(天津市畜牧兽医研究所,天津 300112)
许多研究证明,丹参的有效成分具有抑制细胞发生脂质过氧化反应,清除机体产生的多余自由基,保护机体免受过氧化危害的作用[3-4]。同时有研究证明,中药在加工提取过程中,会有部分有效成分残留在剩余物中不能被完全提取。目前天津市每年丹参提取剩余物的产量在1 000 t以上,以往这些剩余物被当做垃圾处理掉,不仅需要耗费大量的人力、物力、财力,还会对环境保护造成一定压力。本试验旨在研究在肉仔鸡日粮中添加丹参提取剩余物,对于肉仔鸡生产性能和抗氧化能力的影响,为丹参提取剩余物作为动物抗氧化饲料添加剂的应用提供理论依据。通过本项目的研究,最终使丹参提取剩余物变废为宝,并为实现中药加工废弃物的循环、可持续利用提供指导。
丹参提取剩余物(丹参渣)从天津天士力现代中药资源有限公司生产现场采样,干燥备用;经天津市疾病预防与控制中心大鼠急性经口性试验表明,属于食品级无毒。经过天津市农科院中心实验室测定,丹参提取剩余物中含有抗氧化成分丹酚酸B 0.7%、丹参素0.7%、丹参酮ⅡA 0.1%。
选用1日龄体重一致、健康的AA肉仔鸡320只,分成4个处理,每个处理8个重复,每个重复10只鸡。处理1为对照组,饲喂基础日粮;处理2、3、4分别为在基础日粮中添加0.3%、0.5%和1.0%丹参提取剩余物的试验组。试验期42 d。
试验鸡以重复为单位单笼饲养,自由采食,自由饮水。日常管理与免疫程序按常规进行。试验期间每天记录鸡的供料量和余料量,计算每天的耗料量。
日粮配方为玉米-豆粕型,分为0~3周和4~6周两阶段,参照AA肉鸡营养需要配制,原料营养成分参考2004《中国鸡饲养标准》。基础日粮组成及营养水平见表1。
1.4.1 生产性能
试验期间以重复为单位记录每天鸡的耗料量,试验第0、21、42日龄以重复为单位分别称重,计算采食量、日增重和料重比。
表1 基础日粮组成及营养水平
1.4.2 血清抗氧化指标
范坚强抓过青年男子手中的皮鞭,狠狠地抽在一杭身上。一杭痛苦地呻吟着,低垂着头。范坚强说:“你说不说?”一杭咬着牙,什么也不说。
分别于试验第21、42 d早上空腹称重后,每个组选择24只体重一致、健康的肉鸡(每个重复选择3只)进行翅静脉采血5 ml,3 000 r/min离心10 min制备血清,于-20℃保存待测。测定血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。测定方法为南京建成生物工程研究所生产的试剂盒推荐方法,仪器为岛津-UV2210紫外分光光度仪。
数据用“Mean±SD”表示,采用 SAS 9.0统计软件进行数据分析,ANOVA方差分析,Duncan's法多重比较,以P<0.05作为差异显著性判断标准。
由表2可知,0~3周龄时,分别添加0.3%、0.5%和1.0%丹参提取剩余物的试验组肉仔鸡平均日采食量、平均日增重、料重比与对照组相比没有显著差异(P>0.05),但料重比都低于对照组。
4~6周龄时,分别添加0.3%、0.5%和1.0%丹参提取剩余物的试验组肉仔鸡平均日采食量、平均日增重、料重比与对照组相比没有显著差异(P>0.05),但料重比都低于对照组。
整个试验周期(0~6周龄),分别添加0.3%、0.5%和1.0%丹参提取剩余物的试验组肉仔鸡平均日采食量、平均日增重、料重比与对照组相比没有显著差异(P>0.05),但料重比都低于对照组,添加1.0%丹参提取剩余物的试验组效果较好。
表2 日粮中添加不同比例丹参提取剩余物对肉仔鸡生产性能的影响
2.2.1 丹参提取剩余物对肉仔鸡血清总抗氧化能力(T-AOC)的影响(见表3)
表3 日粮中添加不同比例丹参提取剩余物对肉仔鸡血清T-AOC的影响(U/ml)
由表3可知,与对照组相比,在日粮中添加0.3%、0.5%丹参提取剩余物,对于肉仔鸡21日龄和42日龄血清总抗氧化能力(T-AOC)的影响差异不显著(P>0.05);添加1.0%丹参提取剩余物可以显著提高肉仔鸡21日龄和42日龄血清总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),说明添加1.0%丹参提取剩余物试验组效果最佳。
2.2.2 丹参提取剩余物对肉仔鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响(见表4)
表4 日粮中添加不同比例丹参提取剩余物对肉仔鸡血清SOD活性的影响(U/ml)
由表4可知,与对照组相比,在日粮中添加0.3%、0.5%丹参提取剩余物,可以提高肉仔鸡21日龄和42日龄血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,但是差异不显著(P>0.05);添加1.0%丹参提取剩余物可以显著提高肉仔鸡21日龄和42日龄血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),其中添加1.0%丹参提取剩余物试验组效果最佳。
2.2.3 丹参提取剩余物对肉仔鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响(见表5)
表5 日粮中添加不同比例丹参提取剩余物对肉仔鸡血清GSH-Px活性的影响(U/ml)
由表5可知,与对照组相比,在日粮中添加0.3%、0.5%丹参提取剩余物,可以提高肉仔鸡21日龄和42日龄血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,但差异不显著(P>0.05);添加1.0%丹参提取剩余物可以显著提高肉仔鸡21日龄和42日龄血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05)。
2.2.4 丹参提取剩余物对肉仔鸡血清丙二醛(MDA)含量的影响(见表6)
表6 日粮中添加不同比例丹参提取剩余物对肉仔鸡血清MDA含量的影响(nmol/ml)
由表6可知,在日粮中添加0.3%丹参提取剩余物可以降低肉仔鸡21日龄、42日龄血清丙二醛(MDA)含量,但差异不显著(P>0.05);添加 0.5%丹参提取剩余物可以降低肉仔鸡21日龄血清丙二醛(MDA)含量,但差异不显著(P>0.05),可以显著降低42日龄血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05);添加 1.0%丹参提取剩余物可以显著降低肉仔鸡21日龄和42日龄血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05),其中添加 1.0%丹参提取剩余物试验组效果最佳。
目前,关于中草药添加剂对肉仔鸡生产性能的影响研究很多,但关于丹参提取剩余物(包括丹参)对肉仔鸡生产性能影响的研究未见有报道。李笑春等(2011)[5]研究认为,在肉仔鸡日粮中添加中草药添加剂,中草药组与基础日粮组相比,终末平均体重、日增重、采食量、料肉比和死淘率均无显著差异(P>0.05),除料肉比稍高于基础日粮组外,其他指标均优于基础日粮组。贺永康等(2010)[6]研究表明,在肉仔鸡日粮中添加白头翁、黄芪、黄连、党参和大黄等药材组成的中草药添加剂,可促进肉鸡生长,提高生产性能。添加量为1.5%时取得了较好的日增重(ADG)和料重比(F/G),与对照组相比,ADG提高7.38%,F/G降低6.25%。本次试验结果表明,在日粮中添加丹参提取剩余物,肉仔鸡平均日采食量、日增重和料重比与对照组相比差异不显著(P>0.05),但料重比都低于对照组。
正常情况下,机体组织中皆有自由基代谢发生,当自由基产生过多,同时机体清除能力降低时,自由基可造成许多生物分子如蛋白质、核酸的损伤,引起超氧化反应,导致发生细胞结构和功能的损害。机体内存在的可清除自由基、减轻其危害的物质主要是抗氧化酶,包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)等,它们通过各自的作用途径,维持着体内自由基产生和清除的动态平衡。研究表明[3],丹参的主要活性成分(丹参素、丹酚酸和丹参酮ⅡA)都具有一定的清除自由基能力,保护机体免受过氧化损伤。
有很多学者研究了丹参的体外抗氧化活性及其对小鼠抗氧化作用的影响。李欣等(2011)[7]研究认为,丹参总酚酸的含量和抗氧化活性之间具有很高的相关性,表明抗氧化活性可能与酚酸类物质有关。夏鑫华等(2009)[8]研究认为,丹参的活性成分具有很强的体外自由基清除能力,其中4种酚酸化合物清除超氧阴离子的IC50(超氧阴离子清除率为50%时的样品浓度)值大小顺序为:丹参素>咖啡酸>原儿茶醛>丹酚酸B,表明丹酚酸B的作用最强,丹参素钠、原儿茶醛和咖啡酸的作用相近。试验结论为丹酚酸B可能是丹参通过清除氧自由基治疗心血管疾病的重要活性成分。张斌等(2007)[9]研究指出,小鼠分别灌胃给予白花丹参水提物 10、20、40 g/(kg·d),可以不同程度地提高小鼠血液内T-AOC、SOD的活性,提示白花丹参水提物能增强内源性抗氧化酶的活力;能使血液内MDA及ROS不同程度下降,提示白花丹参水提物能显著清除活性氧和抑制脂质过氧化。
本次试验结果表明,在日粮中添加丹参提取剩余物可以提高肉仔鸡血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性,降低丙二醛(MDA)的含量,其中添加比例为1%时作用效果最佳。
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[6]贺永康,赵国先,贺发生,等.中草药对肉鸡生产性能和养分表观消化率的影响[J].饲料研究,2010(6):30-33.
[7]李欣,薛治浦,朱文学.丹参不同部位总酚酸和总黄酮含量分析及其抗氧化活性研究[J].食品科学,2011,32(3):108-111.
[8]夏鑫华,刘梅,张志敏,等.丹参中水溶性成分体外抗氧化活性研究[J].中华中医药学刊,2009,27(5):1085-1087.
[9]张斌,张和平,夏作理.白花丹参对氧化应激小鼠抗氧化系统的影响[J].中成药,2007,29(6):882-883.