乙肝携带产妇血清、乳汁及新生儿血清中HBV DNA载量的关系探讨

夏 伟 陈 芳

1.重庆市大渡口区人民医院检验科，重庆 400084；2.四川省自贡市第三人民医院检验科，四川自贡 643000

中国属于乙型肝炎病毒（HBV）感染高流行区，一般人群的HBsAg阳性率高达9.09%。接种与未接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率分别达4.51%和9.51%[1]。文献报道[2]，产妇HBV感染度高达23.51%。如何阻断HBV的母婴传播是临床传染病学研究的焦点之一。目前对于乙肝携带者产后母乳喂养会否传染HBV仍存在争议[3]。血清HBV DNA是判断乙肝传染性和病毒复制最直接可靠的指标[4-6]。笔者采用荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒携带产妇血清、乳汁和新生儿血清中HBV DNA含量，以探讨产妇血清不同HBV DNA水平与乳汁和新生儿血清HBV DNA载量之间的关系，为临床采取合适的孕期处理措施和产后母乳喂养提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 标本采集与处理

收集2009年12月～2011年12月我院妇产科分娩的乙型病毒性肝炎病毒感染产妇293例，年龄19～43岁，平均27岁。血清标本采集：产妇空腹静脉采血2 mL、新生儿出生后24 h内（未实施被动和主动免疫）于股静脉采血2 mL，均在2 h内分离血清备用。乳汁标本采集：清洗乳房后，挤乳汁1.5～2.5 mL于消毒试管内立即送检。乳汁标本处理参考文献[7]，先将标本3 000 r/min离心10 min（离心半径20 cm），弃上层脂肪层，取中层乳清进行检测。分离后的血清和乳汁标本储存于-70℃冰箱保存，同时完成检测。

1.2 试剂、方法与仪器

HBV DNA荧光定量检测试剂盒（中山大学达安基因股份有限公司），严格按照试剂盒说明书进行操作，检测过程实施全面质量控制。以病毒载量≥1.0×103copies/mL判为阳性。实时荧光定量PCR扩增仪FTC-2000型（上海枫岭生物技术有限公司）。

1.3 分组方法

根据实验结果，将产妇血清HBV DNA载量划分为血清阴性组（HBV DNA＜103copies/mL）、血清低拷贝组（103copies/mL≤HBV DNA≤106copies/mL）和血清高拷贝组（HBV DNA＞106copies/mL）。

1.4 统计学方法

采用SPSS11.0统计软件，计数资料采用百分率表示，组间对比采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV感染产妇血清HBV DNA载量

293例HBV感染产妇中，HBV DNA阴性组、低拷贝组和高拷贝组分别占50.2%、21.8%和28.0%。见表1。

表1 293例产妇血清中HBV DNA检测结果

2.2 HBV感染产妇血清HBV DNA不同载量组与乳汁及新生儿血清中HBV DNA载量的关系

血清HBV DNA阴性组产妇乳汁中HBV DNA检出率为0。而血清低拷贝组和高拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性检出率分别为12.5%（8/64）和76.8%（63/82），前者明显低于后者（P＜0.01）。而血清HBV DNA阴性组、低拷贝组和高拷贝组之间新生儿血清HBV DNA阳性率分别为2.0%（3/147）、3.1%（2/64）和3.7%（3/82），三者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 HBV感染产妇乳汁及新生儿血清中HBV DNA检测结果[n（%）]

3 讨论

乙型肝炎病毒（HBV）属嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae），为部分双链环状DNA。HBV DNA是乙肝病毒的遗传物质基础，是反映HBV复制及传染性的直接标志。从本研究结果看，有50.2%乙肝携带产妇血清HBV DNA阴性，49.8%为阳性，其中低拷贝组和高拷贝组HBV DNA阳性率分别为21.8%和28.0%。在147例血清HBV DNA阴性组中，产妇乳汁中HBV DNA全部阴性。在血清HBV DNA的阳性的产妇中，低拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性率仅为12.5%，而高拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性率高达76.8%，阳性率显著高于低拷贝组。说明产妇血清HBV DNA分泌到乳汁中可能存在一个浓度临界值（阈值），106copies/mL很可能就是产妇血清HBV DNA分泌到乳汁的阈值浓度。血清HBV DNA达到或超过临界值浓度时，乳汁中HBV DNA阳性率大幅显著增加，而小于这个界值浓度时乳汁HBV DNA阳性率低。这与文献[8]研究结果基本一致。低拷贝组乳汁HBV DNA阳性率仍比血清HBV DNA阴性组产妇高，两者差异有统计意义。

因此，对于母乳喂养问题建议如下，乳汁HBV DNA阳性的产妇，不宜哺乳喂养，而应采取人工喂养。当产妇血清和乳汁HBV DNA均阴性时可以放心实行母乳喂养，当产妇血清HBV DNA阳性浓度在103～106copies/mL时，应检测乳汁HBV DNA浓度确定可否母乳喂养（乳汁HBV DNA阴性可进行，阳性则不可进行母乳喂养）；当产妇血清HBV DNA浓度达到或超过阈值浓度106copies/mL时，HBV DNA容易大量进入乳汁，则不宜进行母乳喂养，而建议进行人工喂养。

本研究结果表明，新生儿血清HBV DNA阳性率为2.0%～4.9%，在血清阴性组、低拷贝组和高拷贝组产妇中无差异（P＞0.05）。这说明产妇血清中HBV DNA阳性率与胎儿宫内感染率无显著相关性，与文献报道相符[9]。HBsAg阳性产妇中49.8%（146/293）具传染性，而宫内感染率才3.1%～4.9%。其原因很可能是HBV母婴垂直传播受到胎盘屏障的阻隔。换言之，胎盘屏障受损是胎儿宫内感染的一个重要因素。这一点启示我们临床医师针对HBV感染的孕妇在孕期要尽量减少药物或其他因素对胎盘屏障损伤，以减少胎儿宫内感染率。

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