子痫前期胎盘中Endoglin和转化生长因子β1的表达及相关性研究

刘 金 ，梁义娟 ，薛会灵 ，赵 丹 ，吕丽娟

（1.河北大学附属医院 产科，河北保定 071000；2.保定市第一中心医院 产科，河北保定 071000；3.保定市涞源县妇幼保健院，保定 074300）

子痫前期是妊娠期特有的疾病，在妊娠期妇女中发生率约为5%，其严重的并发症是孕产妇及围生儿死亡的重要原因之一[1，2]，目前认为滋养细胞浸润能力下降造成滋养细胞侵入子宫壁过浅和螺旋动脉重塑障碍是子痫前期发生的主要机制。Endoglin是一种整合于细胞膜上的跨膜糖蛋白，是转化生长因子β（transforming growth factor β，TGFβ）受体家族的辅助蛋白质，二者不仅与血管的发育及重塑有关，还与滋养细胞的分化及浸润有关。本研究通过检测子痫前期胎盘组织中Endoglin和TGFβ1的表达，探讨二者在子痫前期发生发展中的作用及其相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

收集2010年10月～2011年10月就诊于河北大学附属医院的子痫前期患者40例作为病例组，年龄 22～31 岁（27.6±3.5 岁），孕周 34～41 周（37.5±1.5 周），诊断标准参照《妇产科学》[3]，其中轻度子痫前期患者15例，重度子痫前期患者25例。另选择同期住院分娩的健康孕妇35例作为正常对照组，年龄 20～33 岁（26.0±3.7 岁），孕周 37～42周（39.0±1.8周）。所有孕妇均为单胎妊娠，既往无慢性高血压、糖尿病、肾炎、心脏病等内科疾病。

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集与试剂来源

胎盘一经娩出，立刻于胎盘母体面取大小约1cm×1cm×1cm组织（无出血、坏死及梗死），0.9%盐水冲净后10%的福尔马林液固定，常规石蜡包埋、切片。TGFβ1兔抗人多克隆抗体及Endoglin鼠抗人CD105单克隆抗体均购自北京天恒博晟科技有限公司。

1.2.2 免疫组化检测TGFβ1和Endoglin的表达

TGFβ1和Endoglin的染色表达操作按说明书进行。结果判定：TGFβ1和Endoglin染色阳性为胞膜或胞质中有棕黄色颗粒。结果应用全自动图像分析仪 （彩色图像细胞免疫组化面积分析法），在同一条件下，对切片的TGFβ1和Endoglin进行定量分析。

1.3 统计学方法

统计学处理应用SPSS16.0统计软件包。多组比较采用完全随机设计的方差分析F检验，组间比较采用两两比较的q检验；相关分析采用简单直线相关。

2 结果

2.1 胎盘组织中TGFβ1表达

TGFβ1阳性表达在胎盘绒毛合体滋养细胞的胞膜和胞浆上。定量分析：轻度组与正常组比较无显著性差异（P＞0.05）；重度组与正常组、轻度组比较均有显著性差异（均P＜0.01），结果见表1。

表1 Endoglin和TGFβ1在子痫前期胎盘组织中的表达情况

2.2 胎盘组织中Endoglin的表达

Endoglin阳性表达在胎盘的合体滋养细胞的细胞膜上。定量分析：轻度组与正常组比较、重度组与正常组比较以及重度组和轻度组比较均存在显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），结果见表 1。

Endoglin的表达水平与TGF β1呈显著正相关（r=0.795，P＜0.05）。

3 讨论

转化生长因子β（transforming growth factor β，TGFβ）超家族包括多潜能的细胞因子和两型受体，可以调节细胞的诸多重要生物学功能，如细胞分化、增殖、运动、凋亡等[4]。Endoglin是分子量为180kD的跨膜糖蛋白分子，主要表达于人血管内皮细胞和胎盘合体滋养细胞的细胞膜上，其内包含丰富的丝/苏氨酸控制区，丝/苏氨酸蛋白激酶系统激活后，进而使下游的转录因子磷酸化，最终启动细胞核内与血管生成有关的转录，参与血管发育和重塑[5～7]。同时Endoglin还作为一种缺氧诱导蛋白，与细胞增殖及NO信号系统有关。Gilbert等[8]通过缺氧建立妊高症孕鼠模型，发现在缺氧的影响下妊高症孕鼠胎盘中Endoglin的表达量明显升高，是正常对照组的2倍，同时正常孕鼠体内也有低量的表达，说明妊娠依赖于Endoglin的正常表达，但当其表达异常时就会引发病理改变。Caniggia等[9]通过体外试验证实，用反义的寡核苷酸或 Endoglin抗体阻断Endoglin的表达后能刺激绒毛外细胞滋养细胞的分化和浸润，说明Endoglin是调节滋养细胞分化侵入的关键的负性调节因子。

子痫前期的病理基础是全身小血管痉挛，内皮细胞受损，引发的一系列病变。有研究显示通过上调TGFβ1的表达，诱导静脉内皮细胞Endoglin的表达，引发血小板粘附、聚集，可促进深静脉血栓形成[10]。我们通过免疫组化方法检测胎盘组织中Endoglin和TGFβ1的表达，发现Endoglin和TGFβ1在正常妊娠胎盘组织中均有较低表达，说明二者对维持正常妊娠有一定作用，子痫前期组与正常妊娠组分布相同但着色明显加深，说明当其表达增高时，对滋养细胞的分化和浸润的负调控作用增强，引起胎盘浅着床及子宫螺旋动脉重铸障碍，参与了子痫前期的发生。同时Endoglin随着子痫前期病情的加重表达明显增强，说明Endoglin的表达情况与疾病的严重程度密切相关。

总之，Endoglin和TGFβ1共同参与了子痫前期的发病，而且Endoglin与疾病严重程度密切相关。可以设想将二者联合起来作为临床子痫前期的监测指标，有效调控Endoglin和TGFβ1的作用通路有望成为预防和治疗子痫前期的新途径。

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