利用胚胎移植技术扩大巴美肉羊核心群数量的研究与应用

王 春 内蒙古巴彦淖尔市家畜改良站 015000

内蒙古巴彦淖尔市广大畜牧科技人员和农牧民经过近40年的不懈努力，在对蒙古羊杂交改良的基础上，引入德国肉用美利奴羊做父本经过级进杂交、横交固定和选育提高三个阶段，最终培育成巴美肉羊新品种。2007年国家农业部第878号公告对巴美肉羊予以正式命名。胚胎移植技术从育种工作开始就被作为重要的育种扩繁技术手段应用于实践中，我们对利用胚胎移植技术扩大育种核心群进行了有益的探索，确定供体间隔5周重复超排的鲜胚移植技术路线，实施人工授精与手术输精不同配种方式采胚效果比较。本文即对巴彦淖尔市巴美肉羊核心群数量扩繁中胚胎移植的技术要点进行了探讨，供大家参考，以发挥高新技术对畜牧产业发展的促进作用。

1 材料

1.1 供体的准备

（1）供体选择

在巴美肉羊育种区内，选择核心群母羊100只，要求体质健壮，营养、生产性能良好，膘情8成以上，无生殖道疾病，没有妊娠，发情周期正常。

（2）供体营养

胚胎移植手术前2个月在保证其他营养平衡的条件下，将供体日粮蛋白质含量提高到30%-35%，并在手术前40天补给硒、维生素A和维生素E。

1.2 受体准备

（1）受体选择

选择健康无疾病、无生殖道疾病、乳房发育良好的经产本地母羊或寒羊做受体，供、受体比例为1：10，在胚胎移植手术前2个月将1000只受体选择好并集中饲养。

（2）受体营养

补饲精料和青干草、苜蓿，使受体日粮蛋白质含量达到20%-25%，加强饲养管理，保证其体重有所增长，膘情达8成以上。

1.3 公羊准备

（1）公羊选定

在巴美肉羊核心群内选择能正常采精的优秀种公羊20只。

（2）选配方案

基本原则是纯种繁育，扩大核心群母羊的群体数量。

（3）公羊饲养管理

专人饲养种公羊，适当加大精料饲喂量，每天补饲2枚鸡蛋、0.5kg胡萝卜。每天上、下午两次运动，每次运动休息半小时后进行采精，并做好精液镜检记录。

1.4 试情公羊准备

按日处理受体羊100只，公、母比例以1：10计，准备试情公羊，即10只试情羊。

1.5 防疫准备

在进入超排、同期发情处理前2个月对所有供体、受体、公羊、试情羊全部按防疫程序进行防疫、驱虫、药浴，并做好相关记录。

1.6 药械准备

做好胚胎移植手术用手术架、显微镜、促卵泡激素、阴道栓等器械药物及其他敷料的准备工作。

2 方法

2.1 第一次胚胎移植方案

（1）2009年8月15日-8月24日每天观察供体羊发情，然后做同期发情处理，放CIDR（阴道栓）每天处理10只，即为1组。供体100只，共分10个组（G1-G10）。

（2）8月17日-8月26日受体羊第一次同期发情处理，肌注0.8mlPG(前列腺素)/只。每天处理100只，总数为 1000 只，共 10 个组，（S1-S10），与供体的10个组相匹配。

（3）8月28日-9月6日供体超排。

（4）8月30日-9月8日受体羊第二次同期发情处理，肌注0.8mL PG(前列腺素)/只。

（5）9月2日-9月11日供体羊配种。前5组供体采用人工授精配种，后5组采用手术法输卵管输精配种。

（6）9月5日-9月14日做移植。采用手术收集供体输卵管内的胚胎，并通过镜检后将合格的胚胎移植到与采胚供体相匹配 （与供体发情同步或提早、推后12小时）受体的输卵管内。

2.2 第二次胚胎移植（重复超排）方案

对第一次超排的100只供体中不宜再作供体的9只淘汰，对其余91只供体，分9组（G1-G9），每组10只（最后一组11只）。在2009年10月15日-10月24日，即上次超排手术采胚后5周进行第二次超排处理。同时相匹配对900只受体进行第二次同期处理，分9个组（S1-S9）。11月4日-11月13日进行采胚移植，移植方案与第一次相同，执行20天超排程序，供体配种采用手术输卵管输精法。

3 结果

3.1 第一次胚胎移植效果（2009年9月5日-9月14日采胚移植）

（1）超排供体100只，其中超排发情、配种、采胚91只，超排反应率91%，有效胚胎率88.0%，平均采有效胚7.65枚/只。

采胚移植效果详见表1、表2。

表1：第一次采胚效果

同期发情处理受体1000只，同期发情反应率85.2%，手术受体羊利用率97.8%（黄体发育好，能移植），受体全部移植单胚，妊娠率58.6%。

（2）配种方式不同采胚效果比较，详见表3。

人工授精45只供体，采有效胚301枚，只均6.69枚，有93枚未受精卵；手术输卵管输精46只供体，采有效胚 395枚，只均 8.59枚，有 2枚未受精卵。两组采有效胚相比（P＜0.01），差异极显著。

表3：配种方式不同采胚效果比较

3.2 第二次胚胎移植效果（11月4日-11月13日采胚移植）

结果见表4、表5。

表4：第二次超排采胚效果

表5：第二次超排移植效果

4 讨论

4.1 配种方式的影响

人工授精配种有效胚胎率74.6%，有未受精卵；手术输卵管输精配种有效胚胎率95%以上，几乎无未受精卵。两种配种法只均有效胚分别为6.69和8.59枚，有明显差异。这两种方式用于供体配种，后者明显优于前者，并且手术输卵管输精仅需1次配种(人工授精配种需4-5次)，可以大量减少劳动量，降低劳动强度，又可以减少种公羊的数量。

4.2 重复超排效果

从表3与表4对比可以看出，用同样的方法对供体在第一次采胚手术后间隔5周进行重复超排，平均采有效胚第一次8.59枚/只，第二次8.6枚/只，差异不显著（P>0.05），且效果很好。当然重复超排与超排处理技术、手术技巧及术后护理有很大的关系，否则会造成供体丧失繁殖能力。

4.3 同期发情效果比较

同样的同期发情方法，供、受体第一次同期发情反应率为91%、85.2%，第二次同期处理为98.9%、86.2%，差异不显著（P>0.05）。

4.4 移植受胎效果比较

两次超排采胚移植妊娠率分别为第一次58.6%，第二次60.1%，受胎效果差异不显著 （P>0.05）。

5 结论

（1）利用胚胎移植技术扩大巴美肉羊育种核心群数量，可以采用在手术采胚后间隔5周重复超排，再令其自然怀孕恢复生产能力，可加快核心群扩群速度，推动育种进程。

（2）人工授精与手术输卵管输精两种配种方法供体排卵受精率有明显差异，前者76.4%，后者达95%以上。并且采用手术输卵管输精既可以减少种公羊使用数量，又可以大大降低工作人员的劳动强度，很值得推广。