朱凤琼 吴林键
(1.云南省陆良县动物疫病预防控制中心,陆良 655600;2.云南省陆良县板桥镇畜牧兽医站,陆良 655602)
猪圆环病毒病主要是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的猪传染性疫病,严重影响生猪产业的发展。我国自2000年报道和明确猪群中存在PCV2感染以来,随着引种、生猪调运等原因,流行范围迅速波及全国。陆良县是全国的养猪大县和生猪调出大县,近年来随着国家对生猪养殖扶持力度的增加,各种规模的养殖场、养殖小区不断涌现,全县各养殖场、养殖小区引种频率加大,在引种过程中出现对引进种猪的免疫情况、疫病流行情况不清楚,缺少严格隔离观察和血清学监测,为疫病的传播、流行创造了条件。近年来很多猪场的母猪出现发情匮乏,仔猪消瘦、皮肤发白、腹泻、呼吸困难,有的猪有黄疸,对猪瘟等疫苗接种形成免疫抑制,免疫抗体监测达不到理想的抗体水平。对发情匮乏母猪和消瘦的仔猪进行临床诊断、病理剖解发现存在猪圆环病毒2型感染的可能。为摸清我县猪圆环病毒病的流行、分布情况,我们从2009年到2011年的3年间应用猪圆环病毒2型ELISA抗体试剂盒对猪圆环病毒病进行抗体监测,初步掌握了本县猪圆环病毒病的流行、分布情况和规律,为制定该病的防治措施,提高母猪的生产情能,促进生猪生产提供了依据。
随机对全县未免疫猪圆环病毒2型疫苗规模猪场和散养户饲养母猪、仔猪和育肥猪前腔静脉或耳静脉无菌采血5 ml,静置过夜自然分离血清,血清不少于1.5 ml、不腐败、不溶血。
猪圆环病毒2型ELISA抗体试剂盒,购自武汉科前动物生物制品有限公司。
用直接ELISA方法检测猪血清中圆病毒2型抗体。
2.1 洗板2次后拍干 用样品稀释液将待检样品1:40稀释后加入板孔中,每孔100 μl,同时将1:4稀释的阴阳性对照血清各加2孔,每孔加100 μl,轻轻振匀孔中样品(注意不要溢出),置37℃温箱孵育30 min。
2.2 洗板5次后拍干。
2.3 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl,置37℃温箱孵育30 min。
2.4 洗板5次后拍干。
2.5 每孔加入底物A液50 μl,再加底物B液50 μl,混匀,室温避光显色10 min。
2.6 每孔加终止液50微升,并在15分钟内测定结果。
2.7 结果判定 在酶标仪上检测各孔OD 630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD 630值大于或等于0.7、阴性孔OD 630值必须小于0.3,待测孔OD 630值大于0.42判定为阳性;OD 630值在0.38和0.42之间,为可疑;OD 630值<0.38则判定为阴性。
从2009年到2011年3年间,用猪圆环病毒2型ELISA抗体试剂盒对全县生猪进行监测,共检测血清样品552头(份),检出阳性109份,阳性率为19.75%,其中,规模场样品326份。其中,阳性73份,阳性率为22.29%;散养户样品226份。其中,阳性36份,阳性率为15.93%。平均阳性率为19.75%。详见表1。
目前,陆良县所有生猪均没有免疫猪圆环病毒2型疫苗,3年间的监测平均阳性率为19.75%,说明PCV2感染在我县已广泛存在,猪群感染率较高;感染率呈逐年上升的趋势;规模猪场的感染率高于散户。针对本县PCV2的存在情况,必须制定出科学合理的防制方法,才能减少生猪生产的经济损失。详见图1。
图1 2009~2011年陆良猪感染圆环病毒病检测阳性率对比柱形图(%)
表1 2009年~2011年陆良县猪圆环病毒2型抗体检测结果
5.1 引种时要了解猪场免疫背景,做好检疫监测工作。不引进存在潜伏感染的猪只、引种后严格进行隔离观察,无异常后方可混群。
5.2 做好种猪场、扩繁场、供精站点的监测,坚决淘汰阳性种猪,防止通过精液、母体垂直传播,切断母源传播疫病的机会,逐步建立健康的种用体系。
5.3 坚持自繁自养,加强饲养管理,及时清理粪污,消灭蚊蝇,并定期进行彻底消毒,减少疫病传入的机会。
5.4 按免疫程序做好猪瘟、细小病毒病、蓝耳病、口蹄疫、猪伪狂犬等病免疫工作,减少继发感染,在条件成熟的时候,通过实验可以适当的对风险较大的猪群进行猪圆环病毒疫苗免疫。
5.5 定期监测,及时淘汰阳性猪只。要加强包括猪瘟、口蹄疫、猪伪狂犬、猪细小病毒、猪乙型脑炎等病的监测工作,特别是对种猪场、扩繁场更要做好监测工作,依据监测结果,淘汰阳性种猪,制定科学合理的免疫程序,通过监测来指导免疫,使猪只的各种疫病的抗体保持在一个较高的水平,有效的防止各种疫病的发生。及时淘汰疫病监测出的阳性猪只,逐步净化猪场的疫病,建立良好的疫病防控休系。