谷仿丽,陈乃富,,戴 军
(1.皖西学院 生物与制药工程学院,安徽 六安237012;2.植物细胞工程安徽省工程技术研究中心,安徽 六安237012)
石斛是常用的名贵中药材。安徽霍山因拥有得天独厚的地理位置及气候条件,分布有石斛品种3个[1]。其中,霍山石斛(Dendrobium huoshanese)为石斛中的极品,但20世纪中后期人们掠夺性的采挖,致使野生的石斛资源已近枯竭,品种已处于濒危状态,而市场对石斛原料的需求正逐年增加,出现供不应求的局面。
为此,皖西学院组织大量的人力物力进行霍山石斛物种保护及集约化生产研究,通过“胚培养—原球茎—完整植株”的快繁模式实现了霍山石斛种苗的快速繁殖,并经过原产地炼苗后进行栽培,成活率已达到90%。目前,霍山石斛尚无深加工产品开发,主要以粗加工品(枫斗)为主,技术含量低,效益较差[2]。
本课题拟提取鲜霍山石斛多糖溶液,加入适当的辅料,将其制备成口服液,为霍山石斛的深加工开发打下基础。
霍山石斛,采自安徽省霍山县石斛产业基地;壳聚糖,浙江金壳生物化学有限公司;蔗糖(药用),青岛裕丰达精细化工有限公司;柠檬酸(药用),湖南长沙华日制药有限公司,蜂蜜,等。
数显恒温水浴锅(HH-2型,国华电器有限公司),电热恒温鼓风干燥机(DHG-9101-1型,上海三发科学仪器有限公司),TU-1201紫外可见光分光光度计(北京普析通用仪器设备有限公司),FA1004电子天平,等。
霍山石斛原料→清洗、挑选→干燥→煎煮→过滤→离心→澄清→调配(加入蔗糖、蜂蜜、柠檬酸等)→稳定剂→高温灭菌→灌装→成品→包装。
选用新鲜的人工种植霍山石斛,将其去杂、清洗、分选后80℃干燥至恒重。依文献[3],以温度80℃、料液比1∶30、时间2h、提取次数2次提取霍山石斛多糖提取液。
依据文献[4]用2%醋酸液配成2%壳聚糖澄清剂100mL,分别于60℃加入霍山石斛多糖提取液中,加 入 量 分 别 为 0.03%、0.06%、0.09、0.12%、0.15%、0.18%,搅拌均匀,静置24h,用分光光度计于490nm处测其透光率,以透光率和多糖保留率(澄清后多糖含量/澄清前多糖含量)作为判断澄清效果的标准。
根据霍山石斛多糖提取液的口感特点,选取蔗糖(A)、蜂蜜(B)、柠檬酸(C)为调配料,采用正交试验(因素水平见表1),以感官综合评分法对L9(34)正交试验中的9个实验样品分别进行感观评分,评分标准[5-6]如表2所示,以组织形态、色泽、香气和滋味的分数之和,即为该产品的感官指标评分结果,以此评价指标,确定最佳配比方案。
表1 因素水平表
表2 霍山石斛口服液感官评价标准表
采用苯酚——硫酸法测定提取液多糖含量为1.83mg/mL,将提取液浓缩至含2mg/mL多糖。
随着壳聚糖用量的增加,口服液透光率越来越高,而多糖保留率越来越低,当壳聚糖用至0.15%时,口服液颜色较淡,多糖保留率下降较多,综合考虑,选择0.12%壳聚糖用于口服液澄清,澄清度适宜,多糖保留率达95%。
图1 壳聚糖用量对口服液多糖保留率的影响
图2 壳聚糖用量对口服液透光率的影响
由表3可见,各因素影响的主次顺序为A>B>C>D,其较优组合为A3B3C3D2,即霍山石斛多糖提取液90%、蔗糖4%、蜂蜜4%、柠檬酸0.15%,此时霍山石斛多糖口服液呈浅黄色,霍山石斛味浓,甜酸适口。
表3 正交试验结果
以温度80℃、料液比1∶30、时间2h、提取次数2次提取霍山石斛多糖,浓缩至多糖含量为2mg/mL,用0.12%壳聚糖进行澄清,澄清度较好,多糖保留率达95%。
霍山石斛多糖口服液的较佳配方为:霍山石斛多糖提取液90%(多糖含量为1.7mg/mL),蔗糖4%,蜂蜜4%,柠檬酸0.15%。用此工艺制备的霍山石斛口服液颜色淡黄,石斛味适中,甜酸适口,工艺简单,稳定性好。
[1]中国中药资源编写委员会.中国中药资源[M].北京:科学出版社,1995.
[2]李耀亭,陈乃富,邓辉.霍山石斛产业化发展的问题与对策[J].生物学杂志,2009,26(2):67-69.
[3]谷仿丽,陈乃富,戴军.霍山石斛组培苗多糖的提取工艺研究[J].宿州学院学报,2011,26(11):68-70.
[4]王巧玲,岳宝森,董力.壳聚糖用于当归补血口服液澄清工艺的研究[J].陕西中医,2007,28(2):219-220.
[5]李健,陈平,刘宁,等.香菇多糖口服液的研制[J].食品工业科技,2005,26(5):76-78.
[6]张玉先,吴龙奇.天麻口服液的研制[J].食品科学,2006,26(6):213-214.