重庆医科大学附属第一医院输血科(400016) 吕 莉
准确鉴定血型是保障输血安全的最重要的环节。本文分析回顾了2006~2009年本科室接收的15例各类疑难血型鉴定标本,以及因ABO正反定型不符而送检的献血者疑难血型鉴定标本的血型鉴定记录,分析ABO血型定型困难的原因,探讨ABO血型定型困难的解决方法,现报告如下。
1.1 一般资料 2006~2009年本科室收到的各类疑难血型鉴定标本,以及因ABO血型正反定型不符而送检的献血者疑难血型鉴定标本的血型鉴定记录。
1.2 试剂 A、B、O血型的红细胞悬液,抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-A1均由上海血液生物医药有限公司生产。
1.3 方法 ABO血型正反定型、亚型鉴定,吸收放散试验,A、B、H血型物质测定按文献操作[1]。
15例ABO血型定型困难标本中,由抗原方面原因引起的5例,由抗体方面原因引起的9例,由其他原因引起的1例(原因为串钱状假凝集),见表1。
表1 抗原、抗体等原因引起ABO血型定型困难原因[例(%)]
抗原减弱或缺乏3例中白血病2例,贫血1例。2例亚型均为献血员。检出Ig G+Ig M抗体者均为各类患者,且均有输血史、妊娠史。
ABO抗原受控于A、B、H基因,不同个体红细胞膜上表达不同的抗原,形成A、B、O、AB 4种血型。ABO血型系统的共同特点是红细胞上含有某种抗原,血清中就不存在对应的抗体,ABO血型系统正常的型别均符合这种规律,故可根据此规律用血型单克隆抗体检测红细胞上的抗原(正定型),或用标准红细胞检测被检者血清中的抗体(反定型)来判断被检者的血型[2-3]。为保证 ABO血型定型正确,必须做正反定型。本文15例收检标本,均是在ABO正反定型时发现不符而送检确认。
送检的ABO血型定型困难的原因以抗原和抗体方面引起为主。抗原方面引起的原因为抗原减弱或缺乏。健康者抗原减弱最可能的解释是亚型,而患者抗原减弱或缺乏常与疾病相关。报道较多的是白血病引起的抗原减弱或消失[4]。本文检出2例亚型均为献血者,检出3例白血病引起的抗原减弱。对抗原减弱或缺乏的标本,可以通过红细胞与抗-A,抗-B血清吸收放散试验来证实抗原的存在,对分泌型患者可以通过检测唾液中含有的A物质、B物质、H物质进一步证实抗原的存在。亚型的鉴定主要依据红细胞与抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-A1的反应格局以及红细胞与抗-A、抗-B血清吸收前后效价变化,以及吸收抗-A、抗-B后红细胞是否放散出抗-A、抗-B的情况,并对唾液血型物质进行检测来确定。
抗体方面原因引起的ABO血型定型困难主要为冷自身抗体,IgG+IgM抗体,以及抗体减弱或缺乏。由于冷自身抗体存在于健康者和患者中。健康者冷自身抗体效价一般不高,且在4℃以下时才有活性。某些疾病情况下,如淋巴细胞白血病、淋巴瘤或感染、支原体肺炎、链球菌感染均可导致冷自身抗体效价升高[5]。解决强冷自身抗体对ABO定型的影响,最好从采集标本时就注意。将抽取的血液样本注入含抗凝剂的试管内,迅速混匀并立即将试管置于37℃中,这样可以防止冷自身抗体在体外附着到那些用来做血型定型的细胞上,另取一份血样本注入不含抗凝剂的试管中,让此样本在室温或更低温度下凝固,将此试管置于4℃,让冷反应抗体附着到那些细胞上,取此管血清用于反定型[6]。定型前用37℃盐水洗涤红细胞,在4℃、37℃、室温下进行正反定型,并设自身对照,可以得到正确的ABO血型鉴定结果。应注意与细菌污染造成的全凝集相区别,全凝集的细胞没有血型选择性,用加温和洗涤红细胞凝集不能消除[5]。
本文检出的IgG+IgM抗体,均为患者标本,均有输血史、妊娠史,IgG抗体可能为同种抗体或自身抗体。强致敏的红细胞在室温盐水中可能有弱凝集,可利用56℃放散3分钟,移去附着在红细胞上的抗体再进行ABO血型鉴定,可得到正确的ABO定型结果[6]。血清抗体减弱或消失可以通过在4℃反应,并增加抗原抗体反应时间而检出减弱抗体。在排除不规则抗体存在的情况下,采用吸收放散试验可以检出减弱抗体,即用标准红细胞(抗原)在最适温度下(4℃),充分吸收待检血清中的抗体,然后通过放散试验检测出弱抗体。因为吸收放散的过程实际上起到浓缩抗体和抗体粗纯化的作用。吸收放散试验法可以用于检测抗原也可以用于检测抗体,所以在有限条件下,灵活运用吸收放散试验能够准确鉴定 ABO 血型[7-8]。
本文1例串钱状假凝集发现于1例多发性骨髓瘤患者,患者红细胞在电镜下呈串钱状凝集,用生理盐水稀释或洗涤红细胞可使凝集消失。
[1] 中华人民共和国卫生部.中国输血技术手册(血站部分)[M].天津:天津科学技术出版社,1997:60
[2] 安万新.输血检验学[M].大连:大连出版社,2002:90
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