EGFR及Ki-67在非小细胞肺癌患者中的表达及意义

黄国胜

随着分子生物学的发展，生长因子及其受体在指导肺癌的治疗和判断患者的预后中发挥了重要的作用。我们应用免疫组化法对非小细胞肺癌患者组织中的表皮生长因子受体(EGFR)和Ki-67进行检测，以研究它们在肺癌组织中的表达及其意义。

1 资料与方法

1.1资料 收集我院2011年58例非小细胞肺癌手术患者的组织标本，男32例，女26例，年龄42～65岁;其中鳞癌22例，腺癌36例;Ⅲ期7例，Ⅳ期51例;有淋巴结转移42例，无淋巴结转移16例。

1.2方法 对肿瘤蜡块切片，进行免疫组化染色。应用二甲苯、乙醇脱蜡水化;3%双氧水封闭内源性酶，漂洗5 min后再用PBS漂洗15 min。抗原修复:将切片置于pH值为6的柠檬酸盐缓冲液中，微波加热至95℃，Ki-67修复30 min，EGFR修复5 min，自然冷却至室温，PBS缓冲液漂洗;用浓度为5%的小牛血清封闭内源性酶，加抗EGFR及抗Ki-67，在37℃环境中湿盒培育1 h，PBS漂洗;最后用Zymed系统检测后进行DAB显色。

1.3结果判定 EGFR按阳性细胞所占的百分比分级:阴性为(-)，阳性 ＜30%为(+)，30% ～50%为(++)，50% ～75%为(+++)，＞75%为(++++)，对应分值为0～4分。Ki-67根据阳性肿瘤细胞的百分比分级，阴性为(-)，阳性 ＜25%为(+)，25% ～50%为(++)，50% ～75%为(+++)，＞75%为(++++)，对应分值分别为0～4分。

1.4统计学处理 采用SPSS 11.0软件进行统计学分析，计数资料行χ2检验。

2 结果

2.1EGFR及Ki-67在肺癌组织中的表达 EGFR及Ki-67(见后插页图)在肺癌组织中表达的阳性率分别为60.34%和89.66%，与正常组织的阳性率分别为0和5.56%，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 EGFR及Ki-67在肺癌组织及肺部正常组织中的表达

3.2EGFR及Ki-67在肺癌组织中的阳性共表达情况，Ki-67与EGFR之间有明显相关性(P＜0.05)。见表2。

表2 EGFR及Ki-67在肺癌组织中的阳性共表达情况

图1 Ki-67在中分化鳞癌中的高表达(S-P×200)

图2 EGFR在肺鳞癌细胞膜、细胞质中表达(S-P×200)

3 讨论

表皮生长因子受体(EGFR)是一种跨膜蛋白，含有118个氨基酸，细胞外的配体结合区含621个氨基酸，配体结合位点主要在294～543位氨基酸之间［1］。研究表明，Ki-67的表达科准确反映肿瘤细胞的增殖率，与多种肿瘤的发展、转移、预后有关［2］。本研究显示，Ki-67在肺癌组织中阳性表达率为89.66%，而且在低分化腺癌组织中的表达较在中高分化腺癌组织的表达明显升高，这表明Ki67染色阳性程度与组织学分期有一定的相关性，故Ki-67的检测可作为判断NSCLC预后的一种指标。

肿瘤的形成和发展是跟多因素、多基因相关，Ki-67与EGFR呈正相关，说明两者在肿瘤的发生、发展过程中有一定的协同作用，其机制可能是EGFR的酪氨酸激酶活性使细胞内酪氨酸残基的磷酸化引起多种效应，包括蛋白激酶活化，蛋白质和DNA合成增加，导致细胞增殖［3］。分子靶向治疗在肿瘤的治疗中显现出疗效确切、安全性好的优势，采用免疫组化法检测肺癌中的多种生物指标可为临床提供重要信息，并为肺癌患者接受分子靶向治疗提供理论依据，而且简易可行，值得临床推广使用。

［1］LAX I，BURGESS W H，BELLOT F.Localization of amajor receptor binding domain for epidermal growthfactor by affinity labeling.Mol Cell Biol，2008，8(4):1831-1834.

［2］Yang SX，He witt SM，Steinberg SM，et al.Expression levels ofe IF4E，VEGF，and cyclin D1，and correlation of eIF4E with VEGF and cyclin D1 in multitum or tissue microarray.Oncol Rep，2008，17(2):281-287.

［3］田韧，龚涌灵，杨劲松，等.胰腺癌组织中肿瘤生长因子-α和表皮生长因子受体的表达与胰周神经侵犯的相关性研究.医学研究生学报，2006，19(12):1105-1106.