高效液相色谱法测定桃红促孕合剂中芍药苷的含量

张颖 王伟丽 朱明伟

河南省商丘市食品药品检验所，河南商丘 476000

高效液相色谱法测定桃红促孕合剂中芍药苷的含量

张颖 王伟丽 朱明伟

河南省商丘市食品药品检验所，河南商丘 476000

目的建立桃红促孕合剂的质量标准。方法色谱条件Agilent-C18色谱柱，流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），流速：1.0 mL/min，波长：230 nm。结果芍药苷在0.308 2～6.164 0μg的范围内，有良好的线性关系，r=0.999 9，平均回收率为98.79%，RSD为0.96%。结论建立了桃红促孕合剂的质量标准，该方法操作易行，稳定可靠，可用于桃红促孕合剂中芍药苷的含量测定及该制剂的质量控制。

桃红促孕合剂；芍药苷；高效液相色谱法

桃红促孕合剂是经批准生产的医院中药制剂[1]（豫药制字Z04140004），有补肾化瘀、理气和血之功效。经过多年的应用证明用于调节垂体卵巢功能，促成熟卵破裂排卵，治疗月经不调，无排卵性不孕症的功效显著。其处方由赤芍、熟地黄、赤芍、丹参、桃仁、红花等十味药组成，现行质量标准不能有效地控制药品质量。根据药效和处方确定赤芍为方中主要药味，而芍药苷是赤芍的有效成分之一，为了进一步提高该制剂标准，笔者采用HPLC法对处方中的芍药苷进行了含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent1260 HPLC；Agilent-C18（150 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，AUW-220D电子天平（上海方瑞仪器厂）。

1.2 试药

桃红促孕合剂（商丘市柘城县人民医院提供，批号：110409、110520、110525）。芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：110736-201035）。高效液相色谱所用试剂均为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]

流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），检测波长：230 nm，柱温：35℃，流速：1.0mL/min，进样量：10μL。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于2 000。

2.2 对照品溶液和供试品溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，置量瓶中，加稀乙醇制成每毫升含30.82μg的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备取供试品5支，混匀，精密量取5mL，置于50mL量瓶中，加稀乙醇35mL，振摇提取，并加稀乙醇至刻度，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.3 线性关系考察

吸取对照品溶液（30.82μg/mL）1.0、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0μL进样，芍药苷的保留时间为6.68min，以芍药苷峰面积对进样量进行回归，芍药苷的回归曲线Y=94.803X+2.865，r=0.999 9，芍药苷在0.308 2～6.164 0μg线性范围内线性关系良好。

2.4 阴性干扰试验

除赤芍外，其他各药味均正常投料制成阴性缺赤芍对照品，然后制成阴性供试品溶液。同法检测，在与芍药苷对照品色谱峰相应的位置上，供试品有相同保留时间的色谱峰，而阴性对照溶液在此位置上没有。见图1。

2.5 精密度考察

取同一供试品溶液（批号：110520）测定6次，测定峰面积，结果RSD=0.84%。

2.6 重复性考察

精密称取（批号：110520）样品，制备供试品溶液6份，进样，测定。结果平均含量为1.032mg/mL，RSD=1.13%。

2.7 稳定性考察

取供试品溶液（批号：110520），进样（0、1、2、4、8、12 h），按上述色谱条件测定峰面积积分值。计算结果，RSD=0.77%。

2.8 加样回收率考察

精密量取已知含量的样品6份（批号：110520），精密加入同一浓度（0.195 4 mg/mL）对照品，照上述方法制备，按上述色谱条件进样10μL，测定，计算，平均回收率为98.79%，RSD为0.96%，结果见表1。

2.9 含量测定

按上述含量测定方法测定样品中芍药苷含量。结果见表2。

3 讨论

本研究以超声提取、振摇提取，回流提取为不同提取方法，同时处理30 min、1 h后，进行检测[3-6]，回流、超声和振摇30min和1 h的提取效果基本相似，说明处理30min时样品中的芍药苷已经被提取完全。而回流、超声和振摇30min芍药苷含量分别为2.241、2.202、2.235mg/mL，提取结果相近，考虑到实际操作过程的可操作性，本实验采取了振摇提取的提取方法。

表1 加样回收实验

表2 样品中芍药苷的含量

桃红促孕合剂是临床实践证明疗效良好的医院制剂，但该药的质量控制方法仅有薄层鉴别，考虑到赤芍是桃红促孕合剂的主药，本实验用HPLC法对该制剂中芍药苷的含量进行测定，建立了该制剂的质量控制方法。该方法能够准确并快速地控制该制剂的质量，可用于桃红促孕合剂中芍药苷的含量测定。

[1]河南省医疗机构制剂标准.豫药制字：Z04140004[Z].

[2]国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：96.

[3]凌明，马安宇.HPLC测定胃肠合剂中芍药苷和黄芩苷的含量[J].中成药，2008，30（9）：1311-1113.

[4]陈晓燕，李顺祥.HPLC法测定阿归养血糖浆中芍药苷含量[J].中医药导报，2009，15（3）：81-83.

[5]刘洁.反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量[J].时珍国医国药，2010，21（9）：125.

[6]张建业，冯向东.HPLC法同时测定八珍益母丸中芍药苷和甘草酸铵的含量[J].中国药师，2011，14（7）：992.

Determ ination of Paeoniflori in Taohongcuyun M ixture by HPLC

ZHANG Ying WANGWeili ZHU Mingwei
Shangqiu Institute for Food and Drug Control,He′nan Province,Shangqiu,476000,China

ObjectiveTo establish a standard for determination of Paeoniflori in Taohongcuyun Mixture.MethodsChromatographic colum was Agilent-C18,themobile phase was acetonitrile-0.1%phosphoric acid solution(14∶86),the flow ratewas1.0mL/min,the detection wavelength was 230 nm.ResultsThe linear range of Paeonifloriwas 0.308 2-6.164 0μg, r=0.999 9.The average recovery of Paeonifloriwas 98.79%and RSD was 0.96%.ConclusionThemethod is simple,sensitive and accurte,and can be used to determine Paeoniflori in Taohongcuyun Mixture and quality control of Taohongcuyun Mixture.

Taohongcuyun Mixture;Paeoniflori;HPLC

R927.2

A

1673-7210（2012）10（a）-0116-02

张颖（1972-），女，本科，副主任药师，从事药品检验及制剂质量标准研究。

2012-04-16 本文编辑：卫轲）