249例HBV携带产妇血清和乳汁HBV标志物联合检测结果分析

(开封市医学科学研究所，河南开封 475000)

母婴传播是乙型肝炎病毒传播的重要方式，也是乙肝流行的主要因素［1］。通常认为乙型肝炎是血源性传播疾病，母乳喂养是否增加HBV母婴传播风险，至今尚存争议。2009年10月～2011年8月，我们对249例产妇血清和乳汁免疫学标志物(HBVM)和HBV-DNA进行了联合检测，现分析结果，旨在为阻断HBV母婴传播提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 249例HBV携带者产妇来自2009年10月～2011年8月开封市区及其5县各级医院妇产科住院分娩者，产妇年龄16～41岁。

1.2 相关指标检测 孕妇分别于产前取静脉全血3 mL分离血清;产后3～5天用无菌盐水清洗乳头收集乳汁5 mL;乳汁标本处理参照文献［2］、血清标本处理参照试剂说明书。①HBV-M:采用ELISA法，试剂购自上海科华生物工程有限公司。乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)、乙肝前 S1抗原(Pre-S1Ag)P/N≥2.1 为阳性，e抗体(抗-HBe)和乙肝核心抗体(抗-HBc)P/N≤2.1为阳性(P为检测标本OD值，N为阴性对照OD值);②HBV-DNA检测:采用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR法)。≥5.0×102IU/mL为阳性。试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司。

1.3 统计学方法 采用 SPSS18.0版系统软件处理。阳性率及关联性分析采用χ2检验，P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV-M 249例产妇血清HBV-M有3种阳性模式，在乳汁中又分别存在不同的HBV-M阳性模式。结果见表1。

表1 249例产妇血清与乳汁HBV-M阳性模式

2.2 血清与乳汁Pre-S1Ag的关系 血清、乳汁中Pre-S1Ag阳性分别为106例(占42.57%)、3例(占2.04%)，关联性分析表明二者关系不密切(χ2=4.10，关联系数P=0.127)。结果见表2。

表2 249例产妇血清与乳汁Pre-S1Ag的关系

2.3 血清与乳汁HBV-DNA的关系 249例产妇乳汁HBV-DNA阳性率与血清HBV-DNA载量大致呈正相关，不同血清HBV-DNA载量间乳汁HBV-DNA阳性率差异有统计学意义(χ2=113.48，P＜0.01)。结果见表3。

3 讨论

表3 249例产妇乳汁HBV-DNA阳性率与血清HBV-DNA载量的关系

HBV母婴传播主要有三种途径，即宫内感染(HBV通过胎盘感染胎儿)、产时感染(分娩时胎儿接触母亲血液和羊水而感染)、产后感染(通过母婴密切接触和哺乳而感染)［3］。近年来大量文献报道母乳有传播病毒的可能［3～5］。姚叶珊等［3］认为，母亲为HBV携带者的婴儿出生时乙肝病毒标志物阴性者，母乳喂养3个月后，母亲为大三阳的婴儿有28%发生HBV感染，母亲为小三阳的婴儿有7.8%发生HBV感染。因此，探讨HBV携带产妇血清与乳汁HBV标志物的关系，可能对预防和阻断HBV母婴传播有一定价值。

本研究结果显示，常见的三种血清HBV-M阳性模式在乳汁中分别有不同的表达形式，提示同一产妇个体，其血清与乳汁中HBV标志物可能存在不同的表达模式。本组249例血清HBsAg阳性的产妇，乳汁HBsAg阳性者229例(91.97%)，提示血清HBsAg阳性的产妇，乳汁HBsAg阳性的可能性很大，乳汁中HBV可能主要来源于血清。但155例血清①④⑤阳性产妇中有134例乳汁以①⑤阳性模式表达，且抗-HBe未见表达;3例血清①④⑤阳性和1例血清①⑤阳性的产妇，乳汁HBeAg为阳性，提示乳汁中HBV不仅来源于外周血清，还可能有其它来源途径;亦表明乳汁是HBV排泄的重要途径之一。

Pre-S1Ag是HBsAg外壳蛋白成分之一，近年来被认为是优于HBeAg的免疫学血清标志物［6］。表2显示，249例产妇血清 Pre-S1Ag阳性 106例(42.57%)，高于 HBeAg 阳性率(32.53%)。但乳汁标本Pre-S1Ag阳性仅3例(2.04%)，远低于文献［6］报道的34.5%，其中原因有待探讨。对249例产妇血清与乳汁Pre-S1Ag检测结果进行相关性分析，发现二者关系不密切。提示临床开展血清Pre-S1Ag检测对评价HBV的传染性可能有一定价值，但乳汁Pre-S1Ag检测的临床意义不大。

HBV-DNA是判断HBV复制及传染性最为客观的直接指标。表3结果显示，249例产妇乳汁HBVDNA阳性率与血清HBV-DNA载量水平有关，血清HBV-DNA载量越高，乳汁HBV-DNA阳性的可能性越大，且不同血清HBV-DNA载量者其乳汁HBVDNA阳性率差别有统计学意义。对新生儿而言，产妇血清和乳汁HBV-DNA载量越高，宫内被感染的可能性就越大，母乳喂养被感染的可能性也越大。有文献认为产妇血清HBV-DNA分泌到乳汁中可能具有界面浓度(106copies/mL)［2］，但本组104 例血清HBV-DNA载量为104～5.0×102IU/mL的产妇乳汁标本中有32例HBV-DNA阳性，且在71例血清HBV-DNA载量＜5.0×102IU/mL的产妇乳汁中检出3例HBV-DNA阳性，表明血清HBV-DNA载量较低或阴性的产妇，乳汁仍有分泌HBV-DNA的可能性。

2010年版慢性乙型肝炎防治指南［7］认为，新生儿在出生12 h内注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗后可接受HBsAg阳性母亲的哺乳。但有研究认为，目前应用抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗均仅针对未变异的HBV，且使用效果与患者本身的基因敏感性有关［4］。鉴于孕期注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗并不能完全有效阻断HBV母婴传播，故联合检测和综合分析孕期血清与产后乳汁HBV感染状况可能对有效干预和阻断母婴传播有一定价值。本文纳入样本较少，欲充分显现乳汁HBV标志物检测对于指导母乳喂养及阻断母婴传播的临床价值，还需母乳喂养和人工喂养的婴儿感染率比较研究的大样本数据支持。

［1］王小兰，胡美霞，周世琼.荧光定量PCR检测脐血HBV-DNA与母婴传播的临床研究［J］.中国妇幼保健，2007，22(12):1684-1685.

［2］彭其才，许成芳，藤奔琦.产妇血清HBVDNA含量对乳汁和新生儿血清HBVDNA浓度的影响［J］.中山大学学报(医学科学版)，2010，31(5):729-731.

［3］姚叶珊，邝炎波.乙肝病毒母婴垂直传播分析［J］.现代医院，2006，6(3):58-59.

［4］张合民，王雪霞.接受免疫治疗HBV携带产妇的新生儿HBV感染情况分析［J］.山东医药，2008，48(30):86.

［5］张永亮.慢性乙型肝炎产妇血液、初乳、满月乳HBV载量分析［J］.国际检验医学杂志，2009，30(12):1220-1221.

［6］陈铭，艾彪，何瀚，等.乙型肝炎产妇血清与乳汁HBV标志物检测意义［J］.检验医学与临床，2010，7(6):517-518.

［7］中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指(2010 年版)［J］.临床肝胆病杂志，2011，27(1):1-16.