昆明犬的精液品质分析

万九生，杜晓鹏，徐 虎，毛爱国，黎立光

(公安部昆明警犬基地，云南 昆明650204)

昆明犬(Kunming Dog) 作为我国独立自主培育的唯一工作犬品种，经过50 多年的培育历程，最终由公安部昆明警犬基地培育定型，并于2007年5月通过了国家畜禽遗传资源委员会的审定，成为国家级畜禽新品种。目前，昆明犬因其独特的嗅觉灵敏、扑咬凶猛、猎取欲强、驰骋持久、机警灵活、易于训练、适应性强、忠实主人等优势，已在全国各地公安机关和工作犬系统全面推广应用。有近10 个国家和地区引进昆明犬。

昆明犬的育成填补了我国工作犬品种培育的空白，在昆明犬种质特性、训练使用、犬病防治和犯罪育种等方面已开展了深入研究，但有关昆明犬人工授精及精液品质分析的研究相关报道很少。为了更好地开发利用昆明犬这一“国宝级”犬种，本文对昆明犬核心种犬群的昆明犬精液进行了系统分析，以期为昆明犬种质特性深入研究积累基础资料，为犬的人工授精及产业化发展研究提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 时间和地点

试验于2009年7月至2010年5月，在云南昆明公安部昆明警犬基地进行。

1.2 试验材料

1.2.1 试验动物

试验犬为公安部昆明警犬基地昆明犬核心群，2 ～11 岁，繁殖机能正常，体质健康的种公犬。饲养管理严格按警犬饲养管理操作规程进行。

1.2.2 试验动物的营养和管理

采用全价颗粒饲料进行定时、定量饲喂。保持犬舍内卫生清洁，做到定期消毒，定期用药驱虫与接种疫苗等严格的防疫制度，坚持每天梳理犬体被毛，散放运动不少于2 h等日常管理。

1.2.3 试验器材

犬精子质量检测系统为北京伟力WLJY9000 型; 低温温度仪为北京市宇时技术开发公司生产; 恒温水浴锅、高压蒸汽灭菌器、定时器、细胞计数器为上海医疗器械厂生产; 超净台，苏州净化设备公司生产;移液器、超速离心机 为Eppendor; 混匀器，姜堰市新康医疗器械公司生产; 电子天平为美国双杰公司生产。

1.3 试验方法与设计

1.3.1 采精场地的选择

采精应在良好的环境条件下进行，且采精场所要固定，以利于公犬形成稳定的性条件反射，并能避免精液污染。室外采精场地要求宽敞、平坦、安静、清洁、避风，室内采精场地要求宽敞明亮、地面平坦防滑。

1.3.2 采精前的准备

采精员先以温和的语调呼唤犬名，并抚拍犬体以消除由于和人不熟悉而产生的恐惧。对于凶猛性较强且有攻击欲望的犬，应让饲养员先用口笼或者绷带缠好犬嘴，以防止事故发生。为了减少精液液污染，采精前，用温水及0.1%高锰酸钾液擦洗公犬的阴部及其周围，用无菌生理盐水清洗包皮腔内积尿及其它污物，并擦干，以避免皮屑及毛等污物对精液的污染。同时，对公犬阴茎部刺激，也是给种公犬采精提前的预示。对采精场地、采精器械等严格消毒。

1.3.3 精液采集方法

精液采集均采用手握按摩采精法。采精时手戴医用乳胶手套，在有发情母犬直接诱导的情况下，公犬的阴茎在无需按摩的情况下就会充分勃起。待公犬爬跨在母犬背部时，用右手拇指和食指握住公犬阴茎球状膨大体的后端，约1 ～5 min，公犬开始射精，左手持离心管进行收集，结束后要用纱布盖好离心管口，以防止杂质进入。调教好的公犬，不需要进行诱导，采精员蹲于公犬左侧，左手握集精杯，用右手戴灭菌乳胶手套握住公犬的阴茎，同时模仿母犬交配时阴道收缩对公犬阴茎球体的挤压力，给阴茎球体适当施加一松一紧呈节奏性垂直向内的压力，并做前后按摩。当阴茎充分勃起，尤其是球体部膨大后，将阴茎引向侧面或后腹两腿间朝下，经10 s左右公犬即产生抽动，开始射精，这时采精员另一只手持集精杯收集精液。公犬开始射精后，采精员给阴茎球体的压力稍加大些，节奏放慢些，且此时不必做前后按摩。

1.3.4 测定指标

用高精度离心管测量射精量，使用伟力WLJY9000 型彩色精液质量检测系统观察精子的云雾状，检测精子密度、活率、活力和精子的动态参数(a 级精子、b 级精子、c 级精子和d 级精子) 。

1.4 数据处理

采用Excel-2003 软件进行数据处理，运用SAS 数据统计软件进行卡方检验(x2) 作显著性分析和多重比较。数据以平均值±标准误表示。

2 结果与分析

2.1 分段精液品质测定

采用手握按摩采精法采集2 ～8 岁的狼青4 头、草黄4 头、黑背4 头共12 头昆明犬种公犬(已适应手握按摩采精法的种公犬) 的精液，分别测得分段精液和混合精液射精量、活力和精子密度。从表1 看出，犬的射精量第2 段与第3 段基本接近，且均高于第1 段。

表1 昆明犬分段及混合精液品质检查(n=12)

2.2 昆明犬采精适应程度

对经历过发情母犬诱导采精的40 头昆明犬种公犬直接使用手握法进行采精。犬的适应情况见表2。

表2 应用手握按摩采精法采集昆明犬精液适应情况

由表2 可以看出，40 头公犬在经过一次采精调教后，有36 头采集到了精液，占总数的90%(36/40) ，其中仅有5 头采集到精液量少，占总数的12.5%(5/40) ; 未采集到精液犬数为4 头，占总数的10%(4/40) 。

2.3 昆明犬精液品质

采用手握按摩采精法采集24 头昆明犬种公犬精液，收集第2 段精液和少量第3 段精液，进行检测，结果见表3。

表3 昆明犬精液品质特性

通过观测昆明犬公犬精液呈乳白色，个别淡红色。由于昆明犬精液密度大，精子活力高，大部分具有明显的云雾状。据表3，昆明犬公犬平均每次采精量5.51 ±2.24 mL，变异系数为40.65%; 平均精子密度为3.71± 2.82/mL，平均精子活力为83.78 ±13.29%。由此可以看出，精子密度在每次采精中变化很大，采精量次之，精子活力变化较小。

2.4 昆明犬品系间精液品质比较

从表4 可知，昆明犬品系间，每次的采精量狼青品系(6.28 ±3.53) mL和草黄品系(5.81 ±2.24) mL采精量显著高于黑背品系(3.48 ±2.71) mL采精量; a +b 级精子含量狼青品系为(92.26 ±6.01) %显著高于草黄品系 的(85.77 ± 5.56) % 和黑背品系的(80.19 ±8.64) %; 而精子密度、精子活力和精子活率3 个品系间差异均不显著。

表4 昆明犬品系间精液品质特性比较

3 讨论

3.1 采精方法

本试验应用手握按摩法对40 头昆明犬采精，采精的成功率达到90.0%，表明昆明犬公犬精液容易采集，且适宜用手握按摩采精法。

3.2 采精量

昆明犬公犬的平均采精量(5.51 ±2.24)mL，平均精子密度为(3.71 ±2.82) ×108个/mL，平均精子活力为(83.78 ±13.29) %，同有关资料报道犬的平均采精量(2.05 ～7.52) mL 相当［1～3］。昆明犬平均精子活力高于德国牧羊犬(60 ± 22) % 和藏獒(70 ±5) %［3］，说明昆明犬在精液生产能力上较好。

3.3 其他因素

在试验过程中，我们发现采精人员、采精环境、气候、不同的采精时段等因素都对犬的精液质量有一定的影响，这些因素的影响程度有待于作进一步研究。本次试验时间仓促、试验量大，还有一些相关的试验未能完成，比如昆明犬精液的pH 值测定。

4 结论

本研究表明，昆明犬精液各项指标均符合精液冷冻保存、人工授精等的使用要求。说明昆明犬具有较好的繁殖能力，开展人工授精和产业化发展研究是可行的。同时，本研究结果，可用于指导昆明犬精液冷冻、保存及人工授精中精液的选择，可为昆明犬后备种犬选留、淘汰、繁殖性能和饲养管理的相关研究提供可靠依据。

［1］万九生，杜晓鹏，曹景锋，等.狼种犬的精液采集技巧［J］.养犬杂志，2004，2: 22-24

［2］禹学礼，庞有志，栗颖华，等.犬精液冷冻与人工授精的进展［J］.洛阳农业报，1999，2: 19-23.

［3］万九生，黎立光，彭建国，等.手握按摩采精法在犬精液采集中的效果观察［J］.养殖技术顾问，2008，9: 33-34.

［4］万九生，强京宁，黎立光，等.昆明犬成熟精子超微结构的研究［J］.中国工作犬业，2007，10: 10-13.

［5］冯登侦，张九雄.阿拉善绒山羊精液品质的分析［J］.黑龙江畜牧兽医，2005，2: 25-26.

［6］万九生，杜晓鹏，曹景锋，等.炸熏法制作犬颗粒冷冻精液［J］.中国工作犬业，2004，11: 22-23.

［7］李细牯，宋兴国，万九生，等.犬颗粒冻精生产中细菌污染及控制措施的研究［J］.四川畜牧兽医，10: 14-16.

［8］熊前，方乐民，万九生，等.不同输精方法对母犬繁殖性能的影响［J］.黑龙江畜牧兽医，2008，5:21-22.