邢清洁
(河北省内丘县农业局,河北 内丘054200)
本人在基层从事动物疫病监测工作多年,对血样采集实际操作中需要注意的问题进行了总结,报告如下。
要掌握好采血时间与免疫日期的间隔。鸡新城疫、禽流感、猪瘟、牛羊口蹄疫在免疫21d后采血,猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病在免疫后28d采血。因为疫苗接种后,在动物体内产生抗体并达到一个稳定水平,需要时间和过程。
采样前,准备好采样所需的物品和防护用品,像保温箱(保温瓶)、冰袋、酒精棉、一次性注射器(和所需血样量相当的注射器)、记号笔、自封袋、标签、胶皮手套、口罩、防护服、胶鞋等。
采血前用75%酒精棉球局部消毒,以避免畜禽因采血而引起局部感染;鸡的皮肤游离性比较大,采血后容易形成血肿,所以采血完毕,要及时做好止血工作,即用酒精棉球压迫采血部位,防止血流过多。注意用酒精棉球压迫前要挤净酒精,防止酒精刺激引起流血过多。
获得符合卫生要求和高质量的血清是采血的关键。采血的方法同静脉注射,只是静脉注射的方向是针头要扎向近心端,而采血的方向则相反,针头扎向远心端,这样采血顺利。采血时应使血液沿采血管壁流入瓶中,不能让血液直冲瓶底或滴入瓶底,容易引起溶血。
采完血不要将采血管立放,这样血清不易析出,特别是鸡血、猪血。要将采血管口塞好后平放或斜放于容器中,血清就会自然析出,也可用离心机分离出血清。血样采好后,在来回拿取的过程中,要尽量避免震荡,以免红细胞破裂造成溶血而影响血清的效果。尤其是猪、牛、羊的血样,抗体检测要做ELISA,血清质量要求很严格,如果发生溶血,就会影响检测结果,甚至得不出结果。
在基层采血样主要是为了做抗体效价的监测,一份血清有可能做几种病的抗体效价检测,另外,还有的很可能需要复查,所以血样的量一定要保证。一般鸡、猪血不少于3mL,保证血清分离量不少于1mL。
在同群中要进行随机采样。不要挑着采,更不要专挑那些不产蛋的、消瘦的、不健康或者准备淘汰的鸡。如果挑着采样,样品代表不了整群,监测结果也就没有意义了。抽样监测结果代表的是整群,从样品的抗体合格率来反映整群的合格率,只有随机才有代表性。
采血完毕,立即于盛血样的器皿上粘贴或写上标记号码,同时填写采样单,并要一一对应。
采样单是对采样群基本情况的一个简要记录,一定要认真填写,包括畜主、饲养量、采样量、采样时间、免疫时间、疫苗种类、生产厂家、剂量等都要一一填写完整。
饲养量和采样数量,抽样量过少代表不了整群,量过大没有必要,一般1 000只鸡要采20~30只;免疫时间和采样时间要填写具体、清楚,因为疫苗在畜禽体内产生的抗体有一个消长规律,根据免疫和采样时间来推测畜禽应该达到的抗体水平,是不是和实际结果相符,如果理论结果和实际结果相差比较大,就要分析原因或者重新检测;生产厂家和剂量,根据抗体检测结果对比,可以得出哪个厂家的疫苗效果好,更能抵御外来病毒的侵袭,适合本地区使用,哪个厂家的疫苗成本更低,可以更好地降低养殖成本。
血样采好后,标记、整理、归类,放入加有冰袋的保温箱或者保温瓶中24h内(时间过长会发生溶血现象)带到实验室,及时做血清分离。分离后的血清24h内可冷藏保存,超过24h的要冷冻保存。
抗体监测是对免疫工作的一个检验,标志着免疫工作的成败,也是指导养殖场户制定科学合理的免疫程序的一个重要依据,是动物疫病防控的基础和关键,而好的、有代表性的样品是抗体监测的基础。所以,一定要做好样品的采集、运输和保存。