吡格列酮对自发性高血压大鼠及合并糖尿病的降压作用研究

高 云

吡格列酮近年来已取代罗格列酮作为2型糖尿病的主要治疗药物，原发性高血压人群中约60%伴随胰岛素抵抗。在高脂喂养的SD大鼠中发现吡格列酮不仅可以降低血压，而且可以减少肾脏的氧化应激［1］，在肾素、血管紧张素原转基因小鼠［2］、一肾一夹大鼠［3］、注射血管紧张素Ⅱ大鼠［4］等与胰岛素抵抗关系不大的高血压动物模型中，也报道了噻唑烷二酮类（TZDs）的降血压效应。但在SHR－SP（stroke－prone）的大鼠中没有发现吡格列酮有降压和改善氧化应激的作用［5］。本研究分析自发性高血压大鼠（SHR）以及高糖高脂诱导的胰岛素抵抗SHR中吡格列酮是否具有降压作用，并解释其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 吡格列酮为葛兰素史克公司（天津）产品，果糖购自北京广联行化工产品有限公司，大鼠胰岛素酶联免疫试剂盒购自上海西塘生物制品有限公司。超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 实验动物 清洁级SHR，雄性，32只，8周龄，体重200g，同龄WKY大鼠16只，体重200g。每笼4只～5只，温度（22±2）℃，光照12h／24h。适应1周后用于实验。

1.3 分组及给药方法 SHR中随机挑出16只给予高脂饮食，同时饮用12%果糖水，其余正常饮食＋清洁水，高脂8周后胰岛素抵抗模型建立成功。然后将高脂SHR和正常饮食SHR均随机分为两组，一组用采用灌胃法给予吡格列酮治疗，另一组不做处理；WKY也随机分为两组，每组8只，一组给予吡格列酮，一组不做处理，给药10周，吡格列酮剂量均为10mg／（kg·d）。

1.4 胰岛素抵抗模型建立指标 高脂高糖喂养8周后，SHR体重明显增加，空腹血糖明显升高，测得空腹胰岛素＞正常对照的2倍，三酰甘油（TG）＞1.8mmol／L，收缩压（SBP）均为150 mmHg以上，糖耐量明显受损。

1.5 仪器与设备 微量血糖仪及血糖试纸（美国罗氏），Eppendorf低温高速离心机，Beckman－700全自动生化仪，RBP－I大鼠尾动脉血压计。

1.6 实验方法

1.6.1 血样采集及检测 实验结束后，将大鼠双侧眼球摘除，收集血样，4℃离心，3 000／min，离心15min，取上清，在Beckman－700全自动生化分析仪上进行血糖、血脂检测。

1.6.2 血压测量方法 采用RBP－I大鼠尾动脉血压计，每周测血压1次，每次测3遍，取其平均值记录在案，分别在给药前、给药1周～10周每周相同时间内各测压1次。

1.6.3 糖耐量检测 动物禁食12h后，断尾采血，先测空腹血糖，葡萄糖用量1g／kg，注射葡萄糖后，测30min，60min，90 min，120min的血糖值，注意采血时动作要轻柔，避免应激。

1.7 统计学处理 数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS 16.0统计软件处理，采用单因素方差分析。

2 结 果

2.1 胰岛素抵抗SHR模型的建立 高糖高脂喂养8周后，SHR体重显著增加，空腹血糖（FBG）和空腹胰岛素（FINS）水平显著升高，TG和SBP等指标均达到成模标准，高糖高脂喂养的SHR大鼠糖耐量明显受损，胰岛素抵抗动物模型建立成功。详见表1。

表1 高脂高糖喂养前后SHR各项指标比较（x±s）

2.2 吡格列酮对WKY、SHR及HF－SHR大鼠收缩压的影响吡格列酮治疗10周后，WKY治疗与未治疗两组之间血压无明显差异；SHR与SHR＋吡格列酮组血压亦无统计学意义；HF－SHR＋吡格列酮组血压明显降低（P＜0.01）。详见表2。

表2 吡格列酮对WKY、SHR及HF－SHR收缩压的影响（x±s） mmHg

2.3 吡格列酮对SHR、HF－SHR各项检测指标的影响 吡格列酮治疗10周后，SHR组、HF－SHR组与未治疗的对照组相比体重均显著增加。SHR组的FBG、FINS、TG、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）无明显变化，HF－SHR＋吡格列酮组的FBG、FINS和 TG明显降低（P＜0.05），LDL、HDL无明显差异。详见表3。

表3 吡格列酮对SHR、HF－SHR大鼠各项指标的影响（x±s）

2.4 吡格列酮对SHR、HF－SHR肾脏组织等指标的影响SHR＋吡格列酮组与SHR组相比，SOD、GSH－Px活性和MDA的含量没有明显差异。HF－SHR＋吡格列酮大鼠肾脏GSH－Px活性和MDA的含量与治疗组有明显差异，但是SOD含量没有明显差异。详见表4。

表4 吡格列酮治疗对SHR、HF－SHR大鼠肾组织SOD、GSH－Px活性和MDA含量的影响（x±s）

3 讨 论

本研究发现，吡格列酮治疗10周后，可以显著降低HF－SHR大鼠的收缩压，并且可以减少肾脏氧化应激程度，吡格列酮治疗后的HF－SHR大鼠肾脏GSH－Px活性明显增加，MDA含量降低。而GSH－Px是机体抗过氧化能力指标之一，Shinzato等［6］在原发性高血压易卒中SHR－SP模型中发现，吡格列酮治疗逆转了高血压左心室向心性肥厚的症状，但没有降低血压或减少氧化应激反应［5］。本文对正常饮食的SHR经吡格列酮治疗10周后也没有发现明显的降压作用。但是，高糖高脂喂养的SHR，吡格列酮却显著降低了血压，并减少了肾脏的氧化应激程度。经吡格列酮治疗后SHR体重明显增加，与国外文献一致［1，7］，但其具体机制有待进一步研究。

吡格列酮属于TZDs类胰岛素增敏剂，作用靶点是过氧化物酶体增殖因子活化受体（PPARγ）［8］。吡格列酮通过选择性地激动PPARγ，调节一大类参与葡萄糖生成、转运、利用以及与脂肪酸代谢、胰岛素反应性基因的转录［9］，并增加外周组织葡萄糖转运子对葡萄糖的摄取和转运，从而可提高胰岛素的敏感性，改善胰岛素抵抗和高胰岛素血症［10］。胰岛素升高可以引起肾小管重吸收钠增加，使体内总钠增加，导致细胞外液容量增多，机体为维持钠平衡，通过提高肾小球灌注压促进尿液排泄，导致高血压；胰岛素还可以通过增强交感神经活性，促进肾小管钠的重吸收，提高心输出量和外周血管阻力；还可以使血管壁增厚，血管腔变窄，使外周血管阻力增加而导致血压升高。因此，吡格列酮的降压作用主要是通过改善高胰岛素血症、调节胰岛素功能从而使血压降低，对自发性高血压没有明显的降压作用。

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