血小板计数假性异常的影响因素探讨

冯艳鹏 魏月霞

(宁夏回族自治区第五人民医院检验科 宁夏石嘴山 753000)

血小板检测是研究止血与凝血障碍的重要指标之一，也是其他血小板参数可靠性的基础，其检测结果的可靠性至关重要。现在各种自动化血细胞分析仪已广泛使用，它不仅改善了实验方法的特异性和敏感性，而且提供了许多新的实验参数。本实验室采用电阻抗法原理测血小板计数，它是根据脉冲高低测定每个血细胞的体积。由于其原理的限制及影响因素众多，血细胞计数结果与实际值有一定的差异，特别是血小板体积小、易凝集、易破坏的特性和诸多影响因素，操作过程中如忽视影响因素，血小板计数结果与实际数值差异更显著。还会引起医疗纠纷，已引起临床广泛关注［1］。本文就影响因素综述如下。

1 引起血小板计数假性降低的影响因素

1．1 标本自身因素的影响 由于末梢采血穿刺太浅，挤压过度，混入组织液或天气寒冷采血部位血液循环差，采血不顺利或静脉采血经过多次穿刺而引起局部水肿皮下出血时因组织损伤，组织凝血因子混入血标本中［2］，造成血小板假性降低。所以采血进针要准，要狠，要讲究方法正确，避免过度挤压和取血时间过长。未充分与抗凝剂混匀或混匀时间过短等，人为造成血小板的凝集，是引起血小板计数不准确的首要原因。采血量也是影响因素之一，血量最好达到抗凝管体积的1/3，不能超过2/3，否则可因抗凝剂相对不足使血小板发生聚集，导致血小板计数假性降低。应尽可能采用真空采血系统，减少干扰因素，保证生物安全。

1．2 抗凝剂的影响 用于血细胞分析仪的抗凝剂EDTA－K2为首选，而极少数患者体外的EDTA抗凝血，在室温条件下可发生血小板EDTA依赖性凝集，此现象主要是EDTA－K2可导致血小板活化，部分血小板的形态从圆盘状变成球状，其膜表面的隐匿性抗原表位现象也会改变与血浆中的自身抗体结合，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，致使血小板假性降低［3］。还有文献报道，肝素和双草酸盐作抗凝剂时，会导致血小板计数假性降低。

1．3 巨大血小板的影响 正常或许多病理情况下，很多血小板的体积很大，而通常血细胞分析仪通过测定血液中细胞的直径大小以区分血小板、红细胞及白细胞，不能对巨大血小板进行识别，将大体积血小板误计入其他成分。例如骨髓及骨髓外增生综合征时，仪器很难鉴别白细胞大小的血小板，此类血小板可能被计入白细胞或红细胞，而使血小板假性降低［1］。还有卫星现象，因EDTA抗凝血中血小板黏附于分叶核粒细胞表面，出现巨大血小板所以计数没有包括在内，造成血小板的假性减少。

1．4 标本放置时间的影响 标本刚采集完结果不稳定，待稳定15分钟后再测定，并尽快分析完［2］。因为血小板离体后其形态发生变化，其外膜形成的微小管游离端向外伸展形成丝状伪足，数个伪足相互缠绕，形成血小板可逆聚集体，其体积和淋巴细胞大小相似，造成血小板的假性减少。经文献报道，标本放置时间越长，对血小板的影响越大。随着时间的延长，血小板发生肿胀或产生构型改变，导致仪器不能正常识别，使血小板计数假性降低。

1．5 高镁血症及脂类与蛋白聚集体的影响 临床上常用Mg-SO4来预防控制妊高症子痫的发作及用于治疗先兆子痫［1］。高浓度的Mg2+有类似Ca2+的生理作用，通过改变血小板胞内CAMP水平而引起血小板的聚集，造成血小板计数假性降低。脂类与蛋白的聚集体，如高胆固醇和高甘油三酯血症时，低密度脂蛋白和载脂蛋白B100可促进血液高凝状态，使凝固因子活性增强，血小板聚集性增高，纤溶性降低，引起假性血小板减少［1］。

1．6 临床用药的影响 临床上用ATP(三磷酸腺苷)后血小板容易发生聚集，血小板计数降低，因ATP分解产生大量ADP(二磷酸腺苷)，ADP是一种血小板聚集功能的诱导剂，易使血小板发生聚集而影响血小板的假性减少。

2 引起血小板计数假性增高的影响因素

2．1 小红细胞的影响 正常情况下血细胞分析仪对红细胞体积的识别比较准确，当患者红细胞大小不均时，尤其是体积＜70fL的小红细胞居多时，部分极小红细胞会计入血小板，引起血小板假性增高［4］。因血小板和红细胞在统一检测系统中，给仪器识别造成困难，因仪器只识别体积大小，而不能区别性质，因而将小红细胞误计成血小板，使血小板假性增高。

2．2 红细胞碎片的影响 血细胞分析仪对红细胞及血小板同时进行计数，同一样品即使溶血不完全对血小板计数也没有影响，但在实际工作中发现溶血不完全影响下一例样品的血小板计数，由于红细胞碎片冲洗不彻底，能与血小板混淆，使血小板假性增高。

2．3 试剂及其他因素的影响 血小板的检测结果直接反映试剂的质量，原则上应使用与仪器相匹配的原装试剂是在有效期内和批号一致的稀释液、溶血剂、洗涤液、染色液、校准品和质控品。由于国产试剂不同程度存在质量问题，如与仪器不匹配、过滤不彻底、细菌污染以及室温低于15℃时，稀释液容易出现结晶而使试剂空白增高，导致血小板计数结果偏高。另一原因是由于血细胞分析仪管道长时间不清洁造成管壁附着一些絮状物或微小凝血块，这些杂质可随血液进入计数池而使血小板结果假性偏高。

2．4 疾病因素 菌血症患者血液中大量细菌可导致血小板计数结果增高，在多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淋巴系统增值性疾病、转移癌、自身免疫性疾病、重度感染及某些不明原因血浆中冷球蛋白增加或白血病、妊娠、血栓性疾病、糖尿病等血浆中冷纤维蛋白增加，可使血中非晶体物质聚集，引起血小板计数值假性增高，此时可将标本放置37℃水浴后计数。

以上关于血小板检测的影响因素是在临床工作中比较常遇到的，了解这些因素后，在日常工作中因严格按照规程操作，对仪器定期进行维护和保养，在保证仪器正常运行的同时，如检测过程中出现血小板计数偏低或偏高的现象，在仪器提示有聚集时，应及时分析可能的影响因素，结合临床资料，进行手工复查，必要时涂片染色观察，以及得出准确的检验结果，为临床提供正确的诊治依据，以避免血小板假性异常造成临床误诊。

［1］ 朴文花．假性血小板减少症的最新研究进展［J］．宁夏医学杂志，2012，34(1):78

［2］ 邓宗奎．血液分析仪血小板计数的影响因素与全程质量控制［J］．检验医学与临床，2009，6(19):1688

［3］ 刘惠兰，黄美群，陈汉红，等．EDTA－K2引发的血小板假性减少原因探讨［J］．国际检验医学杂志，2012，33(7):879

［4］ 李以贵，李 涛，颜保松．阻抗法小红细胞致血小板假性增高分析［J］．海南医学，2005，16(12):146