芽孢杆菌及其提取物对兰花茎腐病的防治效果

朱秋潮，杨 惠，张甲辰，陈卫良

(1.浙江省绍兴市农业技术推广总站，浙江 绍兴312000;2.浙江大学 生物技术研究所，浙江 杭州310058;3.杭州广普生物科技有限公司，浙江 杭州311215)

兰花一直深受人们的喜爱与珍藏。2009年兰花被确定为浙江省省花，全省各地将兰花作为高利润的精细农业项目大力开发。但另一方面，随着盆栽兰花规模化种植和野生兰花的驯化与推广，近年新出现的兰花茎腐病发生越来越严重。在高温高湿的兰棚内，虽然适宜兰花的生长，但同时也是兰花茎腐病发生的最适条件。一般兰花发生茎腐病后，整丛兰花将被淘汰，若是名贵品种，损失严重。作者曾用多菌灵等常规药剂进行防治，但效果并不理想。兰花茎腐病是由镰刀菌引起的一种真菌病害，是目前兰花上的最严重病害。通常情况下，因茎腐病造成兰花死亡2%以上，有的甚至可达30%。有人估计浙江省每年因此病害而造成的损失都在几千万元以上。云南大理州调查2005年4-8月，仅因茎腐病造成兰花损失在1亿元以上。兰花茎腐病已严重威胁着兰花生长，特别是规模化的种植场。至今仍缺乏有效的药剂，兰花茎腐病被兰友们称为兰花的不治之症，是兰花种植的大敌。本实验利用生物菌株芽孢杆菌及其提取物防治兰花茎腐病，并取得了较好防治效果。

1 材料与方法

1.1 材料

供试兰花材料由中国春兰样品园基地提供。供试生防菌株Bacillus pumilus 223和 Bacillus subtilis A30由浙江大学生物技术研究所提供。生防菌株采用NA培养基，配方为:牛肉浸膏3.0 g·L-1，蛋白胨5.0 g·L-1，葡萄糖 2.5 g·L-1，调 pH值7.0左右。

1.2 防治制剂的制备

将生防菌株按5%(V/V)接种于NA培养液中，35℃下振荡培养24 h，使细菌细胞浓度达到107 mL-1以上，即为细菌培养液。所得细菌培养液在12 000 g离心20 min，所得上清液即为无菌提取液。

1.3 防治方法

1.3.1 防治作用

取已发病的兰花 (丛)，剔除球茎和叶基部已明显变褐、腐烂的兰苗，将余下的兰苗浸泡于生防菌株细菌培养液或无菌提取液中，浸泡过夜，移苗于新的培养钵中培养。以清水为对照，30 d后观察发病情况。防治效果/%=(对照发病率-处理发病率)/对照发病率×100。

1.3.2 预防作用

取健壮的兰花 (丛)，将生防菌株细菌培养液或无菌提取液灌根至盆底流出，10 d后再灌根1次。以清水为对照，30 d后观察发病情况。预防效果/%=(对照发病率 -处理发病率)/对照发病率 ×100。

2 结果与分析

2.1 防治作用

已发病的兰苗经生防菌株细菌培养液或无菌提取液浸泡处理后，所得结果见表1。

由表1可知，经B．pumilus 223细菌培养液和B．pumilus 223无菌提取液浸苗处理后，对兰花茎腐病的防治效果大于80%，具有较好的防治效果。

表1 生防菌株制剂对兰花茎腐病的防治效果

2.2 预防作用

健壮的兰花苗经生防菌株细菌培养液或无菌提取液灌根2次后，茎腐病的发病情况见表2。

表2 生防菌株制剂对兰花茎腐病的预防效果

由表2可知，经B．pumilus 223细菌培养液和B．pumilus 223无菌提取液灌根2次处理后，基本上能预防兰花茎腐病的发生，显示出很好的预防效果。

3 小结和讨论

芽孢杆菌是一类自然界分布十分广泛且多样性丰富的微生物类群，可通过抗生作用、竞争作用、诱导植物获得系统抗性和促进植物生长等多种作用机理防治植物病害，在植物病害防治方面具有巨大的应用潜力［1］，生防菌株 Bacillus pumilus 223对水稻纹枯病具有较好的防治效果［2］。

在本研究中发现，该菌株对兰花茎腐病也有较好的防治效果，可防治兰花茎腐病;另一菌株Bacillus subtilis A30对兰花茎腐病的防效明显不及Bacillus pumilus 223，这可能是由于不同芽孢杆菌菌种和菌株之间在作用机理、抗菌物质产生等方面的差异，还有待深入研究。

［1］ 齐爱勇，赵绪生，刘大群.芽孢杆菌生物防治植物病害研究现状 ［J］.中国农学通报，2011，27(12):277-280.

［2］ 程丹丹.水稻纹枯病生防潜力菌株短小芽孢杆菌223的初步研究 ［D］.杭州:浙江大学，2008.