复合中草药对罗非鱼生长性能、免疫指标和体组成的影响

广东省农业科学院畜牧研究所 广州飞禧特水产科技有限公司 黄文庆 黄燕华 李国立 王国霞 林佳南

研究表明，在饲料中添加中草药可提高凡纳滨对虾增重率、特定生长率和免疫力，促进其生长（董晓慧等，2009；李明和董晓慧，2008）。汤菊芬等（2009）认为，复合中草药对罗非鱼有降低死亡率，促进生长和提高免疫力的作用。本试验探讨了饲料中添加复合中草药制剂对罗非鱼生长性能、免疫指标及其体组成的影响，旨在为中草药制剂在罗非鱼配合饲料中的应用研究提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验日粮 本试验所用复合中草药制剂主要成分由黄芪、金银花、苦参、紫花地丁、蒲公英等20多种天然植物经低温提取制成。

以豆粕和鱼粉为主要蛋白源，以豆油和磷脂油为主要脂肪源的基础饲料配方见表1。以基础日粮为对照组，基础日粮中分别添加0.1%、0.2%、0.4%中草药制剂为试验组，经V型混合机混匀后，用挤压机制成粒径为1.5 mm的颗粒料，50℃烘干，冷却后用密封袋包装，-20℃保存备用。

1.2 饲养管理 罗非鱼苗种由广州市番禺罗非鱼苗种厂提供。选用240尾个体均一、活力健康的罗非鱼苗随机分为4个处理组，每个处理组3个重复，每个重复挑取20尾，在室内流水循环系统水族箱中饲养，为期8周。试验期间，水深约0.6 m，循环系统持续循环，每天投喂2次（8∶00和15∶00），日投喂量为罗非鱼体重的4%～6%，据实际摄食情况调整投饵量，养殖后期2 d换水1次。饲养期间定期对水环境的理化因素进行检测 （水温、pH、氨氮、溶氧、亚硝酸盐）。水温为 25.7～31.5℃、pH保持在7.5左右、溶氧＞5 mg/L、氨氮≤0.02 mg/L，亚硝酸盐≤0.2 mg/L。全天充气，光照时间为自然光照时间。

表1 罗非鱼饲料基础组成及营养水平

1.3 样品采集 试验进行到第4周末时停喂24 h，空腹称取每个缸的鱼总重和记录尾数，统计试验中期的生长性能和成活率。试验第8周末饲养结束停喂24 h，称取每个缸的鱼总重和记录尾数。每个重复随机挑取5条鱼保存于-20℃冰箱待做全鱼分析。挑选体重与均重偏差不大的鱼进行尾静脉采血，待凝血后离心分离（8000 r/min，4℃，离心10 min）血清，血清样分装保存于-20℃冰箱待测。同时解剖取出肝胰脏，按其重量分别加入9倍体积（m/V）预冷去离子水（4 ℃，pH7.0），用玻璃匀浆器在冰浴中匀浆，取混匀匀浆液离心 （5000 r/min，4℃，10 min），然后取上清液置于-20℃备用，用于酶活检测。生长性能指标及计算公式如下：

增重率=（末均重-初均重）/初均重×100；

特定生长率=（ln末均重-ln初均重）/饲养天数×100；

成活率=存活尾数/试验尾数×100；

饵料系数=摄食量/（终末总体重＋死亡总体重－初始总体重）。

1.4 样品分析 酶液、血清蛋白浓度的测定；蛋白量测定用考马斯亮蓝G－250法测定。谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和总抗氧化能力（TAOC）均用南京建成生物的试剂盒检测；血清酚氧化酶（PO）活力的测定参考 Ashida（1971）的方法；溶菌酶采用溶壁微球菌悬浮液比浊法。全鱼体组成分析 ：水分、粗蛋白质、粗脂肪、灰分、钙和磷成分检测分别采用烘干失重法、凯氏定氮法、索氏抽提法、高温灼烧法、EDTA滴定法、钼黄分光光度法测定。

1.5 数据统计分析 试验数据采用平均值±标准差表示，采用SPSS11.5软件进行数据分析和统计，先对数据作单因素方差分析（ANOVA），若处理间差异显著，再用Duncan’s进行多重比较，显著性水平为0.05。

2 试验结果

2.1 中草药对罗非鱼生长性能的影响 从表2可知，添加中草药对罗非鱼前期和后期生长性能未产生显著影响（P>0.05）。前期：0.1%组较对照组增重率提高1.83%，饵料系数降低3.35%，0.4%组较对照组增重率提高5.21%，特定生长率提高2.35%，饵料系数降低4.47%；后期：0.1%组较对照组增重率提高6.11%，特定生长率提高4.52%，饵料系数降低6.33%；0.4%组增重率提高4.07%，特定生长率提高2.71%，饵料系数降低3.62%。

从饲养全期看：试验组末均质量、成活率、增重率、特定生长率较对照组均无显著差异 （P>0.05），饵料系数0.1%和0.4%组显著低于对照组（P<0.05）。其中0.1%组增重率提高3.61%，特定生长率提高3.65%，饵料系数降低4.5%；0.4%组增重率提高4.09%，特定生长率提高3.65%，饵料系数降低4.5%。

表2 中草药对罗非鱼生长性能的影响

2.2 中草药对罗非鱼免疫指标的影响 从表3可知，中草药对罗非鱼血清谷丙转氨酶（ALT）、蛋白质、谷草转氨酶（AST）、溶菌酶（LSZ）、总抗氧化能力（T-AOC）、酚氧化酶（PO）均无显著影响（P>0.05）。谷丙转氨酶随中草药添加量增加呈先下降后升高，0.1%组最低；谷草转氨酶随中草药浓度呈先升高后下降趋势，0.4%组最低；溶菌酶试验组较对照组有所提高；酚氧化酶随中草药添加量增加先下降后上升；试验组T-AOC均低于对照组。

表3 中草药对罗非鱼血清免疫指标的影响

从表4可知，中草药对罗非鱼肝脏蛋白、谷草转氨酶、溶菌酶、总抗氧化能力均无显著影响。肝脏谷丙转氨酶活随中草药添加量增逐渐降低，0.4%组显著低于其他处理组；蛋白随中草药添加量增加先下降后上升；谷草转氨酶活先提高后降低，0.1%组最高，0.2%和 0.4%组显著低于0.1%组；T-AOC随中草药添加量增加先上升后下降，0.1%组高于其他处理组。

表4 中草药对罗非鱼肝脏免疫指标的影响

2.3 中草药对罗非鱼体组成的影响 从表5可知，试验组的罗非鱼体组成中水分、粗蛋白质、粗脂肪、灰分、钙、磷较对照组均无显著差异（P>0.05）。0.1%组粗蛋白质显著高于0.4%组 （P<0.05）；0.2%组粗脂肪显著低于 0.4%组 （P<0.05）；0.1%组灰分显著低于 0.2%组和0.4%组（P<0.05）。试验组水分含量较对照组低了0.07%～0.79%，0.1%组粗蛋白质含量较对照组高0.6%，粗蛋白质随中草药添加量增加先上升后降低。表明，中草药添加过量会降低鱼体粗蛋白质含量。

3 讨论

3.1 复合中草药对罗非鱼生长性能的影响 中草药含有多种生物活性物质和天然营养物质，能促进动物的机体代谢和蛋白质以及酶的合成，进而促进动物的生长，提高营养物质的利用率，降低饵料系数（韩兆红等，2010；于明超等，2010；谢丽玲等，2009）。汤菊芬等（2009）研究发现，饲料中添加1.5%的复方中草药制剂使吉富罗非鱼的增重率提高 10.82%，饲料系数降低4.71%，蛋白质效率提高 15.68%。李卓佳等（2007）研究表明，饲料中添加适量的中草药能够显著提高斑节对虾成活率和降低饲料系数 （P<0.05）。段铭和冯现伟（1999）研究表明，高剂量复方中草药可以使鲫鱼增长率提高21.77%。本试验所用复合中草药制剂主要成分由黄芪、金银花、苦参、紫花地丁、蒲公英等20多种天然植物经低温提取而成，富含酚类、黄铜甙、靛甙等多种生物活性物质。饲料中添加0.1%～0.4%复合中草药制剂，试验结果表明，与对照组相比，0.1%和0.4%添加组增重率分别提高3.61%和4.09%；特定生长率均提高3.36%，饲料系数均降低 4.5%（P<0.05）；试验结果与前人报道相似。

表5 中草药对罗非鱼全鱼体组成的影响成

3.2 复合中草药对罗非鱼免疫指标的影响 研究证实，中草药的免疫活性有效成分主要有多糖类、甙类、生物碱、有机酸、萜类及醇类等。刘华忠等（2004）研究发现，复方中草药对彭泽鲫血清中溶菌酶和罗氏沼虾血清的溶菌酶及酚氧化酶活力均有显著提高作用。本试验结果表明，复合中草药制剂对罗非鱼溶菌酶无显著影响，与前人研究结果有所不同，这可能与复方中草药配方和养殖环境不同有关，确切原因有待进一步研究。谷丙转氨酶和谷草转氨酶是广泛存在于动物线粒体中的重要的转氨酶，在机体蛋白质代谢中起重要作用，正常情况下，血清中的转氨酶活性较小，当肝组织发生病变时可引起肝细胞内转氨酶大量释放到血浆中，引起血清中的谷丙转氨酶和谷草转氨酶浓度升高，因此，其活性变化也是反映肝细胞受损伤的主要敏感指标，血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的增减可以反映机体中毒或病理变化 （陆鑫等，2009）。 孟兆娜等（2010）和陈玉春等（2007）研究发现，中草药对鱼血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的活性有一定的降低诱导作用。陆鑫等（2009）在研究中发现，随着饲料中复方中草药含量的增加，转氨酶呈现先增加后下降的趋势，添加量为0.2%和0.4%复方中草药对尖吻鲈谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性有一定的降低诱导作用。本研究中草药对血清、肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶的影响与前人研究结果相似，表明中草药对罗非鱼血清、肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性有一定的降低诱导作用。

3.3 复合中草药对罗非鱼全鱼体组成的影响李卓佳等（2007）研究表明，投喂添加中草药的饲料对斑节对虾肌肉的水分和蛋白质含量无显著影响，但脂肪含量明显下降，氨基酸组成发生改变。中草药对异育银鲫肌肉中水分、蛋白质、各种脂肪酸和游离氨基酸的含量均无显著影响，但显著提高了肌肉的脂肪含量（邱小琮等，2003）。周歧存等（2006）研究也表明中草药对凡纳滨对虾的全虾营养组成无显著影响。本试验结果表明：日粮中添加复合中草药试验组罗非鱼体组成水分、粗蛋白质、粗脂肪、灰分、钙、磷较对照组均无显著差异（P>0.05）；但0.1%添加组体组成水分降低（0.4%），粗蛋白质提高（0.6%），粗脂肪降低（1.85%），效果优于其他试验组。而过量添加，反而会降低全鱼体组成粗蛋白质和增加粗脂肪含量。

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