新生儿高胆红素血症血清神经元特异性烯醇化酶检测临床意义分析

金晓秋，曲书强

（1.齐齐哈尔医学院第二附属医院 儿科，黑龙江 齐齐哈尔 161006；2.哈尔滨医科大学第二附属医院 儿科）

高胆红素血症是新生儿时期最常见疾病之一，其发病率占住院新生儿首位，达30%－50%［1］。胆红素脑病是其严重的并发症，病死率很高，幸存者约75%－90%患有严重神经系统后遗症［2］。积极防治胆红素脑病是非常重要的，因此早期诊断尤为重要。本研究对36名健康新生儿和96名本院新生儿室收治的高胆红素血症患儿进行血清NSE、γ－GGT检测及BAEP检测，现将结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2010年10月至12月本院新生儿室收治的新生儿高胆红素血症患儿作为观察组，男44例，女52例。选取2008年3月至2009年12月在我院产科出生的健康足月新生儿36例，男20例，女16例。两组间性别、体重及胎龄均无统计学差异。观察组入选标准：（1）足月适于胎龄儿，日龄为生后3－7天；（2）以未结合胆红素升高为主（3）存在肉眼可见的皮肤粘膜黄染；（4）出生否认窒息及新生儿缺氧缺血性脑病、颅内出血或神经系统感染症状；（5）否认家族听力障碍史及围生期耳毒性药物使用史；（6）无严重全身性感染；（7）无宫内STORCH（梅毒螺旋体、弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、疱疹病毒及其他）感染史；（8）无严重心、肺疾病，先天畸形及遗传代谢性疾病。按血清胆红素水平依据 Maisels所提出的诊断标准［3］分三组，即轻度升高组血清胆红素（TB）＞205.2μmol／L，≤256.5μmol／L；中度升高组TB＞256.5μmol／L，≤342μmol／L；重度升高组TB＞342μmol／L。

1.2 方法 高胆红素血症患儿生后3－7天期间静脉采血检测血清NSE和TB、γ－GGT。NSE检测应用化学发光法，采用郑州安图lucy2型化学发光仪检测，试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供；TB检测应用钒酸氧化法，采用日立7060全自动生化分析仪检测，试剂盒由北京九强生物技术有限公司提供。于采血检测血清NSE和TB、γ－GGT的8小时内检测脑干听觉诱发电位，采用日本光电5504型肌电诱发电位仪在环境安静的屏蔽室进行。患儿用10%水合氯醛0.3－0.5 ml／kg口服，待熟睡后检测。记录电极置国际10－20系统的A1A2，参考电极置Cz。电极阻抗＜5 kΩ，接地电极置于前臂，带通滤波100 Hz－3 k Hz，灵敏度50μV／Div。双耳通过耳罩给予极性疏波刺激，刺激频率为10 Hz，刺激强度75 d B（n HL），叠加400次，分析时间为10 ms。测试中首先进行BAEP听阈检测，刺激强度由低到高，将刚好使Ⅴ波出现的最低强度定为听阈阈值。听反应阈正常者继续完成各项BAEP检查。每耳测试两轮，以求较好的重复性，对无反应者可加大刺激强度，最高100 dB，以记录最佳BAEP波形。BAEP异常的诊断标准［4］为符合以下任一项者为异常：（1）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ潜伏期与波间期大于对照组X＋2.5 s；（2）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波一波缺失；（3）Ⅲ－Ⅴ／Ⅰ－Ⅴ＞1；（4）两耳间潜伏期或（和）峰间期之差＞0.4 ms。

1.3 统计学分析 应用SPSS11.5软件包，对结果进行正态性检验，正态性数据用均数±标准差表示。呈正态分布方差不齐的两组数据采用t’检验，方差齐的采用t检验。多组间比较采用方差分析和q检验。计数资料的比较，采用χ2检验。两因素间的相关性采用直线相关与回归分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同血清胆红素水平下的血清NSE、γ－GGT的比较 血清NSE水平在胆红素重度升高、中度升高、轻度升高组均增高，与对照组之间差异有显著性；血清γ－GGT升高在轻度升高组与对照组、重度升高组与中度升高组之间差异有显著性，但在轻度升高组与中度升高组之间差异无显著性，见表1。

2.2 观察组血清NSE水平与血清γ－GGT、BAEP异常率相关性分析 观察组中血清NSE与γ－GGT呈正相关（r＝0.734，P＜0.01）；γ－GGT与BAEP异常率呈正相关（r＝0.812，P＜0.01）；NSE与BAEP异常率呈较弱正相关（r＝0.287，P＜0.05）。

2.3 BAEP异常情况 重度升高组BAEP异常者均为各波潜伏期和波间隙延长且阈值增高超过100 dB，异常19例；中度升高组与轻度升高组BAEP异常者均表现为各波潜伏期或波间隙延长以及阈值轻度增高，中度升高组20例，轻度升高组25例；对照组BAEP异常者多表现为各波潜伏期或波间隙轻度延长，异常13例。经统计分析，重度升高组与中度升高组间、轻度升高组与对照组间的BAEP异常率、异常程度差异均有统计学意义（P＜0.05），而中度升高组与轻度升高组间的BAEP异常率、异常程度差异无统计学意义（P＜0.05）。

表1 不同血清胆红素水平下的血清NSE、γ－GGT的比较

3 讨论

当前人们对胆红素的研究认识到，轻度升高的未结合胆红素就具有神经毒性作用；血脑屏障、细胞膜可能以转运蛋白主动摄取和外泵胆红素的方式影响及对抗其神经毒性；胆红素不仅能促进神经系统细胞凋亡坏死，还能在较低浓度影响神经系统细胞的兴奋性以及干扰神经元突触间的信息的传递［5］。最近体外研究显示，未结合胆红素会一直抑制海马的突触传递的长时程增强还减少海马切片突触场电位的振幅，损坏幼鼠的学习记忆能力［6］。另不同种族和地域、不同胎龄和出生体重的新生儿发生急性胆红素脑病的血清胆红素水平不同，国内外学者均提出根据不同胎龄、体重、日龄和高危因素应有不同的干预指征［7，8］。目前关于新生儿急性胆红素脑病早期诊断的研究已经积累了很多经验，但研究的指标很多，均缺乏敏感性和特异性，仍很难早期临床诊断和评估预后。

NSE理化性质稳定，外界环境对其影响不大，在中枢神经系统中，只特异地存在于神经元细胞胞浆中［9］。当脑损伤等因素影响了神经元细胞的代谢变化，神经元细胞膜功能和结构受损时，NSE从胞质释放至细胞间隙和脑脊液中，穿过破损的血脑屏障进入血液循环，使血清中NSE含量升高。国内多项研究均表明NSE可以作为新生儿脑损伤早期生化标记物，早期诊断脑损伤敏感度和特异度高。对于检测正常的患儿，免于行颅脑影像学检查，减少不必要的放射性损伤和经济消耗［10］。而BAEP是一种简单易行、无创、敏感的脑功能检测方法，已成为早期发现和客观评价脑干病变和听力异常的可靠工具，特别是对亚临床型神经系统疾病和听力损害的早期诊断有重要临床应用价值。γ－GGT分布在人体多种组织，包括肾、胰、肝、脾、心、脑及生精管等多种组织细胞膜上［11］。血清γ－GGT在人体主要功能是参与γ－谷氨酸循环，与氨基酸通过细胞膜转运及调节谷胱甘肽水平有关。还原型谷胱甘肽能稳定细胞膜免受有毒物质损害，而当包括血脑屏障及神经细胞的细胞膜稳定性受破坏时，未结合胆红素更易透过血脑屏障对神经细胞造成损害，血清γ－GGT水平升高提示机体可能正在发生上述变化。

本研究对不同胆红素水平的患儿行血清NSE、γ－GGT及BAEP检测，结果显示血清NSE在轻度升高组、中度升高组及重度升高组均升高，明显高于对照组，与对照组间差异有显著性，证实不同程度升高的未结合胆红素均具有神经毒性作用。而BAEP与血清γ－GGT检测结果均显示在轻度升高组与对照组、重度升高组与中度升高组之间差异有显著性，但在轻度升高组与中度升高组之间差异无显著性。与血清NSE检测比较，后者敏感性及特异性高，从而血清NSE作为早期诊断新生儿胆红素脑病是更合理的。而且发现血清NSE与γ－GGT水平呈正相关，可提示一些未开展血清NSE检测的基层医院，可以把血清γ－GGT作为新生儿胆红素脑病早期诊断和干预的一个参考指标。

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