现场DNA物证证据的提取、保存及检验应用进展

王基锋，杨卫红

现场DNA物证证据的提取、保存及检验应用进展

Advances on App lication of Abstraction，Storage and Test from Scene DNA Evidences

王基锋1，杨卫红2

目的为了给刑事案件诉讼提供准确可靠的证据，在办理凶杀、强奸等多种刑事案件时，经常需要对各种来源于人体的生物检材进行个人同一认定检验。方法 利用法医DNA技术对现场提取的血液（斑）、精液（斑）、唾液（斑）、人体组织、骨骼等检材进行检验，为案件侦破提供科学依据或线索；利用DNA数据库技术更大的发挥法医DNA技术在许多案件侦破中的应用，还可以利用法医DNA技术对灾难性事件（案件）中确定死亡人数、对受害者的身源进行鉴别。结果结论 利用DNA物证可以为案件侦查和诉讼提供更多证据

DNA物证；DNA提取；DNA保存；DNA检验

为了给刑事案件诉讼提供准确可靠的证据，在办理凶杀、强奸等多种刑事案件时，经常需要对各种来源于人体的生物检材进行个人同一认定检验。现在把与案件有关并能为侦查提供线索、为审判提供证据，并可进行法医遗传学检验的生物样品，或含有、承载可进行法医遗传学检验的生物样品的物品都称为生物物证检材（以下简称检材）。利用法医DNA技术对现场提取的血液（斑）、精液（斑）、唾液（斑）、人体组织、骨骼等检材进行检验，为案件侦破提供科学依据或线索；利用DNA数据库技术更大的发挥法医DNA技术在许多案件侦破中的应用，还可以利用法医DNA技术对灾难性事件（案件）中确定死亡人数、对受害者的身源进行鉴别。

1 DNA技术的提取

（1）现场检材提取。及时、正确提取和保存；新鲜尸体可提取血、肌肉、脑组织、心脏等；腐败尸体可依次提取深层肌肉组织、肋软骨、指（趾）甲、长骨等；对于特殊的现场，为确定死亡人数，需检验所有提取的尸块。

（2）亲属样品提取，如果要通过亲子鉴定确定身源的案件，优先提取直系亲属的样品，如父母、配偶和子女；根据具体情况选择其他亲属。

（3）生前样品提取，如果要通过同一比对确定身源，可以提取死者生前的牙刷、剃须刀、口红、所穿的衣物（未洗过）、使用过的物品等。

2 现场检材的提取和保存

2.1 一些基本原则

2.1.1 基本规则 ①检材均应直接提取，易携带物品整体提取；不易携带物品提取附着检材的部位；②根据检材附着的不同载体，应采取擦拭、剪切、刮削、吸附、浸泡、凿锯、挖取等方法提取；③在提取检材前后应进行照相或录像；④不同部位的检材应分别提取，单独包装；⑤提取用具要洁净；⑥使用适当的封装材料，做好检材提取记录；⑦提取检材时，注意要提取对照样品；⑧提取的各种新鲜液体物证应尽快检验，剩余部分应制成纱布斑迹干燥保存；人体组织应冷冻保存；⑨提取的各种体液性的检材应在阴凉通风、可防止污染处自然干燥成纱布斑迹，禁止暴晒或加热烘干；⑩提取的检材在包装和携带运送过程中应避免互相摩擦、冲撞以及失落，易碎检材防止挤压和震动，易散失检材严密包装，易腐败检材低温保存送检。

2.1.2 防止污染原则 ①提取检材时必须使用一次性用具，每提取完一份检材应及时更换，禁止重复使用和赤手触摸检材；②提取检材时必须使用无菌的提取试剂和转移用载体；③提取检材时不得说话、打喷嚏等，以免造成污染；④提取检材时一次只能提取一件检材；⑤禁止多件检材混合包装，禁止重复使用封装材料。

2.1.3 个人防护原则 ①所有的检材应都视同为可能的传染源，提取检材时应穿戴好防护用品；②检材提取人员手上的任何切口和擦伤都要用防水织物包扎；③在提取开始和结束后对手部进行消毒。

2.2 检材的提取和保存

2.2.1 常见检材 常见的检材一般包括血液（斑）、唾液（斑）、精液（斑）、毛发、骨骼、阴道分泌物（斑）、各种组织、分泌物、排泄物，以及烟头、果核、口杯、口香糖等。①法医物证检材包括血液（痕）、精液（斑）、唾液（斑）、毛发、组织、骨骼等各种含有人体细胞的生物检材。由于载体的不同，现场提取时需注意去发现和提取各种形式的生物物证检材。②提取检材前注意记录检材的大小、形态等特征提取的检材必须分别包装，在包装袋上注明检材名称、来源、数量、采集日期等，并有采集人及采集见证人的签名。

③对于活体检材，一般用医用消毒纱布或中速滤纸采集指血或耳垂血（2cm2以上），自然晾干。可以用口腔拭子提取口腔黏膜细胞，提取前须清水漱口，检材自然晾干；或取毛发3根～5根。以上检材均用纸袋包装后常温保存。④对于血痕，类似衣裤、地毯、床单上的血痕，可以剪下一部分纸袋包装后常温保存；类似衣柜、墙壁、地面、刀、斧上的血迹可以刮取，或用生理盐水浸湿的纱线提取，自然晾干后纸袋包装常温保存。⑤涉嫌性侵害的，应用棉签分别提取阴道外端、中部和后穹窿部，必要时还应注意会阴、下腹、口腔、肛门等部位有无精液（斑），以及现场怀疑有精斑的其他检材，如床单、被褥、卫生纸、避孕套、内裤、衣物等。所有检材应该分别提取、标明记号、自然晾干、纸袋包装后常温保存。⑥现场的可疑毛发用镊子提取，用纸折叠后置纸袋内常温保存。⑦含有唾液斑的检材如烟头、果核、香口胶等用镊子提取，纸袋包装后常温保存。⑧人流刮宫组织，取5g以上确认为绒毛的组织；引产胎儿，取5g以上的组织；羊水，取2m l以上的液体。提取的检材洁净容器包装、冰冻保存、冷藏送检。⑨新鲜尸体，可用医用消毒纱布或中速滤纸提取血液（3cm2以上），自然晾干，纸袋包装后常温保存。新鲜尸体也可取肌肉组织（50g以上）；腐败尸体，尽量提取相对新鲜的组织，包括指甲（2枚以上）、肋软骨（5cm以上）或者其他软骨（5g以上）、深部肌肉组织（5g以上）、毛发（10根以上）；白骨化的尸体尽可能提取指甲、长骨、牙齿、毛发。以上检材洁净容器包装、冰冻保存、冷藏送检。⑩根据案件情况，注意提取对照样本。

2.2.2 容易忽略的生物物证 目前，STR复合扩增技术已成为各个DNA检验实验室的主要手段，提高了对微量DNA进行检验的能力，拓宽了DNA检验的范围，使得许多潜在的DNA检材在侦查破案中能够发挥应有的价值。它可以是面罩、果核等上遗留的唾液中口腔脱落细胞DNA，也可以是通过皮肤接触遗留的上皮细胞DNA。所有这些都是潜在的DNA证据来源，能够为侦查破案提供科学依据。微量DNA的检验是法医DNA检验的难点之一。对于以上提到的各种潜在生物物证，进行DNA检验时不能保证其成功率，但是，一旦成功地获得了现场物证的DNA分型，就能够成为破案的直接证据。

对于潜在的DNA物证，检材的提取往往是关键。只要现场勘查人员掌握各种检材存在的形式，强化物证提取的意识，发现这些物证并不难。在提取过程中，首要的问题是注意防止污染，必须戴口罩和手套操作；由于这类检材中DNA含量少，细胞与载体表面结合松散，即使戴着手套，也要尽量少处理和触摸所要擦拭的区域。对于现场物证，不同的区域可能有不同的接触者，为了最大程度地获得现场物证的证据价值，还需要分区域进行检材的提取。

建议现场勘查人员采用两步擦拭法对检材进行提取，即先用浸湿的棉签反复擦拭后，再用干棉签擦拭至载体表面干燥。擦拭时尽量使用棉签底部，所用区域越集中越好。所有棉签干燥后保存备用。

3 DNA检验结论的应用

3.1 技术方法的选择

目前，利用法医DNA技术对生物物证进行检验主要采用两种方法：STR分析和线粒体DNA测序，其中STR分析中包括常染色体的STR分析和Y染色体的STR分析。

常染色体的STR分析检验对象一般包括血液（痕）、唾液（斑）、精液（斑）、毛发（有毛根）、骨骼、阴道分泌物（斑）、器官、肌肉、分泌物、排泄物等生物样品，以及含有或承载上述生物样品的各种物品，如烟头、果核、口杯、口香糖等。该方法个体识别率较高，能够达到同一认定的水平，但该方法对一些特殊的生物检材，如陈旧骨骼、毛发、牙齿等角质化或含有DNA量极少或降解的样品，往往无能为力，只能利用线粒体DNA测序技术进行检验。

线粒体DNA测序方法的个体识别率较低，不能达到同一认定水平，一般作为STR分型技术的补充手段，当利用STR分型技术无能为力时，才采用线粒体DNA测序技术。由于缺乏详细的统计学资料，目前还不能给出一个确切的统计学概率；另外线粒体DNA测序检验无法应用于父系遗传关系的检验。

对于一些特殊的案件，可以应用Y-STR分析，确定男性的单倍型。

3.2 DNA检验的局限

DNA检验技术并不是万能的，有时对某些检材的检验无能为力，有时对某些案件的检验达不到同一认定的水平，一定要认识到这些情况的存在，才不至于错误的理解和应用DNA检验结论。一般地，DNA检验结果做出排除的结论，能够说明所检验的检材与要比对的样本来源于不同的个体，但当DNA检验，分型一致时，不一定能够达到同一认定的水平。例如，线粒体DNA测序检验的结果，Y染色体STR检验结果，混合样品的检验结果，亲子鉴定时遇到变异的情况，单亲亲子鉴定，微量DNA的核DNA检验获得的STR分型不完全等情况下，DNA检验往往达不到认定的水平，必须与其他相关的证据一起综合考虑。

DF795.2

B

1672－688X（2012）04－0305－03

2012－09－28

1.河南省公安厅刑科所，河南郑州450003

2.郑州大学基础医学院法医教研室，河南郑州450007

王基锋（1976－），男，河南扶沟人，主检法医师，从事法医现场斟查实务及法医病理学的研究。