高效液相色谱法测定人参补气胶囊中人参皂苷的含量

薛毅博 郭晓焕

河南省驻马店市食品药品检验所，河南驻马店 463000

高效液相色谱法测定人参补气胶囊中人参皂苷的含量

薛毅博 郭晓焕

河南省驻马店市食品药品检验所，河南驻马店 463000

目的建立人参补气胶囊中人参皂苷Rg1的高效液相色谱检测方法。方法高效液相色谱条件为：色谱柱：Diamonsil C18（150 nm×4.6 nm，5μm），流动相：乙腈-水（25︰75），紫外检测波长：204 nm，流速为 1.0 mL/min，柱温为30℃, 进样量为10μL。结果以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，计算得到回归方程Y=793 513X-7 482，R2=0.999 7，结果显示人参皂苷Rg1在0.100～0.902 mg/mL浓度范围内，其浓度与峰面积具有良好的线性关系，另外本法测定的精密度、稳定性、重复性及加样回收率考察均具有较好结果。结论本研究建立的人参补气胶囊中人参皂苷含量的高效液相色谱法具有快速、稳定性，可以用于本药物中人参皂苷Rg1的含量测定。

人参补气胶囊；高效液相色谱法；人参皂苷；含量检测

人参补气胶囊是由人参，红参须，生晒参3味中药材制成的中药胶囊制剂[1]，具有大补元气、补益脾肺、生津安神的功效，临床主要用于肺虚咳喘、津伤口渴、久病体虚、失眠惊悸等症[2]。随着本制剂在临床的应用不断增加，对本药物的质量控制也成为了一项值得关注的问题。本研究采用高效液相色谱法进行了人参补气胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定，确立了对于Rg1在本制剂中含量的测定方法，其结果快速、准确、重复性较好，现报道如下。

1 仪器与试剂

Agilent 1200高效液相色谱仪；乙腈（上海国药集团，色谱纯）；去离子水（自制）；其他试剂均为分析纯；人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所）；人参补气胶囊（广东宏兴集团股份有限公司宏兴制药厂，批号：120204）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性

色谱柱：Diamonsil C18（150 nm×4.6 nm，5μm），流动相：乙腈-水（25∶75），紫外检测波长：204 nm，流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。按Rg1峰计算理论塔板数应＞3 000，与相邻杂质峰分离度应＞1.5。

2.2 对照品与供试品溶液的制备

对照品：将12.5 mg人参皂苷Rg1对照品用甲醇溶液，定量至25 mL混匀即得。供试品：取药物1 g于40 mL甲醇中超声提取30 min，并用甲醇定量至50 mL，过滤，取25 mL滤液蒸干后，加入30 mL去离子水溶液，再加入30 mL乙醚振荡提取，分离水液后用30 mL正丁醇提取， 分离正丁醇部位减压干燥，再用20 mL甲醇溶液后过滤即得。

2.3 线性关系考察

精密称取50 mg Rg1对照品，加甲醇溶解并定量至50 mL，分别称取 Rg1 对照品溶液 0.1、0.3、0.5、0.7、0.9 mL，并加甲醇溶解并定量至10 mL，按上述测定条件测定，以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，计算得到回归方程Y=793 513X-7 482，R2=0.999 7。结果显示人参皂苷Rg1在0.100～0.902 mg/mL浓度范围内，其浓度与峰面积具有良好的线性关系。

2.4 精密度、稳定性及重复性考察

精密称取对照品溶液7次，按上述方法测定峰面积，结果显示人参皂苷Rg1的峰面积RSD为1.18%，表明仪器精密度良好。取供试品溶液，分别在 0、2、4、6、8、10、12 h 进样，按上述方法测定，结果显示RSD为0.85%，表明测定方法的稳定性良好。取同一批次样品，按供试品方法制备样品并进样测定，结果显示Rg1的平均含量为20.99 mg/g，RSD为1.19%，表明方法重复性良好。

2.5 加样回收率试验及样品含量测定

精密称取6份供试品各0.5 g于50 mL容量瓶中，分别加入1.0 mL对照品溶液，加入甲醇39 mL, 超声提取30 min，并用甲醇定量至50 mL，过滤，取25 mL滤液蒸干后，加入30 mL去离子水溶液，再加入30 mL乙醚振荡提取，分离水液后用30 mL正丁醇提取，分离正丁醇部位减压干燥，再用20 mL甲醇溶液后过滤得供试品溶液，按上述方法测定结果显示平均回收率为97.84%，RSD为0.71，表明回收率较好。取3批样品，按上述方法测定得3批样品中人参皂苷Rg1的含量分别为6.54 mg/粒、6.57 mg/粒、6.59 mg/粒。

3 讨论

本研究中建立的人参补气胶囊中人参皂苷Rg1含量的高效液相色谱测定法具有准确性高、稳定性强等特点，这与实验中进行的各项测定条件的细致考察密切相关。对于提取溶剂的考察，笔者分别选用了甲醇、30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇、95%乙醇为供试品提取试剂进行了提取，结果显示甲醇提取率要高于其它溶剂，因此选用甲醇作为提取试剂。超声提取时间作了 10、20、30、40、50、60 min 的考察，结果显示 30 min 后提取量基本一致，因此选择最短时间30 min作为提取时间。另外，流动相的选择则参考文献进行了预试[3-4]，采用乙腈-水（25∶75）为流动相，实验最终结果显示基线及分离效果都较好，与文献报道基本一致。对于检测波长的选择，本研究也做了相关考察，用对照品溶液进行了紫外分光光度法检测，200～800 nm波长扫描结果显示人参皂苷Rg1在204 nm波长时具有最大吸收度，因此本研究确定了204 nm的紫外检测波长。从本研究结果可以看到，无论是线性关系考察，还是精密度、稳定性、重复性和加样回收率试验均显示本方法具有良好的特性。

因此，本研究建立的人参补气胶囊中人参皂苷含量的高效液相色谱法具有快速、稳定及可靠性，可以用于本药物中人参皂苷Rg1的含量测定，对于实际药品的检验工作具有一定的指导意义。

[1]史红英，章小敏，王宇，等.人参补气胶囊的药物制剂工艺与质量控制研究[J].中国药剂学杂志，2010，4（12）：210-213.

[2]张欣，唐会美，张科.人参的现代复方制剂药效学与毒理学研究进展[J].药物与临床，2011，21（24）：328-332.

[3]李虎，沈晓明，王敏，等.人参皂苷类成分的高效液相色谱法分析条件控制与应用[J].中药成分分析学报，2009，12（24）：194-198.

[4]孟理分，李志，钟小琴，等.人参中有效成分的分离与检测手段方法分析探讨[J].临床中药与分析学杂志，2010，10（21）：231-233.

The HPLC method of ginsenoside content detection for the Qinseng-Tonifying-Qi capsule

XUE Yibo GUO Xiaohuan
Institute for Food and Drug Control of Zhumadian City, Zhumadian 463000, China

ObjectiveTo establish the high performance liquid chromatography method of ginsenoside content detection for the Ginseng-Tonifying-Qi capsule.MethodsThe detection condition as follows: the chromatographic column was Diamonsil C18(150 nm×4.6 nm,5μm), the mobile phases was acetonitrile-water(25︰ 75), the ultraviolet detection wavelength was 204 nm, the flow rate was 1.0 mL/min, the column temperature was 30℃ , the simple amount was 10μL.Results The regression equation(Y=793 513X-7 482，R2=0.999 7) was established based on the peak area A as Y-axis and concentration C as X-axis, the peak area has a good linear relation with concentration when the Ginsenoside concentration in the range of 0.100-0.902 mg/mL. In addition, the accuracy, stability, repeatability and recovery rate of this method was good.Conclusion The HPLC method this study established for the detection of ginsenoside in Ginseng-Tonifying-Qi capsule has a rapid, stable characteristic, and could be used in the ginsenoside Rg1 content detection.

Ginseng-Tonifying-Qi capsule; HPLC method; Ginsenoside; Content detection

R445

B

2095-0616（2012）18-105-02

2012-06-15）