HBV-DNA阳性孕妇产后脐带血及乳汁中HBV-DNA载量的检测分析

赵登贤，杨文东

(1、茌平县人民医院检验科,山东聊城252100；2、利津县第二人民医院，山东东营257447)

HBV-DNA阳性孕妇产后脐带血及乳汁中HBV-DNA载量的检测分析

赵登贤1，杨文东2

(1、茌平县人民医院检验科,山东聊城252100；2、利津县第二人民医院，山东东营257447)

目的通过荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测血清HBV-DNA阳性产妇产后脐带血及乳汁HBV-DNA载量，探讨胎儿宫内感染HBV及乳汁携带HBV与产妇HBV-DNA载量的相关性。方法2010年1月至2012年11月，选取在产科住院分娩的HBV-DNA阳性产妇149例，采用FQ-PCR方法检测产妇产前血清、产后脐带血和乳汁HBV-DNA载量。结果①选择有HBV感染史产妇304例中149例HBV-DNA阳性，阳性率为49.01%(149/304)；②149例HBV-DNA阳性产妇胎儿宫内感染为42.95%；HBV-DNA阳性孕妇乳汁中HBV-DNA阳性率(71.14%)显著高于脐血(42.95%)(P＜0.01)；HBV-DNA≥1×105组脐带血、初乳及满月乳中HBV-DNA阳性率(61.29%、82.80%、100.00%)显著高于1×103≤HBV-DNA＜1×105组(12.50%、51.79%、75.00%)(P＜0.01)；满月乳中HBV-DNA阳性率(90.60%)显著高于初乳(71.14%)(P＜0.01)。结论HBV-DNA阳性孕妇胎儿HBV的宫内感染率及乳汁中携带HBV的阳性率高，与孕妇血清HBV-DNA载量正相关，阻断HBV的宫内感染及减少乳汁携带HBV者，必须有效的降低孕妇血中的HBV-DNA载量水平。

产妇；乙型肝炎病毒；HBV-DNA载量；宫内感染；乳汁

我国是乙型肝炎的高流行区，人群乙型肝炎病毒(HBV)携带率高达10%～20%，超过1.2亿，其中40%～50%通过母婴传播[1-2],围产期传播是重要的传播途径，宫内感染是母婴传播的主要途径，围产期母婴垂直传播者HBV感染发展结局80%～90%为无症状携带者,但是其确切的传播规律和机制至今仍未完全阐明。宫内感染也是导致婴儿出生后乙肝疫苗接种失败的主要原因。母乳含有丰富的营养成分和免疫物质，是婴儿成长最理想的营养品。若母乳HBV-DNA阳性，采取退乳及人工喂养已成为共识[3]。荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测HBV-DNA载量为HBV存在和复制的直接证

据。为了探讨胎儿宫内感染HBV及乳汁携带HBV与产妇HBV-DNA载量的相关性，我们采用FQPCR方法检测了HBV-DNA阳性产妇产后脐带血及乳汁HBV-DNA载量，现分析报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象选取2010年1月至2012年12月，选择在本院住院分娩的有HBV感染史产妇304例，产前采用FQ-PCR方法检测血液HBVDNA载量，据血液HBV-DNA载量检测结果进行分组。所有产妇均无肝炎症状及体征，ALT正常，全部病例符合2000年全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准，并排除其他病毒(如丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等)感染。

1.2 检测项目与方法产妇产前血液(肘静脉)、产后脐带血及乳汁中HBV-DNA载量。采集产妇产前血液及产后脐带血2～3ml，分离血清检测HBVDNA载量水平。采集初乳(产后24h内)及满月乳(产后30d)(注意采前先用温水清洗乳头，轻轻挤出乳汁)各2～3ml，置于无菌干燥管内，于4℃冰箱保存检测HBV-DNA载量水平。以上标本均于12h内进行检测。采用FQ-PCR方法检测，HBV-DNA试剂盒为广州中山医科大学达安基因诊断中心提供，PCR仪为美国生产的ABI 7000荧光定量基因扩增分析仪，Backman仪器有限公司生产的Backman高速冷冻离心机。HBV-DNA载量≥1×103copies/ml判为阳性。脐带血HBV-DNA载量≥1× 103copies/ml，即判为宫内感染。

1.3 统计学处理采用SPSS15.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 有HBV感染史产妇产前血液HBV-DNA载量检测结果及分组选择有HBV感染史产妇304例，产前采用FQ-PCR方法检测血液HBV-DNA载量，149例检测阳性，即HBV-DNA载量≥1× 103copies/ml，阳性率为49.01%(149/304)。据血液HBV-DNA载量检测结果，把149例检测阳性产妇分为1×103≤HBV-DNA＜1×105组(56例)和HBVDNA≥1×105组(93例)。

2.2 HBV-DNA阳性孕妇的脐带血与乳汁中HBV-DNA载量检测阳性结果比较见表1。

表1 HBV-DNA阳性孕妇脐带血与乳汁中HBV-DNA(copy/ml)载量检测阳性结果n(%)

表1显示:149例HBV-DNA阳性产妇产后脐带血中HBV-DNA阳性64例，发生率为42.95%；HBV-DNA阳性孕妇乳汁中HBV-DNA阳性率显著高于脐血(P＜0.01)；HBV-DNA≥1×105组脐带血、初乳及满月乳中HBV-DNA阳性率显著高于1×103≤HBV-DNA＜1×105组(P＜0.01)；满月乳中HBV-DNA阳性率显著高于初乳(P＜0.01)。

3 讨论

母婴传播是HBV感染的最主要的传播途径，HBV母婴传播的方式有三种：产前宫内感染、分娩时传播(产道感染)及产后水平传播(产后感染)，其中宫内感染是最主要的母婴传播方式[4]。因此，研究胎儿宫内感染的机制，制定切实可行的阻断HBV母婴传播的方案，对控制HBV传播具有重要意义。文献报道[5]：胎儿宫内感染HBV的感染率随母血乙型肝炎表面抗原(HBsAg)滴度的升高而增加。HBV-DNA是衡量HBV复制和传染性的最可靠的指标[6]。HBV经胎盘侵入胎儿的主要途径是经血和/或细胞传递的方式而通过胎盘实现的，但新生儿脐血检测较胎盘更能客观反映是否存在宫内感染[7]，新生儿脐血检测也是反映胎盘屏障功能的客观指标[8]。本文，149例HBV-DNA阳性产妇产后脐带血中HBV-DNA阳性64例，发生率为42.95%，也就是胎儿宫内感染率为42.95%，略高于文献报道的0.9%～40.1%[9]。HBV-DNA≥1×105组脐带血中HBV-DNA阳性率显著高于1×103≤HBV-DNA＜1×105组。结果表明胎儿宫内感染率与孕妇血中HBV-DNA载量有关，载量越高其发生率越高[10]，孕妇血中HBV-DNA载量水平高低是决定宫内感染的重要因素，婴儿HBV-DNA载量水平随母亲血液HBV-DNA载量水平升高而升高，存在呈正相关[9]。因此，阻断胎儿HBV的宫内感染，必须有效的降低孕妇血中的HBV-DNA载量水平。

血液中的HBV来源于肝脏，乳汁中的HBV来源于血液。婴儿吸吮母乳也可吸入含有HBV的血液，HBV虽不通过消化道传染，但当新生儿或婴儿的口腔、咽喉、食道、胃肠黏膜等处有破损、溃疡，母乳中HBV就可能通过毛细血管进入血液循环而引起新生儿或婴儿感染。婴儿通过乳汁感染HBV与母乳HBV-DNA载量及母亲有无及时采取一定的预防措施有关[11，12]。采用FQ-PCR方法检测乳汁HBV-DNA载量结果来判断是否母乳喂养是可行的方法[3]。本文，149例HBV-DNA阳性产妇的初乳及满月乳HBV-DNA检测阳性135例，阳性率达90.60%，母乳喂养能增加婴儿感染HBV的危险，为了避免母乳喂养传染婴儿，149例产妇均接受医生建议，采取了退乳及人工喂养。满月乳中HBV-DNA阳性率显著高于初乳，原因可能是，HBV从血液循环向乳汁播散的程度及时间有所不同，随着时间的推移及乳汁需求量的增加，从血液渗透到乳汁中的HBV量也在增加，导致HBVDNA阳性率的显著增高。初乳中HBV-DNA阳性率显著高于脐带血，可能是胎盘屏障所致。

综上所述，HBV-DNA阳性孕妇胎儿HBV的宫内感染率及乳汁中携带HBV的阳性率高，随着孕妇血清HBV-DNA载量的升高宫内感染率及乳汁携带HBV者也增高，阻断HBV的宫内感染及减少乳汁携带HBV者，必须有效地降低孕妇血中的HBV-DNA载量水平。有HBV感染史的孕妇应重视产前FQ-PCR方法检测HBV-DNA载量，早发现、早治疗，对降低HBV母婴传播有重要意义。

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R512.62；R446.61

A

1674-1129(2013)01-0064-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.023