用及毒性研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2011，17（4）：17.

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[10] MATSUURA N， IINUMA M， TANAKA T， et al. Chemotaxonomic approach to the genus Euchresta based on prenylflavonoids and prenylflavanones in roots of Euchresta formosana[J]. Biochemical Systematics and Ecology，1995，23（5）：539-545.