郝永娟 霍建飞 高苇 刘春艳 王勇
摘要:采用抑菌圈法和含毒介质法测定几种杀菌剂对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病的抑制作用。结果表明,抑菌效果较好的为农用链霉素、新植霉素和水合霉素;丙森锌对黄瓜细菌性斑点病较好,而对大白菜软腐病则较差;氢氧化铜、噻菌铜及中生菌素抑制作用一般;春雷霉素抑菌活性较差。
关键词:杀菌剂;防治; 黄瓜细菌性斑点病;大白菜软腐病
中图分类号: S642.2 文献标识码: A DOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2012.06.022
黄瓜细菌性斑点病又称黄瓜细菌性角斑病,是黄瓜生产中危害较重的一种病害,以保护地受害最重,相对湿度在80%以上,叶面有水膜时极易发病,属低温、高湿病害。昼夜温差大、结露重且时间长时发病重。大白菜软腐病是一种重要的细菌性病害,在全国各地均有发生,对于生长期和储藏期的大白菜都能造成危害,严重影响大白菜的产量与品质。在适宜的环境条件下,可造成大白菜减产50%以上,甚至绝收。这两种病害是目前天津地区蔬菜生产上发病频繁、危害严重的细菌性病害。及时控制病害的发展,筛选有效的防治药剂,对指导生产具有重要意义。当前防治细菌性病害以抗生素和铜制剂为主,笔者选用了几种常见药剂对黄瓜细菌性斑点病原菌及大白菜软腐病菌进行了室内抑菌测定,以为田间防治细菌性病害提供科学依据。
1材料和方法
1.1材 料
供试菌株:黄瓜细菌性斑点病(Pseudomonas syringaepv. Lachrymans);大白菜软腐病(Erwinia carotovora subsp. carotovora),均为天津市植物保护研究所蔬菜病害室分离保存,具中等致病力的菌株。
供试药剂:72%农用链霉素WP(石家庄曙光制药厂);88%水合霉素SP(成都普惠生物工程有限公司);90%新植霉素(石家庄曙光制药厂);53.8%可杀得(有效成分为氢氧化铜)干悬浮剂(美国杜邦公司);3%克菌康(有效成分为中生菌素)WP(厦门凯立生物制品有限公司);20%龙克菌(有效成分为噻菌铜)悬浮剂(浙江龙湾化工有限公司);70%丙森锌WP(拜耳作物科学公司);6%春雷霉素WP(兴农药业上海有限公司)。
1.2方法
采用抑菌圈法测定, 供试黄瓜细菌性斑点病菌株及大白菜软腐病菌株在LB平板上培养12 h,长满平皿后采用倍量稀释法将菌液稀释为108 cfu·mL-1。将灭菌的培养皿内加入45 ℃左右的LB培养基10 mL,自然冷却、凝固后,用微量移液枪加入500 μL菌液,用L型灭菌玻棒涂抹均匀。将参试药剂分别稀释5个浓度梯度,放入直径5 mm的灭菌纸碟,吸取药液后放入平板上,每皿3个,每个浓度3皿重复,以吸附无菌水作空白对照。置于28 ℃的恒温培养箱内,培养24 h后调查抑菌圈的大小,比较不同药剂的抑菌效果。
采用含毒介质法中的最低抑制浓度法测定,每种药剂选5个浓度进行多次测定,求抑菌最低有效浓度。将配置的系列药液浓度4 mL分别与定量36 mL LB培养基混合,充分摇匀后倒入3个平皿(直径9 mm)内,待其凝固后用接种环挑取少许培养好的菌苔,在含药培养基上划线, 置于28 ℃下培养2 d后,检查细菌生长情况,每种浓度重复3次,计算抑菌最低有效浓度,并以无菌水作空白对照。在培养基平板上有细菌生长的, 用“+”表示,该浓度就用“C+”表示;无细菌生长或接菌点干缩者为抑制生长,用“-”表示,该浓度就用“C-”表示。计算方法:每种药剂设5个浓度,根据公式C′=(C++C-)/2,求出抑菌最低有效浓度C′,再求该药剂3次重复试验的平均值C= (C′1+C′2+C′3)/3, 该平均值即为该药剂的抑菌最低有效浓度。
2结果与分析
2.1 药剂对病菌的抑制作用
3结论与讨论
参试的8种药剂对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病菌均表现出不同程度的抑制效果。综合抑菌圈法和含毒介质法,农用链霉素、新植霉素、水合霉素效果均很好;丙森锌对黄瓜细菌性斑点病菌表现较好的抑菌效果,而对于大白菜软腐病菌的抑制作用较差;氢氧化铜、噻菌铜、中生菌素及春雷霉素有一定的抑菌活性。
黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病是蔬菜生产中最主要的细菌性病害,分别为丁香假单胞菌和软腐欧文氏菌引起的。农用链霉素是防治多种细菌病害的抗生素类药剂,对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病同样有很好的治疗效果。新植霉素为农用链霉素和土霉素的混剂,集合两种抗生素的抑菌位点,抑菌作用较好;水合霉素可以阻断菌体蛋白质的合成和DNA的复制,对细菌有较好的杀灭作用,对长期使用农用链霉素产生抗性的病菌作用更好。丙森锌是具广谱作用的杀菌剂,具有保护作用,在发病前应用效果较好;春雷霉素是杀菌谱较广的抗生素,对多种真菌和细菌均有抑制作用;中生菌素对细菌具有很强的触杀作用,对植物渗透性强,但不内吸,因而具有很好的保护作用。氢氧化铜即可杀得为无机铜的杀菌剂,可杀得是一种极细微的可湿性粉剂,呈多孔针形晶体,在单位质量上所具有的颗粒最多,比其它铜制剂更能释放出大量的可杀菌的二价铜离子。噻菌铜为噻唑类有机铜杀菌剂,集噻唑基团及二价铜离子的双重杀菌作用,对多种细菌病害均有较好的抑制作用。
本试验仅是几种药剂在离体条件下对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病病菌的相对抑制效果,具体评价应进行药剂的毒力测定和杀菌剂在植株上的防治效果试验。参试的8种药剂均为市场上广泛应用的药剂,抗生素类药剂在生产应用时应注意使用次数及浓度,避免抗药性的产生及对人畜的安全;无机铜类杀菌剂应避免高浓度药害的发生。
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