鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗的免疫抗体监测与分析

仇微红，叶贺佳，李 敏，孙招金，王 鑫，罗开健，2

（1.广州市华南农大生物药品有限公司，广东 广州 511300；2.华南农业大学兽医学院，广东 广州 510642）

鸽Ⅰ型副黏病毒（PPMV-Ⅰ）病又称鸽瘟或鸽新城疫，是一种由禽Ⅰ型副黏病毒引起的、流行于鸽群的高度接触性急性传染病，它以肠炎、严重腹泻和神经症状为特征，是危害养鸽业的主要疫病之一。鸽Ⅰ型副黏病毒病目前在各种鸽群（肉鸽、信鸽和赛鸽）中普遍存在，临床发病多见于3月龄以下的鸽，乳鸽的敏感性最高，发病后的死亡率较高，可达50%～80% 以 上［1］，严 重 的 可 高 达 95% 以 上［1－3］。该病可通过空气中的尘埃、污染的器具、饲料和饮水传播；饲养密度大、空气不流畅、受冷刺激会加剧本病的发生。随着养鸽业的迅猛发展和环境污染的加重，本病常并发或继发沙门菌病、大肠杆菌病、毛滴虫病、念珠菌病等疫病，以致病情变得复杂和严重，鸽群死亡率升高。该病已经成为养鸽业的一种最主要的疾病，但对本病迄今尚无特异性的有效治疗药物，所以关键在于预防。目前还没有一种专门用于防治鸽瘟的专属疫苗，尽管鸽Ⅰ型副黏病毒与鸡的新城疫病毒为同一属，但用鸡新城疫疫苗免疫鸽群后保护效果并不理想［4］。有研究报道，有些鸽场曾用鸡NDV活疫苗，如Ⅰ系苗、Ⅱ系苗（B1）和LaSota（Ⅳ系）等免疫鸽群，未能获得满意的效果，对预防鸽Ⅰ型副黏病毒感染只有低水平保护力（有报道说仅有20%保护率，而且免疫期短）。因此，分离出免疫原性良好的毒株，研制出具有较好免疫保护效果的鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗是研制的关键。

1 材料与方法

1.1 材料 30日龄左右非免疫的潮莲白黄鸽，购自广东省江门市翔胜鸽场。鸽瘟油乳剂灭活疫苗，由广州市华南农大生物药品有限公司制备及提供；鸡新城疫活疫苗（La Sota株），购自广东永顺生物制药有限公司（生产批号：20090901）。鸽瘟灭活抗原，由广州市华南农大生物药品有限公司制备及提供。1.2 试验方法

1.2.1 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验

将450只30日龄左右潮莲白黄鸽随机分成A、B、C、D、E、F、G、H、I共9组，50只／组，其中 A-D组为鸡新城疫活疫苗（La Sota株）＋鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫组，E-H组为鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫组，Ⅰ组不免疫作为空白对照。La Sota活疫苗的免疫剂量为翼下肌肉注射1羽份／只，免疫后7 d胸肌接种鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗。具体免疫程序见表1。免疫后定期每周随机抽取20只免疫鸽采集血液分离血清，使用鸽瘟灭活抗原进行HI抗体检测，观察到第8周。

表1 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗具体免疫程序

1.2.2 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫持续期试验

在鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验的基础上，对鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验的A、B组继续进行抗体跟踪，一直观察到第20周，即于免疫后0、1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、18、20周，随机抽取20只免疫鸽采集血液分离血清，使用鸽瘟灭活抗原进行HI抗体检测。

图1 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗抗体产生的情况

2 结果

2.1 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验结果见图1和表2。

由表2、图1结果表明，A、C组（鸡新城疫La－Sota株活疫苗＋鸽Ⅰ型副黏病毒灭活油苗免疫）油苗一免后5～6周达到抗体高峰，B、D组油苗二免后4～5周再次达到抗体高峰。E-G组不做弱毒苗免疫，仅用灭活油苗免疫一次，其HI抗体免疫后也于5～6周达到抗体高峰。先用鸡新城疫La Sota株活疫苗做基础免疫后再用油苗接种，其HI抗体效价明显高于仅接种油苗组。另外，HI抗体效价也于油苗的接种剂量有关，接种0.5 m L／只要略高于0.25 m L／只。

2.2 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫持续期试验结果 结果表明，若以HI抗体平均效价为5log2作为免疫保护值，在弱毒活疫苗免疫后1周，疫苗以0.25 m L／只进行1次免疫，免疫持续期为2个月；疫苗以0.25 m L／只进行1次免疫，免疫后3周以同样剂量重复免疫1次，免疫持续期为18周，详见表3和图2。

表2 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验结果 （log2）

表3 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫持续期试验结果 （log2）

3 讨论与小结

从我们完成的鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫效力试验可知，总体来说作1羽份鸡新城疫（La Sota株）活疫苗基础免疫比未作基础免疫的抗体产生高，而且从节省成本角度来考虑，鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗0.25 m L／只的免疫剂量比较适合。因此免疫程序是先做1羽份鸡新城疫（La Sota株）活疫苗基础免疫，1周后进行鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗免疫0.25 m L／只，油苗免疫后3～4周以同样方式、同样剂量的进行重复免疫，那么疫苗的保护期为18周。

图2 鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗抗体持续情况

［1］Kaleta E F，Alexander D J，Russell P H.The first isolation of the PPMV-I virus responsible for the current panzootic in pigeons［J］.Avian poulty，1985，14：553-557.

［2］陈昌海，程雷.鸽新城疫研究概况［J］.中国兽医杂志，1998，24（11）：53-54.

［3］许如苏.鸽Ⅰ型副黏病毒的研究［J］.华南农业大学学报：自然科学版，1988，9（3）：37-45.

［4］张淑霞，杨增歧，赵余放，等.鸽禽I型副黏病毒油佐剂灭活苗对肉种鸽免疫效果观察［J］.中国预防兽医学报，1999，21（3）：163-165.