恩度静滴联合放疗对食管癌患者血清VEGF水平的影响

张 聪，薛国亮，汪延明

(济南军区总医院，济南250031)

放射治疗是食管癌主要的、有效的、安全的治疗手段，能显著提高患者的生活质量，延长生存期。但目前根治量放疗后肿瘤的局部复发和远处转移成为治疗失败的主要原因。导致放疗后肿瘤未控的关键因素首先是原发肿瘤残余(占75% ～96%)，其次是血行转移及淋巴道转移［1］。抗血管治疗联合放疗能够提高多种肿瘤的治疗效果，已成为肿瘤放疗领域研究的热点。在肿瘤新生血管形成的影响因素中，最有效和特异的因子就是血管内皮生长因子(VEGF)。2010年8月～2012年5月，我们观察重组人血管内皮抑素——恩度(ES)静滴联合放疗对食管癌患者血清VEGF的影响，进一步探讨恩度的放射增敏性及二者的协同抑瘤作用。

1 材料与方法

1.1 临床资料 45例食管鳞癌患者均经病理学检查确诊，且放疗前未作任何抗肿瘤治疗，并有完整的临床和病理资料。男27例，女18例;年龄47～72岁。45例食管鳞癌患者采用同期非随机对照研究方法分为放疗组23例和联合组22例。另取20例同期健康体检者为对照组，男12例，女8例;年龄52～72岁。各组一般资料具有可比性(P均 ＞0.05)。

1.2 方法 放疗组行食管局部病灶三维适形放疗，200 cGy/次，5 次/周，DT 60 Gy。联合组:放疗方案同放疗组，恩度注射液15 mg加入500 mL生理盐水中，匀速静滴，滴注时间3～4 h，自放疗开始连用14 d，休息1周为一个周期，连用两个周期。各组均在治疗前及治疗结束后抽取空腹静脉血4 mL，1 500 r/min离心10 min，分离血清，置于－70℃冰箱保存，实验前30 min取出平衡至室温。应用人VEGF ELISA检测试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清VEGF的浓度。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。实验数据以±s表示。组间比较采用方差分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

治疗前放疗组和联合组血清VEGF水平分别为(709.77±110.24)、(665.84±116.64)pg/mL，均显著高于对照组的(339.48±50.11)pg/mL(P均 ＜0.01);放疗组和联合组治疗后血清VEGF水平分别为(661.25±99.77)、(567.82±99.57)pg/mL，放疗组与治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05);而联合组差异有统计学意义(P＜0.05);两组治疗后VEGF水平比较差异具有明显的统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

我国是世界上食管癌发病率最高的国家之一，严重危害着人民的生命与健康，因此，提高食管癌患者生存率，防止肿瘤复发及转移变得尤为重要。目前，放射治疗以其无创伤、无疼痛、治疗周期短、并发症少等优势在食管癌的治疗中得到广泛应用。但是单纯放射治疗的效果并不理想且毒副反应较多，国内外许多学者都在积极研制、开发具有放射增敏作用的药物，试图通过放射增敏途径，提高肿瘤放疗的效果。

1971 年，Folkmanm［2］首先提出恶性肿瘤生长和转移依赖于肿瘤新生血管，故可以通过抑制肿瘤血管的形成来控制肿瘤生长。VEGF是在肿瘤新生血管形成的影响因素中最有效和特异的因子，被认为是促进肿瘤血管生成的最重要因子，它可以通过诱导内皮细胞迁移、增殖和分化，增加血管通透性来为肿瘤细胞的生长提供基质成分，进一步促进肿瘤的生长。已有很多研究［3］表明VEGF在食管癌中明显高表达，可作为判断预后的新指标。恩度是我国自主开发的新型重组人血管内皮抑素，其作为晚期肺癌的标准治疗药物，现已发现在多种肿瘤中有明显的抗瘤作用。秦叔逵等［4］报告重组人血管内皮抑素与化疗联合治疗肺外晚期恶性肿瘤的临床研究，其中恩度联合化疗治疗3例晚期乳腺癌，并且全部是三线治疗，其中1例获得部分缓解。Itasaka等［5］通过观察放疗联合恩度对小鼠A431移植瘤的影响，发现恩度能提高放疗的抗肿瘤效果，二者综合治疗可以明显延长小鼠的无病生存期。但是恩度联合放疗应用于食管癌鲜有报道。

VEGF的表达与放疗之间的相互作用表现在以下三个方面:①VEGF因子在肿瘤组织中呈高表达，而放疗后肿瘤负荷降低，VEGF的表达会出现下降趋势;②肿瘤细胞增殖迅速，已有的血管不能有效供氧，从而使肿瘤细胞乏氧，乏氧可以增加缺氧诱导因子(HIF)-1的活性，进而激活缺氧诱导基因如VEGF的表达［6］。放疗对肿瘤血管造成损伤，导致细胞乏氧诱导 VEGF的高表达［7］;③肿瘤组织高表达VEGF可引起肿瘤血管生成活跃，而新生的肿瘤血管缺乏正常成熟血管组织的特点，其扭曲变形或排列紊乱，或形成巨大毛细血管、窦状血管、异常的动静脉吻合等，导致无效循环增加，加剧了肿瘤的乏氧。乏氧又诱导VEGF的表达，进一步促进肿瘤血管的生成，如此恶性循环，最终导致肿瘤对放疗产生抵抗性［8］。Smith等［9］对口腔癌和口咽癌的研究表明，肿瘤组织中VEGF表达越高，放疗越不敏感，阻滞VEGF的表达可增加放射线的杀伤力，增加放射敏感性。

尹预真等［10］发现重组人血管内皮抑素联合放疗可明显抑制鼻咽癌移植瘤的生长，其抑瘤作用明显优于单用恩度组和单纯放疗组，重组人血管内皮抑素对鼻咽癌移植瘤具有放射增敏效应。其机制可能为重组人血管内皮抑素联合放疗能够明显下调VEGF的表达，抑制肿瘤新生血管的形成，促进肿瘤细胞的凋亡，这可能是重组人血管内皮抑素放射增敏的机制之一。

本研究我们采用恩度联合放疗治疗食管癌，同时检测患者外周血中的VEGF，发现食管癌患者血清VEGF水平明显高于健康者，提示VEGF作为血管内皮生长因子可能参与了肿瘤血管形成，进而导致食管癌的远处转移。单纯放疗组的食管癌患者的血清VEGF水平在治疗后较治疗前有所下降，但是无统计学上的差异，这可能是由于影响VEGF水平的众多因素存在不平衡分布所致。而联合组血清VEGF水平在治疗后较治疗前有所下降，且有统计学上的差异，强调恩度的抗血管生成及抑制VEGF表达的作用。联合组血清VEGF水平低于单纯放疗组，且存在统计学上的意义，提示放疗联合恩度对食管癌有明显的抑瘤作用，且VEGF的表达也明显减少，这可能与恩度增加放射增敏性，降低了VEGF的表达有关。

王慧敏等［11］观察了恩度序贯不同放疗剂量对Lewis肺癌细胞接种肿瘤动物模型中VEGF表达的影响，发现大剂量单次放疗组肿瘤细胞中VEGF呈高表达，这可能与放疗引起乏氧细胞的比率增加有关，而小剂量多次放疗组VEGF升高不明显，可能与肿瘤细胞的再氧合有关。另外，Winkler等［12］发现肿瘤血管在应用抗VEGF受体抗体后会出现一个“血管正常化的窗口期”，窗口期内肿瘤血管为富氧的，与正常血管功能相似，肿瘤细胞对放射线敏感，在窗口期内放射治疗能起到较好的协同抗肿瘤作用。Kaliski等［13］发现，放射通过肿瘤内环境诱导了一种保护肿瘤的途径，使肿瘤抗拒放射线。VEGF对放射诱导的血管内皮细胞凋亡有保护作用，而此作用可以被抗VEGF抗体阻滞，因而抗 VEGF抗体强化了放射的细胞毒作用，提高肿瘤的放射敏感性［14］。这是放射线与抗VEGF抗体联合治疗肿瘤的理论依据。

综上所述，本研究结果显示重组人血管内皮抑素联合放疗与单纯放疗相比，在很大程度上下调了VEGF的表达，从而改善了肿瘤细胞的乏氧，减少了放射抗拒，证实放疗与重组人内皮抑素联合增加了肿瘤细胞的敏感性。但至于血管正常化的窗口期的界定及对生存期的影响，我们将定期随访这些患者，开展远期研究。

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