手足口病患儿血清肿瘤坏死因子-α、白介素6和白介素10水平的变化

李 云 李维春 武 荣

1.安徽医科大学滁州临床学院，安徽滁州 239000；2.安徽医科大学淮安市妇幼保健院，江苏淮安 223002

手足口病患儿血清肿瘤坏死因子-α、白介素6和白介素10水平的变化

李 云1李维春1武 荣2▲

1.安徽医科大学滁州临床学院，安徽滁州 239000；2.安徽医科大学淮安市妇幼保健院，江苏淮安 223002

目的 观察手足口病（HFMD）患儿血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）的变化。 方法 采用酶联免疫吸附实验（ELISA）抗体夹心法测定15例HFMD患儿（急性期、恢复期）及同期10例健康体检儿童血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量，用SPSS软件对所得数值进行统计学分析。 结果HFMD患儿急性期TNF-α、IL-6和IL-10含量均显著高于健康对照组 （P<0.05）。恢复期IL-6含量与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），而TNF-α和IL-10水平仍高于健康对照组（P<0.05）。 结论 HFMD患儿急性期炎症细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10）水平均显著升高，而抑制性细胞因子IL-10水平和TNF-α水平升高持续到恢复期。

手足口病；儿童；白介素-6；白介素-10；肿瘤坏死因子-α

手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）是肠道病毒引起的常见小儿急性传染病之一，多发生于婴幼儿，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，个别患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。患儿免疫功能紊乱可能是手足口病的重要发病机制之一[1-2]，本文通过对2011年3～9月在本院住院治疗的15例HFMD患儿进行研究，观察患儿血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）的水平变化，并观察三者在HFMD发病过程中的变化。

1 资料与方法

1.1 一般资料

15例HFMD病例均为本院2011年3～9月的住院患儿，所有病例均符合卫生部办公厅的《手足口病诊疗指南（2010年版）》诊断标准[3]，其中，男 8 例，女 7 例，平均年龄（15.8±10.3）个月。

1.2 健康对照儿童

选择同时期常规体检儿童 10例，年龄（15.3±9.6）个月（平均年龄20个月）。其中，男5例，女5例。否认近期有呼吸道、消化道等感染病史，否认有HFMD等传染病接触史。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 抽取HFMD患儿及健康儿童静脉血各3 mL，3 000 r/min离心10 min，留取血清，无菌分装后置于-80℃冰箱备用。

1.3.2 细胞因子检测 使用ELISA法检测患儿血清IL-6、IL-10和TNF-α。试剂盒购自美国R﹠D公司，严格按照试剂盒使用说明书操作。

1.4 统计学分析

采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。数据用均数±标准差（±s）表示。以单向方差分析组间差异，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 IL-6含量

急性期、恢复期和对照组3组间数值比较，差异有统计学意义（F=43.115，P=0.000）。其中急性期数值高于恢复期，差异有统计学意义（P＜0.05）；恢复期和对照组数值比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

2.2 IL-10含量

急性期、恢复期和对照组3组间数值比较，差异有统计学意义（F=58.714，P=0.000）。急性期数值高于恢复期，差异有统计学意义（P＜0.05）；恢复期数值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.3 TNF-α含量

急性期、恢复期和对照组3组间数值比较，差异有统计学意义（F=27.296，P=0.000）。急性期数值高于恢复期，差异有统计学意义（P＜0.05）；恢复期数值高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表 1 血清 TNF-α、IL-6、IL-10 的含量（±s，ng/L）

表 1 血清 TNF-α、IL-6、IL-10 的含量（±s，ng/L）

注：与急性期比较，aP＜0.05；与正常对照比较，bP＜0.05

组别 例数（n） TNF-α IL-6 IL-10急性期恢复期正常对照F值P值15 15 10--311.53±135.19b 156.20±72.12ab 32.10±9.99 27.296 0.000 58.13±13.29b 32.13±6.59a 25.50±6.12 43.115 0.000 101.73±27.34b 48.67±12.48ab 23.70±5.58 58.714 0.000

3 讨论

细胞因子是多种细胞所分泌的能调节细胞生长分化、调节免疫功能、参与炎症发生和创伤愈合等小分子多肽的统称。在感染性疾病进程中，激活的单核细胞和肺巨噬细胞释放炎性细胞因子，特别是IL-6和TNF-α，机体进行抗感染免疫反应，并随之发生复杂的免疫功能改变[4]。血清TNF-α主要来自激活的单核细胞、巨噬细胞、NK细胞、B细胞等，并且相互协调与促进，共同发挥作用。IL-6是一个潜在的炎性因子，能引发机体强烈的炎性反应，如果不加控制，可导致严重的低血压、多器官功能障碍，甚至死亡。

过量的炎性刺激也可引起一些特异性的细胞因子中和分子，如TNF-α受体、抗炎因子IL-10等来下调宿主的炎性反应，使机体产生代偿性抗炎反应综合征[5]。IL-10由TH2细胞、B细胞和巨噬细胞分泌，能抑制T细胞、淋巴细胞和巨噬细胞释放前炎性细胞因子，有效下调前炎性反应，而且IL-10对细胞免疫应答产生负向调控作用，如果IL-10表达水平大幅度升高，机体免疫应答将趋于降低。

本次实验发现，急性期TNF-α、IL-6和IL-10含量均显著高于健康对照组（P<0.05）；结果提示HFMD初期即有免疫抑制和免疫亢进同时存在，机体处于复杂的免疫紊乱和动态失衡中。而恢复期TNF-α和IL-10水平仍高于健康对照组（P<0.05），提示HFMD患儿在临床症状消失后，短期内机体免疫功能未恢复正常。与黄小霏等[6]研究结果基本一致。有研究发现[7-8]，TNF-α、IL-6和IL-10含量可能与病情的轻重有关。

综上所述，在HFMD患儿的发病过程中，TNF-α、IL-6和IL-10三种细胞因子均参与重要的机体免疫调节作用，有一定的临床意义。

[1]Huang MC，Wang SM，Hsu Yw，et al.Long-term cognitive and motor deficits after enterovims 71 brainstem encephalifis in children[J].Pediatrics，2006，118（6）：1542-1547.

[2] 朱庆峰.手足口病的诊断和治疗[J].中国当代医药，2010，17（11）：14-18.

[3]中华人民共和国卫生部.手足口病诊疗指南 （2010年版）[J].国际呼吸杂志，2010，30（24）：1473-1475.

[4]付丹，李成荣，何颜霞，等.肠道病毒71型感染患儿免疫功能探讨[J].中华儿科杂志，2008，47（11）：829-834.

[5]Glynn P，Coakley R，Kilgallen I，et al.Circulating interleukin 6 and interleukin 10 community acquired pneumonia[J].Thorax，1999，54（1）：51-55.

[6]黄小霏，檀卫平，江润昌.手足口病患儿血清IL-6、IL-10、IL-17水平的变化及其临床意义[J].中山大学学报（医学科学版），2012，33（2）：195-197.

[7]周艳，徐元宏.手足口病患儿血清细胞因子与免疫球蛋白水平检测和分析[J].临床输血与检验，2011，13（1）：27-29.

[8]李维春，武荣，张克昌，等.不同病情手足口病患儿血清中IL-1β、IL-10和 TNF-α 水平观察[J].中国实验诊断学，2011，15（3）：524-525.

The change of serum levels of tumor necrosis factor-alpha,interleukin-6 and interleukin-10 in children with HFMD

LI Yun1LI Weichun1WU Rong2▲
1.Pediatrics Department,Chuzhou Clinical Institute of Anhui Medical University,Chuzhou 239000,China;2.Pediatrics Department,Huaian Maternity and Child Healthcare Hospital Affiliated to Anhui Medical University,Huaian 223002,China

Objective To observe the changes of serum levels of tumor necrosis factor-alpha(TNF-α),interleukin-6(IL-6)and interleukin-10(IL-10)in children with hand,foot and mouth disease(HFMD).Methods The serum levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 content in 15 cases with HFMD (acute phase,convalescence)and the 10 cases of healthy children were detected by enzyme-linked immunosorbent assay.The date for statistical analyzed by SPSS software.Results The value of TNF-α,IL-6 and IL-10 of HFMD in the acute phase were significantly higher than the healthy control group (P<0.05).IL-6 content was not statistically significant between in convalescent and the healthy control group(P＞0.05).TNF-α and IL-10 levels were still higher than that of the healthy control group(P<0.05).Conclusion The cytokines(TNF-α,IL-6,IL-10)levels are significantly elevated acute phase of HFMD,while the inhibitory cytokine IL-10 levels and TNF-α levels continued into the recovery period.

Hand,foot and mouth Disease;Child;TNF-α;IL-6;IL-10

R725.1

A

1674-4721（2012）11（c）-0023-02

安徽省滁州市2011年科技计划项目（编号：201166）。

▲通讯作者

2012-10-08 本文编辑：林利利）