楚雄州中医院2011年细菌耐药性监测结果分析

杨自副，朱晓燕

（楚雄州中医院，云南楚雄675000）

楚雄州中医院2011年细菌耐药性监测结果分析

杨自副，朱晓燕

（楚雄州中医院，云南楚雄675000）

目的：了解2011年临床分离菌株对常用抗生素的耐药性。方法：采用API鉴定和ATB药敏板条及纸片扩散法对2011年临床分离1 127株细菌进行药敏试验。结果：1 127株细菌中革兰阴性菌占76.8%，革兰阳性菌占23.2%。革兰阴性菌中前3位为大肠埃希菌45.7%（395/865）、肺炎克雷伯菌10.6%（92/865）和铜绿假单胞菌9.0%（78/865）；革兰阳性菌中前3位为屎肠球菌27.1%（71/ 262）、金黄色葡萄球菌24.8%（65/262）和表皮葡萄球菌16.0%（42/262）。药敏试验结果显示泛耐药铜绿假单胞菌和不动杆菌检出率分别为19.2%（15/78）和32.8%（23/70）；MRSA和MRCNS分别占金黄色葡萄球菌和CNS的32.3%（21/65）和83.3%（40/48）。结论：定期进行耐药性监测有助于了解细菌耐药性的变迁，为临床用药提供依据。

细菌耐药性监测；抗生素；药敏试验；耐药率

细菌对抗生素耐药已成为临床治疗细菌感染的难点。及时、准确地掌握本地区细菌耐药性动态，了解细菌耐药性的变迁，对于指导临床合理用药，并为新抗生素的研制提供实验室依据，具有非常重要的意义。为此，从2008年始我们逐年监测临床分离菌株耐药性，了解临床常见分离菌株对常用抗生素的耐药性变迁，为临床经验用药和感染流行提供参考资料。现将对楚雄州中医院2011年临床送检标本分离菌的耐药监测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源2011年1月1日—2011年12月31日我院临床送检血液、痰液、尿液、分泌物等标本分离的菌株。剔除同一患者相同部位的重复菌株，按统一的方案进行抗生素敏感试验。

1.1.2 培养基及抗生素纸片ATB药敏板条、MH琼脂及亚胺培南/亚胺培南EDTA Etest试条和头孢硝噻吩纸片均为法国生物梅里埃公司产品；氨曲南、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦、头孢替坦、头孢唑肟、亚胺培南、美罗培南、厄他培南、利奈唑胺、多黏菌素B、米诺环素、红霉素、克林霉素、呋喃妥因等抗生素纸片为英国OXOID公司产品；培养基制作按全国临床检验操作规程第三版〔1〕规定和MH琼脂说明配制。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定及药敏试验细菌鉴定采用法国生物梅里埃API鉴定板条及ATB NEW鉴定软件鉴定至种。药敏试验以ATB药敏板条为主，根据需要纸片扩散法补充氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢替坦、头孢唑肟、利奈唑胺、多黏菌素B、米诺环素、红霉素、克林霉素、呋喃妥因等。另外，因肠杆菌科ATB板条药敏折点与抗菌药物敏感性试验执行标准等21版（CLSI M100-S21）不相符〔2〕，故采用纸片扩散法补充头孢他啶、头孢噻肟、亚胺培南、美罗培南药敏。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923和ATCC 29213；大肠埃希菌ATCC 25922和ATCC 35218；铜绿假单胞菌ATCC 27853；粪肠球菌ATCC 29212；肺炎链球菌ATCC 49619，流感嗜血杆菌ATCC 49247。

1.2.2 β-内酰胺酶检测用头孢硝噻吩纸片检测葡萄球菌、流感嗜血杆菌等细菌的β-内酰胺酶；按CLSI M100-S21规定未常规对肠杆菌科细菌进行ESBLs检测。

1.2.3 结果的判断和数据分析按CISI M100-S21折点标准断判药敏试验结果，采用Whonet5.6软件统计分析数据。

2 结果

2.1 临床分离细菌菌种及分布1 127株菌中，革兰阴性菌865株（76.8%），其中，前5位分别是大肠埃希菌45.7%（395/865）、肺炎克雷伯菌10.6%（92/ 865）、铜绿假单胞菌9.0%（78/865）、阴沟肠杆菌6.2%（54/865）和鲍曼不动杆菌6.2%（54/865），其它尚有流感嗜血杆菌3.0%（26/865）、淋病奈瑟菌0.6（5/865）等；革兰阳性菌262株（23.2%），其中，前5位分别是屎肠球菌27.1%（71/262）、金黄色葡萄球菌24.8%（65/262）、表皮葡萄球菌16.0%（42/262）、粪肠球菌12.6%（33/262）、肺炎链球菌6.1%（16/262）。

上述菌株在门诊患者和住院患者中分别占5.6%和94.4%。标本分布为尿液标本分离菌占34.3%、呼吸道标本占28.9%，伤口分泌物占17.5%，血液等无菌体液占14.8%。尿液标本分离菌中大肠埃希菌、屎肠球菌和粪肠球菌分别占47.2%、11.9%和6.0%；呼吸道标本分离菌中克雷伯菌、不动杆菌和铜绿假单胞菌分别占17.5%、11.7%和9.8%；伤口分泌物分离菌中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和克雷伯菌分别占33.5%、15.2%和5.6%；血液等无菌体液分离菌中大肠埃希菌、屎肠球菌和克雷伯菌分别占41.9%、6.0%和4.8%。

2.2 药敏试验结果

2.2.1 苛养菌16株肺炎链球菌（均为非脑脊液分离菌株）中，经最低抑菌浓度（MIC）检测，5株为青霉素耐药肺炎链球菌PRSP（31.2%），4株为青霉中介肺炎链球菌PISP（25.0%），16株肺炎链球菌对红霉素和克林霉素全耐药，对四环素耐药率达93.8%，未检出复方新诺明敏感菌株；6株β溶血性链球菌对青霉素均敏感，4株克林霉素和四环素耐药，5株对红霉素耐药；26株流感嗜血杆菌中β-内酰胺酶阳性率为66.7%，对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、氧氟沙星均敏感，对复方新诺明耐药率达66.7%。另外，5株淋病奈瑟菌均为β-内酰胺酶阳性株且四环素全部耐药，4株均对环丙沙星耐药。见表1。

2.2.2 葡萄球菌属62株金黄色葡萄球菌中MRSA检出率为32.3%，48株凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS检出率为83.9%。苯唑西林耐药葡萄球菌对常用抗生素的耐药率明显高于苯唑西林敏感的葡萄球菌。MSSA产β-内酰胺酶阳性率为95.5%，未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药葡萄球菌。见表2。

2.2.3 肠球菌属屎肠球菌对大部分抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌，如粪肠球菌对青霉素和氨苄西林耐药率分别为11.4%和8.6%，而屎肠球菌则高达85.9%和84.5%，对呋喃妥因耐药率分别为2.9%，和42.3%；两种肠球菌对红霉素和利福平耐率均在85%以上。未检出万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药肠球菌。见表3。

2.2.4 肠杆菌科大肠埃希菌、克雷菌属、肠杆菌属和其它肠杆菌对常用抗生素的耐药性率见表4，共检

出对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌4株，阴沟肠杆菌2株，根据CLSIM100-S21规定，用厄他培南和美罗培南抗生素纸片进行霍奇试验（Hodge）试验检测均为阴性，用亚胺培南/亚胺培南EDTA Etest试条进行金属酶表型确认试验阴性。另外，检出沙门氏菌1株，对阿莫西林耐药，环丙沙星和复方新诺明均敏感。

表1 肺炎链球菌、β溶血性链球菌和流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感率和耐药率（n）

表2 葡萄球菌属细菌对常用抗生素的敏感率和耐药率/%

表3 肠球菌属细菌对常用抗生素的敏感率和耐药率/%

表4 肠杆菌科细菌对常用抗生素的敏感率和耐药率/%

2.2.5 非发酵菌铜绿假单胞菌、不动杆菌属和嗜麦芽窄单胞菌对常用抗生素的耐药率见表5，泛耐药铜绿假单胞菌和不动杆菌检出率分别为19.2%（15/ 78）和32.8%（23/70）。

表5 非发酵菌对常用抗生素的敏感率和耐药率/%

3 讨论

2011 年我院临床标本共分离病原菌1 127株，与我院2009年及2010年分离的病原菌数相比分别增加24.4%和19.1%〔3-4〕，其中，革兰阴性菌占76.8%，革兰阳性菌占23.2%，阴性菌所占比率较2010年的增加8.3%〔4〕。

苛养菌方面，与我院2010年监测结果相比，检出率明显上升，特别是流感嗜血杆菌分离率，这可能与临床重视及标本采样送检及时有关。在肺炎链球菌中，PRSP也有检出，且对红霉素、克林霉素全部耐药，未检出复方新诺明敏感株；β溶血性链球菌对青霉素全部敏感，这与其它报道相当〔3-12〕；流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阳性率达66.7%，对复方新诺明耐药率达66.7%，也较其它报道高〔5-12〕；5株淋病奈瑟菌均为β-内酰胺酶阳性株，且四环素全部耐药，4株对环丙沙星耐药；虽然这些菌株检出率较低，但耐药性却很严重，应引起临床高度重视。

葡萄球菌中金黄色葡萄球菌分离率较低，MRSA检出率为32.3%，是我院2010年的1倍〔4〕，但仍明显低于其它报道〔5-12〕，MRSA对所有的β内酰胺类抗生素耐药，并可同时对氨基糖苷类、大环内脂类、四环素类和克林霉素抗生素交叉耐药，其耐药率明显高于MSSA。MRSA对复方新诺明的耐药率为23.8%，较我院2009、2010年明显降低〔3-4〕，和国内其它学者报道相当〔5-12〕；MRCNS检出率为83.3%，明显高出国内其他学者报道〔5-12〕，与我院2009年～2010年相当〔3-4〕。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药葡萄球菌。

肠球菌中屎肠球菌检出率明显高于粪肠球菌，且对于大部分抗生素的耐药率也明显高于粪肠球菌，和其它学者报道的相当〔5-7〕，对青霉素和氨苄西林耐药率较我院2010年有所上升〔4〕，粪肠球菌和屎肠球菌对高单位庆大霉素耐药率分别为14.3%和56.3%，对高单位链霉素耐药率分别为22.9%和21.1%，与其他学者报道有较大差异〔5-7〕。屎肠球菌对呋喃妥因耐药率已高达42.3%，也较我院2010年明显上升〔4〕，已和2011年CHINET报道相当〔5〕。值得注意的是两种肠球菌对红霉素和利福平的耐药率都已达到或超过85%，与我院2010年相当〔4〕，但明显高于2011年CHINET报道〔5〕。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药肠球菌。

肠杆菌科中，根据CLSI M100-S21规定未常规对肠杆菌科细菌进检ESBLs检测，与我院2009年～2010年监测结果相比，克雷伯菌属检出率有所上升，沙雷菌属检出率明显下降〔3-4〕。2010年新增的头孢唑肟和头孢替坦，与同类的头孢噻肟和头孢西丁相比，耐药率依然较低，临床可考虑推广这类药物的应用以缓解其它头孢类抗生素的压力。在对肠杆菌科的监测中，共检出对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌4株，阴沟肠杆菌2株，KPC酶和金属酶检测均为阴性，推测其耐药机制可能为产生ESBLs和/或AmpC及同时合并外膜孔蛋白丢失有关。

非发酵糖菌中铜绿假单胞菌对临床常用抗生素的耐药率明显低于其它地区的报道〔5-12〕，不动杆菌属中以鲍曼不动杆菌为主，其耐药率也明显低于其它地区的报道〔5-12〕，但泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼属不动杆菌检出率较我院2010年明显上升。因使用高效广谱抗生素后而出现的嗜麦芽窄食单胞菌也有检出，且检出2株复方新诺明耐药株。与我院2010年监测结果相比，非发酵糖菌的检出率明显上升〔4〕，应引起临床医生重视。

细菌对抗生素的耐药程度存在较大的地域差异〔3-10〕。全国大范围或地区性的耐药监测固然重要，城市和医院的小范围细菌耐药性也各有其特点。因此，加强本地及本院细菌耐药性监测，及时发现本地区细菌耐药性特征及发展趋势，可为临床经验用药提供更好的参考依据。

〔1〕叶应妩，王毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程〔M〕. 3版.南京：东南大学出版社，1996：890-920.

〔2〕Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing；Twenty-First Informational Supplement〔S〕.2011.

〔3〕杨自副，杨艳兰，蒋洁晗，等.云南省楚雄州中医院2009年细菌耐药性监测结果〔J〕.中国感染与化疗杂志，2011，11（1）：49-53.

〔4〕杨自副，陆琼慧，朱晓燕，等.云南省楚雄州中医院2010年细菌耐药性监测结果〔J〕.检验医学与临床杂志，2012，9（22）：2824-2829.

比利时核能研究中心(SCK-CEN)正在开发DosDiMEco方法(文献中当时的说法)。该方法包括一个软件包(用MathCad 2001i professional编写)，其中包含3个子程序。第一个子程序用于计算参考有机体由于γ射线产生的能量吸收。另外两个子程序与此类似，分别计算α和β污染物。该模型从文献中获取适当的质量衰变数据。

〔5〕胡付品，朱德妹，汪复，等.2011年中国CHINET细菌耐药性监测〔J〕.中国感染与化疗杂志，2012，12（5）：321-329.

〔6〕朱德妹，张婴元，汪复，等.2010年上海地区细菌耐药性监测〔J〕.中国感染与化疗杂志，2011，11（6）：436-445.

〔7〕艾效曼，陶凤蓉，陈东科，等.2009年北京医院细菌耐药监测结果〔J〕.中国感染与化疗杂志，2011，11（2）：141-146.

〔8〕汪复，朱德妹，胡付品，等.2008年中国CHINET细菌耐药性监测〔J〕.中国感染与化疗杂志，2009，9（5）：321-329.

〔9〕朱德妹，张婴元，汪复.2008年上海地区细菌耐药监测〔J〕.中国感染与化疗杂志，2009，9（6）：401-411.

〔10〕时东彦，赵建宏.2008年河北医科大学第二医院临床分离菌分布及耐药谱型监测〔J〕.中国感染与化疗杂志，2011，11（1）：57-60.

〔11〕李多，李光荣，向成玉.2008年临床分离病原菌分布及耐药性分析〔J〕.中华医院感染学杂志，2010，20（8）：1155-1158.

〔12〕饶绍琴，周忠华，喻华.Mohnarin2006-2007年度报告：西南地区细菌耐药监测〔J〕.中国抗生素杂志，2008，33（10）：622-628.

（责任编辑 董杰）

Surveillance of Bacterial Resistance in the Chinese Medicine Hospital of Chuxiong Prefecture in 2011

YANG Zifu,ZHU Xiaoyan
（Chinese Medicine Hospital of Chuxiong Prefecture,Chuxiong,Yunnan 675000,China)

Objective:To investigate the resistance of clinical isolates in the Chinese Medicine Hospital of Chuxiong Prefecture in 2011.Methods:Antimicrobial susceptibility testing of 946 clinical isolates were carried out by Kirby-Bauer（K-B）method and microdilution method.Results:Among the 1 127 clinical isolates,gram-negative bacteria and gram-positive bacteria accounted for 76.8%and 23.2%,respectively.In 865 gram negative bacillis,E.coli,Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa. accounted for 45.7%（395/865）,10.6%（92/865）and 9.0%（78/865）,respectively.In 262 gram positive cocci,E.faecium,S.aureus and Staphylococcus epidermidis.accounted for 27.1%（71/262）,24.8%（65/262）and 16.0%（42/262）.Susceptibility test results showed that Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter spp.were detected in 19.2%（15/78）and 32.8%（23/70）pan-resistant strains.The prevalence of emethicillin-resistant Staphylococcus was 83.3%（40/48）in S.aureus and 32.3%（21/65）incoagulasenegative Staphylococcus.Conclusion:Surveillance of bacterial resistance is most important and valuable for guidance of rational selection of antimicrobial agents.

bacterial resistance surveillance;antimicrobial agents;susceptibility testing;resistance rate

R378

B

1672-2345（2013）06-0054-06

10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.016

2012-10-22

2013-03-07

杨自副，副主任检验技师，主要从事临床检验及病原微生物检验研究.