利可君合成工艺改进

储 刚，林 辉，刘彩连，王正泽

南京长澳医药科技有限公司，南京 210038

利可君（Leucogen），化学名：2-（α-苯基-α-乙氧羰基-甲基）噻唑烷-4-羧酸，为半胱氨酸衍生物，服用后在十二指肠碱性条件下与蛋白结合形成可溶物质，迅速被肠所吸收，增强骨髓造血系统的功能。主要用于预防和治疗各种原因引起的白细胞减少、再生障碍性贫血及血小板减少症等。

该药物目前尚无更优的替代药物，临床应用广，市场需求量大。截止2012年4月，国内上市的利可君原料药只有江苏吉贝尔药业有限公司一家生产，具有良好的产业化前景。

利可君的合成文献比较少，国内方面主要为：①CN200410054101.3，本发明是由苯乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙醚、金属钠经过缩合、酸化、环合而成的利血生原料，合成工艺路线见图1。

图1 利可君合成工艺路线

②CN200610037819.0，该发明涉及的合成工艺与CN200410054101.3相似，主要区别在于缩合反应过程中溶剂不同，为乙醚、乙醇、甲醇；缩合反应过程中缩合剂不同，为氢化钠、氨基钠、乙醇钠、甲醇钠、金属钠、氢化钾、氨基钾、乙醇钾、甲醇钾、金属钾。傅霖等[1]对利可君的工艺也做了局部的改进，使用乙醇钠-石油醚体系，替代钠-乙醚体系。以上报道的合成工艺，选用金属钠、乙醚和石油醚等，GMP车间应尽可能避免使用；另外，国内现有工艺中中间体α-甲酰基苯乙酸乙酯的合成涉及减压蒸馏操作，对设备依赖性高（沸点在200℃以上），获得的中间体为油状物，其中起始原料苯乙酸乙酯的残留量比较大，很难对其进行监控，不利于工业化生产。

国外对该工艺的研究文献也非常少，V.G. Foshkin等[2]为解决中间体α-甲酰基苯乙酸乙酯的固化问题提供了方向，但选用的钠-苯系统难以实现工业化生产，尚须进一步研究优化。

重现上述工艺,发现获得的利可君成品中甲酯杂质容易超标（大于0.1%），不符合药用要求，结构式见图2。

图2 甲酯杂质结构式

在上述参考文献的基础上，重点对中间体α-甲酰基苯乙酸乙酯的合成进行了优化。将中间体先生成钠盐，通过萃取，洗涤，除去残余的苯乙酸乙酯和脂溶性杂质，然后游离获得固态的α-甲酰基苯乙酸乙酯，改进后的工艺很好地解决了中间体固化的问题，且纯度非常高，无苯乙酸乙酯残留，继而通过和L-半胱氨酸盐酸盐反应获得的利可君成品，有关物质在0.1%以内，甲酯杂质也得到很好的控制（低于0.1%）。

1 仪器与试剂

Bruker AV-500型核磁共振仪；Vario MICRO型元素分析仪；YRT-3熔点仪；Agilent 1100 LC/MS质谱仪。

苯乙酸乙酯（工业级，纯度≥99%，上海晶纯试剂有限公司）；甲酸乙酯（CP，纯度≥97%，南京化学试剂有限公司）；L-半胱氨酸盐酸盐 （工业级，纯度≥99%，上海惠兴生化试剂有限公司）。

2 实验操作

2.1 α-甲酰基苯乙酸乙酯的合成

在50 L反应釜中，加入异丙醚35 L和叔丁醇钠（586 g，6.1 mol），开启搅拌，混合均匀。水浴冷却，控制内温10℃以下，称取苯乙酸乙酯1500 g（9.15 mol）和甲酸乙酯725 g（9.80 mol）混合均匀。滴加混合液，控制内温低于10℃。滴加完毕，升温，控制内温15℃，保温反应5小时，反应液最终为乳白色混悬液，加20 L纯化水，溶解，用异丙醚20 L萃取2次，取水相，用稀盐酸调pH值为1.0，降温至0～5℃析晶，获得1350 g，收率76.8%（文献收率[2]：60%）。熔点：58.6～60.7℃。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ：10.95 （1H，s，CHO），7.86 （1H，s，Ar-CH），7.26（5H，m，Ar-H），4.10（2H，m，CH2），1.20（3H，t，CH3）。

2.2 利可君的合成

称取L-半胱氨酸盐酸盐1200 g（7.61 mol），加至纯化水15 L中，搅拌溶解，用碳酸氢钠调节pH至2.2，过滤，将滤液吸至30 L反应釜中，开启搅拌。将丙酮7.5L加至反应釜中，室温搅拌下，将α-甲酰基苯乙酸乙酯1462 g（7.61 mol）的丙酮溶液滴加到反应釜中。滴加完毕，升温回流，外温控制在75～ 80℃，保温反应1 h。冷却，抽滤，用水和丙酮反复洗涤，真空干燥，即得利可君成品1050 g，收率：46.7%。熔点：157.4～158.9℃（文献值[3]：155～160℃）。1H-NMR （300 MHz，DMSO-d6）：δ：12.91（1H，s，COOH），7.30（5H，m，Ar-H），5.26（1H，d，Ar-CH），4.08（2H，m，CH2），3.98（1H，m，S-CH-N），3.72（1H，d，α-CH），3.13（1H，m，NH），2.72（1H，m，β-CH2），1.13（3H，t，CH3）。元素分析：C：56.83%、H：5.82%、N：4.85%、S：10.89%（理论值：C：56.93%、H：5.80%、N：4.74%、S：10.86%）。ESI-MS：[M+H]+296.1，[M+ Na]+318.1（分子量：295.35）。

3 讨 论

利可君工艺改进之后，避免减压蒸馏工序，操作简便，安全性高，便于工业化生产。中间体α-甲酰基苯乙酸乙酯的收率较文献收率[2]有明显提高，中间体中几乎不含苯乙酸乙酯，HPLC纯度达到95%以上（面积归一化法）。

获得的产品质量较之前的有明显的提升，有关物质能控制在0.1%以内，干燥失重低于3.0%，炽灼残渣低于0.1%，甲酯杂质也得到了很好的控制（低于0.1%），含量不低于99.0%（按干燥品计算），很好地满足了药用要求。

[1] 傅 霖，郑 虎.利血生合成工艺的改进[J].华西药学杂志，2006，21（2）：176-7.

[2] Foshkin VG,Kovaleva NS,Naidis FB,et al.Improvement of the technological method for the synthesis of Leucogen [J].Khimiko-Farmatsev-ticheskiiZhurnal, 1976,10(8):106-7.

[3] 俞 锋，孙国建，濮毅华.一种利血生原料和利血生片的制备方法：中国，200410054101.3[P].2005-06-22.