摘 要: 实验课是基础学科教学中一个关键环节,它不仅与课堂讲授的基本理论、基本知识相结合,而且是学习后继课程和进行科研工作的基础,同时也是培养学生独立思考和理论联系实际能力的重要手段。
关键词: 生物实验 常用仪器 使用方法
如何在实验过程中正确使用实验仪器并顺利地完成实验尤为关键。下面我结合自身几年来的教学实践,谈一些体会。
一、容量玻璃容器的使用方法
1.吸管
吸管是生物化学实验最常用的卸量容器。移取溶液时,如果吸管不干燥,应预先用所吸取的溶液将吸管润洗2-3次,以确保所吸取的操作溶液浓度不变。吸取溶液时,一般用右手的大拇指和中指拿住管颈刻度线上方,把管尖插入溶液中,左手拿洗耳球,先把球内空气压出,然后把吸耳球的尖端接在吸管口,慢慢松开左手指,使溶液吸入管内。当液面升高至刻度以上时,移开吸耳球,立即用右手的食指按住管口,大拇指和中指拿住吸管刻度线上方再使吸管离开液面,此时管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上。略微放松食指,使液面平稳下降,直到溶液的弯月面与刻度标线相切时,立即用食指押紧管口,取出吸管插入接受器中,管尖仍靠在接收器内壁,此时吸管应垂直,与接收器约呈15°夹角。松开食指让管内溶液自然地沿器壁流下。
2.滴定管
可以准确量取不同定量的溶液或用于容量分析。常用的常量滴定管有25毫升及50毫升两种,其最小刻度单位是0.1毫升,滴定后读数时可以估计到小数点后两位数字,经常使用2毫升及5毫升半微量滴定管。这种滴定管内径狭窄,尖端流出的液体也小,最小刻度单位是0.01毫升至0.02毫升,读数可到小数点后三位数字。在读数前要多等一段时间,以便让溶液缓慢流下。
3.量筒
量筒不是吸管或滴定管的代用品,在准确度要求不高的情况下,用来量取相对大量的液体。不需加热促进溶解的定性试剂可直接在具有玻璃塞的量筒中配制。
二、显微镜的使用方法
1.准备工作
首先将显微镜的工作台擦干净,然后将要观察的标本和各种器具准备好。
2.显微镜的使用
(1)取用:将显微镜从镜箱取出,取出时一手握镜臂,一手托底座将其轻放在离工作台边缘8-10厘米处偏左的位置。
(2)低倍镜的使用
①对光:对光前,先安上合适的目镜(一般采用10×目镜),将10×、40×、100×物镜按照顺时针安在物镜转换器上,逆时针转动转换器使10×物镜对准载物台中央的通光孔。从目镜中观察,同时调节反光镜或接通电源,直至视场明亮、均匀为止。
使用双目显微镜对双目镜宽度要进行调节,用推或拉的方法调节两目镜之间的距离,直到在两个目镜上双眼同时观察时,两个图形的视场正好完全重合,此时镜筒刻度盘上所示的数字,就是观察者两眼瞳孔之间的距离。
根据物镜的放大倍数调节聚光镜的高度,使用油镜时由于放大倍数大,镜像亮度小,需要较强的照明,需要将聚光镜升至最高处。
调节可变光阑(光圈)使聚光镜的镜口率与物镜的镜口率一致,才能充分发挥物镜的分辨率,方法为:将显微镜调整到工作状态后,从目镜筒中拔出目镜,一边观察(向拔出目镜的目镜筒里看),一边缩小光阑,这时可看到缩小的光阑被物镜成的像,然后逐渐调大光阑,当光阑像的边缘与物镜通光孔黑圈的边缘一致时停止,这时的聚光镜镜口率与物镜镜口率就一致了。如显微镜可变光阑圆框上刻有表示口径的标尺,可调至物镜镜口率的80%,即物镜镜口率为0.65,则可变光阑的标尺调至0.65×80%=0.52即可。
②观察:将标本放置在载物台上,使标本对准通光孔正中,下降镜筒或升高载物台,并从侧面观察,使物镜下端和标本逐渐接近,但不能碰到盖玻片。从目镜观察,用粗准焦螺旋慢慢升起镜筒和下降载物台直到看到标本为止,再调节细准焦螺旋至物像清晰。
(3)高倍镜的观察
在低倍镜下,找到要进一步观察的部位,移至视野中心,再上升聚光镜、逆时针转动物镜转换器换上高倍镜。显微镜一般稍微调节一下细准焦螺旋即可看到清晰的物像。
3.观察后的处理工作及使用显微镜时应注意的事项
清洁:显微镜上的污物(残物或灰尘),用擦镜纸擦干净,若擦不干净可蘸少许二甲苯进行擦拭。
显微镜各部分的放置:擦完后,把物镜转离光轴,把反光镜转到与载物台垂直的方向,以减少灰尘粘落上面,而后罩上镜套,小心地放回镜箱内,保存备用。
最后谈一下使用显微镜时应注意的事项。
(1)取放时动作一定要轻,切忌震动和暴力,否则会造成光轴偏斜而影响观察,而且光学玻璃也容易损坏。
(2)由于物镜的螺丝口容易损伤,安装物镜时要特别小心,即先向左方倒转一小段,凹凸双方吻合后再向右方旋转,不要转得太紧,轻轻捻到头,再稍紧即可。
(3)镜检标本应严格按照操作程序进行,观察时要从低倍镜开始,看清标本后再转用高倍镜、油镜。
(4)使用油镜时一定要在盖玻片上滴油后才能使用。油镜使用完后,应立即将镜头、盖玻片上的油擦干净,否则干后不易擦去,以致损伤镜头和标本。但应注意二甲苯用量不可过多,否则,物镜中的树胶会溶解,导致透镜歪斜甚至脱落,盖玻片移动甚至连同标本一起融掉。
(5)使用时不可用手摸光学玻璃部分,如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法。
(6)使用的盖玻片和载玻片不能过厚或过薄。标准的盖玻片为0.17±0.02毫米,载玻片为1.1±0.04毫米。过厚或过薄将会影响显微镜成像及观察。
参考文献:
[1]基础生物化学实验.高等教育出版社.