提高微生物检验培养基质量的相关研究

张袁媛

摘 要:培养基是微生物检验中不可或缺的关键部分,培养基质量的优劣直接影响整个微生物检验的质量。现阶段,由于我国在微生物检验培养基的质量方面还没有形成一个较为统一的标准,这在一定程度上影响了检验结果的可靠性和准确性。为此,必须采取有效的措施提高培养基的质量,进而确保微生物检测质量。基于此点,本文就提高微生物检验培养基质量的相关研究进行浅谈。

关键词:微生物检验培养基质量配制

中图分类号:TS207.4 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2012)07(c)-0001-01

1 提高检验人员综合素质

微生物检验培养基质量与检验人员的素质息息相关,并对其素质提出了高要求。首先,检验人员必须接受过微生物检验方面的专业基础教育,具备全面的理论知识和实践技能,拥有较强的主观判断分析能力,在岗前培训合格的基础上方可上岗操作;其次,检验人员应当定期参加培训、进修学习、学术交流等活动,积极学习质量保证体系、计量学等与微生物检验相关的学科领域知识,不断更新自身的知识体系。检验人员还应当掌握国家最新的微生物检验方法和标准,参与编制检测程序和仪器操作程序,参与各类盲样测试和水平测试,增强实验室的检测能力,以满足微生物检测对检验人员提出的高要求;再次,应强化实验室内部管理,落实定期考核制度,实验室主管人员应对检验人员的知识水平、检验技能和标准熟练程度进行全面考核,结合检验人员的工作态度和工作责任感考评,将其作为评价检验人员综合素质的重要依据。

2 严把培养基的购入关和验收关

在培养基的购入阶段,应确保微生物检验中所使用的干粉培养基、试剂和药物等,必须优选专业、诚信、服务优质的生产厂家作为供应商。在确认该生产厂家通过了质量管理体系认证的基础上购入培养基,认真检测商品质量,使其符合国家规定的质量标准。此外,培养基还应当具备齐全的信息资料,如培养基的生产编号、具体名称、成分清单、储存条件、使用前的pH值、有效期等,以便于使用培养基时能够准确记录数据、比较分析数据;在培养基的验收阶段,实验室应当配备专人检验商品质量,认真核对生产厂家的相关商品资料信息,查看培养基的规格数量、生产批号、商品名称、保质期、外观质感是否在标准范围内。检验验收人员必须对每一批次的商品均进行严格的培养基质量检测工作,严禁未经验收合格的培养基进入实验室中使用。

3 提高培养基的配制质量

在进行培养基配制的过程中,为了有效地提高培养基的质量,应采取如下措施:其一,必须使用清洁、干净的玻璃容器作为培养基配制容器,严禁使用金属类容器,并确保玻璃容器的体积应大于复水后培养基体积的2倍以上。在培养基水化时为了防止离子混入培养基中,应当杜绝使用铁锅或铜锅,以确保微生物正常生长。同时,若使用新玻璃瓶,应防止其在加热的过程中产生碱性物质,从而导致培养基的pH值变化;其二,培养基的配制用水应尽可能选择蒸馏水或是符合要求的水,这样有助于排除测试条件下影响及抑制微生物生长的物质。严禁使用受污染的去离子水和自来水,其原因在于即使去离子水经过除菌过滤,也必然含有影响微生物生长的物质,而自来水中含有抗菌物质,如氯等。在进行培养基水化时,应当在玻璃容器中逐渐加入1/3的水量,经过震摇后,继续加入剩余水量,利用水的冲力将附着于玻璃容器壁的培养基粉冲入水中;其三,培养基称重时必须使用专用角匙,以防止因交叉污染而造成检验结果不准确。由于培养基具有易潮性,在吸潮后会导致其自身酸化,从而对培养基的pH值产生影响,所以应选择在湿度较低的实验室取培养基进行称重。称重时切忌不能吸入粉末,尤其是选择性培养基,干粉培养基必须遵循生产厂家的说明资料进行准确配置;其四,当培养基完全溶解冷却之后,应当对其进行pH值测定,如有必要时可做适当调整。通常情况下,使用个别成分制备而成的培养基,除有特殊要求外,培养基经过灭菌处理以后并冷却至25℃时,其pH值的变化范围不允许超过0.2个单位。在进行调整时,可采用浓度为40g/L的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L的盐酸溶液;其五,如果对试验结果有所怀疑时,那么可以在相同的条件下,对新旧批号的培养基进行同时试验比对,以此来找出原因;其六,对于一些生化鉴定中常用的培养基以及用于选择性鉴定的培养基,必须严格遵照规定的方法进行配制,以确保培养基质量符合相关标准的要求。同时,在培养基配置完成后,应对其外观进行检查,看培养基的颜色是否正常,若是液体培养基应检查其是否澄清,有无沉淀及浑浊。

4 做好培养基的灭菌和保存

培养基在配制完成后,必须严格按照相关标准要求的温度和时间对其进行灭菌处理,应尽可能做到既确保灭菌效果又不损伤培养基的有效成分。需要注意的是,采用的灭菌程序应经过严格的化学及生物验证。培养基在经过灭菌处理以后,斜面固体类的培养基应当摆放成斜面,其长度应控制在试管长度的1/2处左右;如果配制的是半固体状培养基,那么应使其垂直并冷凝成半固体状的深层琼脂,当培养基完全凝固以后,应在试管上注明培养基的配制日期及名称,然后将其放置在避光、干燥及冷藏处进行保存待用。除有标准规定及特殊要求外,一般的基础营养培养基可存放在4℃的冰箱内,保存的最长期限不得超过90天,若是在温度为20℃以下的室内,最长保存期限不得超过30天,这样能够确保培养基的成分不发生改变。此外,对于生化鉴定及选择性分离鉴定这两种培养基,必须严格遵照产品说明进行使用,如无特殊情况,应尽量当天配制当天使用,在避光、冷藏处最长保存时间不得超过3天。

5 结语

总而言之,微生物检验是一项较为复杂且系统的工作,影响检验结果的因素相对较多,其中培养基的质量所占的比重最大。为了能够进一步提高微生物的检验质量,要求检验人员应采取积极有效地措施,不断提高培养基的整体质量。只有这样,才能真正确保微生物检测结果的可靠性和准确性。

参考文献

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