丝切蛋白-1与卵巢癌分化关系的实验研究

汪银芬,汪期明,顾雪君

(宁波市妇女儿童医院,浙江 宁波 315000)

卵巢恶性肿瘤死亡率居妇科恶性肿瘤首位,已经成为严重威胁妇女生命和健康的主要肿瘤[1]。卵巢癌的转移是致死的主要原因,但其具体转移机制目前尚未有明确报道。丝切蛋白-1(cofilin-1)是真核生物中普遍存在的一种低分子质量蛋白,它可以与单体肌动蛋白(G-actin)和丝状肌动蛋白(F-actin)结合,在肿瘤细胞的运动和迁移中起着重要作用,研究表明,在乳腺癌细胞中丝切蛋白-1均有过度表达,并可增强乳腺癌细胞的侵袭性[2]。因此,我们猜测细胞骨架蛋白丝切蛋白-1可能参与卵巢癌分化与侵袭转移。

一、资料与方法

1.临床资料。标本经过组织学确诊为原发性卵巢癌患者30例,所有标本术前均未进行放化疗。组织学分级:高分化癌10例,中分化癌13例,低分化癌7例。本研究经院伦理审查委员会批准,并征得患者知情同意。

2.研究方法。采用免疫组化SP法分别检测不同类型卵巢组织中丝切蛋白-1蛋白的表达。免疫组化染色按说明书操作,以PBS代替一抗为阴性对照,以已知阳性片为阳性对照。上述标本经8um厚的石蜡包块连续切片组织,置涂胶玻片,37℃烘箱过夜。分别经梯度酒精水化处理,抗原修复,阻断过氧化氢酶的活性后,滴加丝切蛋白-1第一抗体,4℃过夜。滴加抗小鼠(或羊)IgG抗体-HRP多聚体,室温下孵育20分钟后应用DAB溶液显色。蒸馏水冲洗、苏木素复染,中性树胶封固。染色结果采用半定量分析组织化学评分(H-score)法,用Olympus光学显微镜观察,按显色肿瘤细胞的百分比划分,没有表达为0分,1%-33%为1分,33%-66%为2分,67%-100%为3分。以卡方检验比较丝切蛋白-1和卵巢癌分化程度之间的关系。检验水准α=0.05(双侧),P<0.05为差异有统计学意义。

二、结 果

将原发性卵巢癌病例根据恶性程度不同分为低分化、中分化、高分化病例三组,其中低分化卵巢癌病例丝切蛋白-1表达的评分为4.3±1.2,同时中分化卵巢癌病例丝切蛋白-1表达的评分为6.1±1.5,而高分化卵巢癌病例丝切蛋白-1表达的评分为8.3±2.1,统计分析表明在不同分化程度的病例组织中,随卵巢癌恶性程度的提高,丝切蛋白-1的表达亦呈现明显上升趋势,其差异均有统计学意义(P<0.05),经相关性统计分析表明,随着卵巢癌恶性程度的提高,丝切蛋白-1的表达也增加,两者具有显著的正相关(r=0.95,P<0.05)。

三、讨 论

卵巢癌是一种常见的妇科肿瘤,大多数病人发现时已伴有肿瘤转移,这使得卵巢癌成为妇科肿瘤最常见的致死原因之一。研究卵巢癌的转移机制可为卵巢癌治疗提供新的靶点。研究表明,某些细胞骨架成分的改变可以增加肿瘤细胞的运动能力。细胞骨架的动态变化是细胞形成伪足,进行迁移和侵袭的基础[3]。细胞骨架的重构受到多重因素的调节,细胞骨架蛋白在细胞骨架重构,调节细胞的迁移和侵袭方面有着重要作用。目前研究证明丝切蛋白-1作为细胞骨架蛋白家族成员之一,参与了乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多种肿瘤的侵袭转移[4]。本研究通过免疫组化方法检测了30例原发性卵巢癌组织丝切蛋白-1表达情况,结果表明,随着卵巢癌恶性程度增加,丝切蛋白-1的表达量亦不断增加,这提示丝切蛋白-1的表达量与卵巢癌的恶性程度密切相关,影响着卵巢癌细胞的侵袭转移。

丝切蛋白-1是一种重要的细胞骨架蛋白,可以诱导细胞片状伪足的形成,影响细胞的运动方向及迁移能力。已有研究表明,丝切蛋白-1表达阴性的卵巢癌患者生存率明显高于丝切蛋白-1表达阳性的患者。在上皮性卵巢癌中,丝切蛋白-1 mR NA的表达量是一个影响卵巢癌预后的独立因子,丝切蛋白-1的活性增强了卵巢癌细胞的运动能力和转移能力,导致卵巢癌预后变差[5]。综上所述,本研究结果表明随着卵巢癌恶性程度增加,丝切蛋白-1的表达量亦不断增加,提示丝切蛋白-1可能参与了卵巢癌的发生和侵袭转移,针对丝切蛋白-1的研究可能为卵巢癌患者治疗提供新的思路和治疗方法。

[1]李小平.卵巢癌化疗中若干问题的思考[J].中华妇产科杂志,2011,46(12):898-900.

[2]Wang LH,Xiang J,Yan M,et al.The mitotic kinase Aurora-A induces mammary cell migration and breast cancer metastasis by activating the Cofilin-F-actin pathway[J].Cancer Res.2010;70(22):9118-9128.

[3]曹宇星.细胞骨架在肿瘤细胞迁移与转移中的作用[J].国际肿瘤学杂志,2010,37(12):898-900.

[4]王伟森,肖大伟,郑育举,等.丝切蛋白与肿瘤细胞的侵袭及转移[J].医学综述,2009,15(12):1788-1791.

[5]Nishimura S,Tsuda H,Kataoka F,et al.Overexpression of cofilin 1 can predict progression-free survival in patients with epithelial ovarian cancer receiving standard therapy[J].Hum Pathol.2011;42(4):516-521.