人类免疫缺陷病毒抗体初筛实验室的生物安全管理

梅小寒

湖北省丹江口市第一医院，湖北 丹江口 442700

为加强实验室生物安全，防止实验室交叉感染，本文试对HIV抗体初筛实验室的生物安全的若干问题进行初步探讨。

1 实验室要求

实验室主要配置：酶标仪、洗板机、洗眼装置，离心机生物安全柜。其中，生物安全柜应放置在没有气流明显流动的地方，避免生物安全柜在工作时受外界气流影响正常的内部层流。

2 实验室生物安全管理

实验室危害评估对新建成或已建HIV抗体检测实验室必须作一次实验活动危害评估。评估内容应根据各实验室现状、条件、人员，以及具体实验活动等诸多因素综合考虑。

2.2 健全实验室管理制度体系完善各类生物安全管理制度。应包括样本的处置与包藏管理、仪器的安全使用、消毒隔离措施、应急事故处理、实验废弃物处理、人员健康定期医学监护制度、职业暴露处理等。

2.3 个人防护实验室工作人员所采用的个人防护装备均应符合国家有关标准的要求。使用前应仔细检查，不使用标志不清或破损的防护用品。同时应根据本实验活动的特点，选择适当的个人防护用品，并正确使用。一次性的用品不可反复使用。

3 样本采集

3.1 HIV抗体检测只要采集血液样本。样本采集的工作人员应掌握相关专业知识和操作技能。能够有效地防止病原微生物扩散和感染。

3.2 在样本采集过程中工作人员必须清楚意识到待检样本的潜在感染性。操作时必须戴手套 (如果采集已知的HIV感染者或患者的样本时，应戴双层手套)，提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后不得使用手摘取针头。不得给注射器重新“戴帽”，避免刺伤手。针筒内的血要小心缓慢地沿管壁注入试管内，防止血液外溅。

3.3 使用后的真空采血器或普通注射器及止血棉球都含有待检样本的血液。必须立即放入含有消毒液的容器内，按有关要求消毒一定期限后，作为医疗废弃物处理，或放置于生物废弃袋中，在密封的情况下送去作高压灭菌处理。

4 样品转移

实验室间的远程运输需利用车、船、飞机等交通工具运输的样本、应采用世界卫生组织 (WHO)提出的三级包装系统。

5 样本接受、开启

实验室接受样本应在生物安全柜内开启包装件，并检查盛装样本的试管有无破损或渗出的情况。如发现溢漏应立即将存留的样本移出，对被污染的试管、试管架和盛器均需作严格消毒。

6 样本分离

6.1 离心机分离血清样本在离心前最好在实验室自然放置1～2h。在离心时，最好使用带有密封离心桶 (安全杯)或者密封转头的离心机分离血清。离心后，应在生物安全柜里开启试管。在生物安全柜内分离血清，操作时尽量避免产生气溶胶，工作人员的手臂动作幅度不能太大。以免影响安全柜内的空气层流，如果是无盖的试管，应在离心完毕后，静止30min后，再开启离心机盖。如发生试管破损，要对离心机进行严格消毒。

6.2 血清分离器械的处理操作完毕后，所有的吸管、Tip吸头、含血细胞的试管等废弃物应置于规定的已含适当消毒液容器内，小心移出生物安全柜，高压后焚烧。如使用滤纸片作为载体收集的样本，在实验室内使用缓冲液浸泡、离心收集样本的操作，亦参照上述要求处理。要求工作人员将所有实验操作移至生物安全柜中进行，安全柜内工作台面由左到右分别为相对清洁和污染区域。

7 样本检测

7.1 手工操作加样、混匀用移液器将分离好的血清在生物安全柜内加样至酶联免疫吸附试验 (ELISA)或其他试剂反应孔中，小心混匀，尽可能避免气溶胶的产生。封盖后，用托盘平移至温箱孵育;洗涤、溢出洗板机使用前应检查洗液针孔是否阻塞，如发现阻塞应尽快疏通，在洗涤过程中要注意洗涤液不能溢出;每次洗涤完毕，用蒸馏水洗涤几次，以免洗涤液中的成分产生结晶阻塞针孔，造成实验室环境污染。

7.2 自动化酶标仪检测 该仪器操作中存在有加样探针及洗涤的废液均应根据每次废液的量加入足够的消毒剂，作用规定时间后处理。

8 剩余样本处理

如需保藏的血清或血浆样本，应设有专用冰箱，登记造册入档专人保管。若专库保藏的，必须按国家高致病性样本管理要求保藏。不需保藏的所有标本，按实验室废弃物处置。

9 废弃物处置

9.1 从实验室出来的所有废弃物。包括不需要的样本 (血细胞、血清)、反应板试剂阴阳性对照、ELISA标记物、试剂包装盒等，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器或生物废物袋中。经高压无害处理后，密封容器或扎紧废物袋口。按环卫部门要求处置。有专人按特定程序和方法进行清洁和消毒，污染或可能造成污染的材料在带出实验室前均应进行严格消毒。

9.2 记录废弃物的处理应做好记录。

9.3 消毒效果检测可使用化学、生物指示带 (剂)法。每次高压灭菌需要的化学指示带，每月用生物指示剂来检测灭菌效果。

10 人员准入制度

实验室必须建立严格的人员准入制度，严禁非本职工作人员进人实验区域。

HIV抗体初筛实验室的生物安全作为体系管理，在实验室的管理工作中具备着极其重要的意义。在每次实验活动中，把可能对人员和环境发生的危害控制到最低。这些管理活动使原来一些不规范的操作受到约束和干预，但是，为了长治久安和每位工作人员的生命安全，，每个工作人员必须要树立科学、严谨的态度来搞好实验室生物安全管理工作。