59例小儿特发性血小板减少性紫癜检验结果分析

蔡旭清，黄道连

(1、中山市火炬开发区医院检验科,广东中山528437；2、南方医科大学附属博爱医院检验科,广东中山528400)

59例小儿特发性血小板减少性紫癜检验结果分析

蔡旭清1，黄道连2

(1、中山市火炬开发区医院检验科,广东中山528437；2、南方医科大学附属博爱医院检验科,广东中山528400)

目的分析特发性血小板减少性紫癜(ITP)小儿患者骨髓巨核细胞及血小板形态学改变和过敏指标的结果变化。方法对59例ITP小儿患者进行骨髓巨核细胞形态、血小板形态观察及嗜酸性粒细胞计数和过敏原三项检测，并对21例骨髓形态学检验大致正常的对照组，进行同样实验。结果91.5%ITP患儿骨髓巨核细胞浆上可见空泡、50.8%可见幼稚巨核细胞产板现象、88.1%出现血小板形态异常、83.1%骨髓嗜酸性粒细胞增多、72.9%血清lgE升高，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论巨核细胞形态学改变对确诊ITP有重要意义,骨髓嗜酸性粒细胞增多及血清IgE水平增高，有助于ITP鉴别诊断和治疗。

特发性血小板减少性紫癜；巨核细胞；嗜酸性粒细胞；形态学过敏原IgE。

特发性血小板减少性紫癜(ITP)又称免疫性血小板减少症[1]，一般认为ITP发生是自身抗体致敏的血小板被单核-巨噬细胞系统过度破坏所致[2]。近年来,对ITP发病机制的研究取得了一系列重要进展，特别在体液免疫机制方面,对自身抗体产生的研究有了明显进展,并提出了由自身抗体介导引起的巨核细胞数量和质量异常.我们观察了59例ITP患儿的骨髓巨核细胞形态结构变化，并作了嗜酸性粒细胞计数及过敏原三项(血清总IgE、吸入性过敏原、食物过敏原)检测，现将检测结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象来自2010年2月至2012年9月在中山市火炬开发区医院和中山市博爱医院住院治疗的患儿，59例确诊为ITP，符合《血液病诊断及疗效标准》[3]，年龄5d～10岁，中位年龄3岁，其中男32例，女27例。患儿有不同程度的出血症状，主要以下肢皮肤出现淤点和淤斑为主。PLT为(10～70)×109/L，其中(10～20)×109/L者40例，(20～60)× 109/L者15例，PLT在(60～70)×109/L者4例。另外，选取骨髓形态学检查符合大致正常骨髓象的21例小儿作为对照组，年龄3月～7岁，中位年龄4岁,血小板计数(135～320)×109/L。

1.2 仪器Olympus-CX21显微镜，过敏原检测仪-Unicap 100。

1.2 方法

1.2.1 常规采集ITP患儿和对照组小儿的骨髓(胸骨或胫骨或髂骨)，进行涂片、瑞-姬氏染色后，油镜下分类计数200个骨髓有核细胞及观察巨核细胞形态和血小板形态[4]。

1.2.2 采集ITP患儿静脉血，分离血清在过敏原检测仪-Unicap 100机上检测总IgE、吸入性过敏原和食物过敏原。使用原装配套试剂和质控品，严格按仪器操作规程和试剂说明书操作。

1.2.3 在油镜下常规有核细胞分类及观察巨核细胞形态结构及产板情况。

1.3 统计学方法采用SPSS 13.0软件对检测数据进行配对资料的卡方检验，P＜0.01为有统计学意义。

2 结果

2.1 91.5%ITP患儿骨髓中可见到胞浆上有空泡的巨核细胞，该类巨核细胞边缘包裹了一层浅蓝色的物质，形成内浆有浅红色颗粒，外浆无颗粒呈现“向日葵花样”形态(图1)。50.8%(30/59)患儿骨髓中可见到幼稚巨核细胞产小血小板现象(图2)，88.1% (52/59)患儿骨髓或外周涂片中可见形态异常的血小板(体积巨大、条带状、毛毛虫状，葫芦状等形态)，见表1。

2.2 83.1%ITP患儿骨髓嗜酸性粒细胞比例增高(≥2.5%)，外周血嗜酸性粒细胞基本正常，见表2。

2.3 72.9%ITP患儿过敏原检测中血清IgE增高，吸入性过敏原和食物性过敏原基本正常见表3。

表1 ITP患者与对照组骨髓巨核细胞系形态比较

表3 ITP患儿与对照组血清过敏原三项检测结果比较

图1 "葵花样"巨核细胞

图2 幼稚巨核细胞产板现象

3 讨论

目前公认ITP是一种获得性器官特异性自身免疫性疾病,是由于人体内产生抗血小板自身抗体导致单核-巨噬细胞系统破坏血小板过多而造成的血小板减少,人体外来抗原与宿主细胞或细胞外成份有相似的抗原表位,那么两者即呈分子拟态。人体针对外来抗原产生的抗体既可作用于外来抗原,也可作用于与外来抗原表位分子结构相似的自身抗原,即交叉反应。人体感染的某些病毒抗原可能与血小板成份有相似的抗原表位,则人体针对该病毒产生的抗体,既可作用于该病毒,也可作用于与该病毒抗原表位分子结构相似的血小板抗原,从而破坏血小板,导致血小板减少。

本研究59例患者除了进行血小板计数、血小板功能试验、凝血功能检查、嗜酸性粒细胞计数和过敏原检测等相关检查外，均行骨髓细胞形态学检查，并排除了某些以血小板减少为首发表现的血液系统疾病，并发现绝大多数患者巨核细胞数正常或增多并伴成熟障碍以及产板不良，血小板形态异常,可见巨大血小板，ITP组的成熟产板型巨核细胞数明显低于对照组，与国外报道相近[5]。

本研究结果显示有83.1%(49/59)ITP患者骨髓中嗜酸性粒细胞数明显增高，相关机制尚不明确，也未见有关报道，可能某些病毒感染剌激机体产生相关抗体或患者体内某些过敏原升高，剌激机体加速产生嗜酸性粒细胞，产生速发型变态反应，从而使血小板急剧下降，我们认为骨髓嗜酸性粒细胞增高可作为ITP的诊断指标之一。

我们资料显示72.9%(43/59)ITP患儿血清IgE增高，与黄凯等调查的南昌地区儿童变态反应性疾病患儿75.8%IgE水平增高的结果相似[6]，说明ITP发病与过敏反应有关，但过敏原分布情况及特点不同，ITP患儿的吸入性过敏原和食物过敏原阳性率与正常对照差异无统计学意义(P＞0.05)，说明ITP发生与吸入性过敏原和食物过敏原无关，ITP发病的过敏反应机制仍需进一步研究，而黄凯等报道的南昌地区儿童过敏性紫癜、哮喘、过敏性鼻

炎和鼻窦炎等四种过敏性疾病与食物过敏原和吸入过敏原有关。可能与本区环境因素有关(化工厂，建筑工地，粉尘，花粉)个人卫生和个体差异等有关。吸入性变态反应原引起的过敏反应又以屋尘螨，粉尘螨，屋尘为主，且好发于0~18岁[7]。

根据《诊断学》标准：巨核细胞数正常值为每4.5cm27~35个，以此判断巨核细胞数正常、增加或减少。ITP患者典型骨髓象示：骨髓有核细胞增生活跃，巨核细胞增多伴成熟障碍。鉴于国内的骨髓增生异常综合征、白血病等疾病发病年龄较年轻，约为40岁[8],该类疾病可以与ITP有相似的临床表现且外周血涂片不易确诊，故2009年威海会议专家们提出新的ITP诊断建议：(1)多次化验血小板计数减少，血细胞形态无异常；(2)脾脏不增大；(3)骨髓检查：巨核细胞数增多或正常、有成熟障碍；(4)须排除先天性血小板减少、假性血小板减少和其他继发性血小板减少症。

本研究发现91.5%(54/59)ITP患者骨髓各阶段巨核细胞中部分巨核细胞胞浆出现空泡，细胞边缘包裹一层浅蓝色的物质，呈现葵花样，可能是ITP患者体内产生的血小板抗体，与巨核细胞表面抗原结合形成抗原-抗体复合物，形成一层浅蓝色的物质包裹在细胞的外层，影响了胞膜结构，从而影响了巨核细胞血小板的生成和释放，50.8%(30/ 59)患儿骨髓中可见到幼稚巨核细胞产小血小板现象。我们认为血小板减少患者血清中IgE增高、骨髓嗜酸性粒细胞比例增高、骨髓中见幼稚巨核细胞产小血小板和葵花样巨核细胞等现象，可作为ITP鉴别诊断重要依据。

[1]Ruggeri M,Fortuna S,Rodeghiero F.Heterogeneity of terminology and clinical definitions in adult idiopathic thrombocytopenic purpura:a critical appraisal from a systematic review of the literature [J].Haematologica,2008,93(1):98-103.

[2]张琳琳,贾永前,黄文芳,等.原发性血小板减少性紫癜两种血小板相关抗体检测方法的比较[J].国际检验医学杂志,2006,27(7):592．

[3]张之南.血液病诊断及疗效标准[M].第3版.北京:北京科技出版社,1998:281-282.

[4]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:145-154.

[5]Romero-Guzmán LT,López-Karpovitch X,Paredes R,et al.Detection of platelet-associated immunoglobulins by flow cytometry for the diagnosis of immune thrombocytopenia:a prospective study and critical review[J].Haematologica,2000,85(6):627-631.

[6]黄凯,柯江维,王晔.南昌地区儿童过敏原IgE抗体体外检测结果与分析[J].实验与检验医学,2012,30(3):291-293.

[7]于国芳,谭立明,李华,等.吸入性变应原检测对诊断过敏性疾病的临床应用[J].实验与检验医学,2012,30(3):230-232.

[8]候明.成人特发性血小板减少性紫癜的规范化诊断与治疗[J].临床血液学杂志,2008,21(1):3-4.

Analysis of experimental results in 59 children with Idiopathic thrombocytopenic purpura

CAI Xuqing，HUANG Daolian. Clinical Laboratory,Hospital of Torch Development Zone of Zhongshan City,Guangdong Zhongshan 528437,China

Abstrac:ObjectiveTo analyse the morphologic changes of bone marrow megakaryocytes and platelets and allergy index changes in children with idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP).Methods Fifty-nine children with ITP were enrolled to undergo morphology observation of bone marrow megakaryocyte and platelet，eosinophil counts and allergen detection.Results Vacuoles were visible in cytoplasma of bone marrow megakaryocytes in 91.5%ITP children.Immature megakaryocytes were observed producing platelets in 50.8%ITP children.88.1%ITP children had platelet morphologic abnormalities.The numbers of bone marrow eosinophil increased in 83.1%ITP children，and the levels of peripheral blood IgE increased in 72.9%ITP children.Conclusions Morphological changes of megakaryocyte have important significance in final diagnosis of ITP,the increase of bone marrow eosinophilia and serum IgE is helpful to differential diagnosis and therapy of ITP.

Idiopathic thrombocytopenic purpura;Megakaryocyte;Eosinophil;Morphology;Allergen IgE

R331.1+43,R558+.1,R446.11+1

A

1674-1129(2013)01-0031-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.011

蔡旭清，女，1972年生，大专，主管检验技师，从事医学检验工作。