柴黄颗粒对LPS诱导的鸡发热模型的影响

郭群 刘睿芬 毕凤荷 张建辉 （天津市海纳德动物药业有限公司 天津300456）

柴黄颗粒对LPS诱导的鸡发热模型的影响

郭群 刘睿芬 毕凤荷 张建辉 （天津市海纳德动物药业有限公司 天津300456）

柴胡、黄芩、葛根等是古方小柴胡汤的加减方。实验通过观察柴黄颗粒（CHKL）0.2 g/kg、0.6 g/kg、1.0 g/kg剂量对80 μg/kg LPS诱导鸡发热模型的影响，考察了它们的解热作用和对LPS的耐受作用。结果发现，0.6g/kg、1.0g/kg剂量的CHKL对相同剂量的LPS诱导鸡发热均有显著解热作用；但不同剂量的CHKL在起效时间和作用效果上有所区别。

兽医学 柴胡 黄芩 葛根 颗粒 LPS 解热

随着集约化养殖程度的增高，养殖密度增加，空气流通不够，或气候突然变化等影响，鸡群很容易大面积发病，尤其是季节交替时发病率更高，给养殖户造成较大的经济损失。

家禽外感风寒引起的发热、寒颤、扎堆等症状，如不及时治疗损失严重，尤其是雏鸡死亡率比较高。在春冬、秋冬两季交替过程中整体鸡群发病表现为发热、采食量降低、饮水量降低、精神沉郁、扎堆、寒颤等症状，随着就出现甩头、啰音、咳嗽喘气等气管、支气管、气囊、肺等感染，造成免疫力下降，引发整体鸡群病毒和细菌的混合感染。目前治疗主要以抗菌化学药品为主，但复发率高。由于家禽消化道短，对中药散剂的利用率较低，导致中药的疗效不突出。采用中药提取物制备的制剂产品用于家禽的很少，如双黄连口服液（国标）、清解合剂（地标升国标）等，远远不能满足养殖市场的需要。柴黄颗粒临床用于禽外感风寒所致的发热重、恶寒轻、精神萎靡、寒颤和轻微腹泻等，效果较好。经市场调研具有较好的市场潜力和经济效益，在推动健康养殖和维护食品安全方面也具有积极的意义。

1 材料

1.1 试验动物

海兰褐蛋公雏，16日龄，体重平均125±10 g。

1.2 试剂

柴黄颗粒，天津生机集团股份有限公司研制；内毒素（LPS标准品，编号：L2008-25mg；批号：028K2340），美国 sigma 公司生产。

2 方法

2.1 动物分组及造模

将 150只 16日龄试验鸡随机分成高（1.0 g/kg）、中（0.6 g/kg）、低（0.2 g/kg）3个剂量组、健康对照组和模型组，每组30只试验鸡。对以上剂量组和模型组按80 μg/kg进行内毒素腹腔注射，健康对照组按注射量注射灭菌后的生理盐水；造模后120 min，给药组按剂量灌服CHKL，健康对照组同剂量灌服生理盐水；给药5天停药后，给中剂量组按80 μg/kg进行内毒素腹腔注射。

2.2 检测指标

造模前2天，每天2次（上午9:00和下午14:00）测定各组实验鸡的基础体温（肛温），统计基础温度，并做成曲线；造模后，分别在 30 min、120 min、240 min、360 min、480 min 时间测定肛温，计算体温变化值。

2.3 统计学方法

各组数据用平均数±标准误差表示，多组数据采用SPASS11.5统计分析软件进行单因素方差分析，组间比较采用百分数资料差异显著性检验。

3 结果

图1 鸡只基础体温曲线图

试验结果表明，各试验组鸡只基础体温无显著性差异（P＞0.05）。

3.1 基础体温具体结果见表1和图1

表1 鸡只基础体温（n=30）

3.2 CHKL对80 μg/kg剂量的LPS诱导鸡只发热的影响

CHKL对80 μg/kg剂量的LPS诱导鸡只发热的影响结果见表2、表3和图2。

表2 CHKL对鸡只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同时间T的表2 影响（n=30）

表3 CHKL对鸡只腹腔注射80μg/kg LPS后不同给药天数表2 T的影响（n=30）

图2 CHKL对鸡只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同给药天图2 数T的影响（℃）

试验结果表明：造模前，模型组、CHKL 3个剂量组、健康对照组体温比较无显著（P＞0.05）差异；造模后，模型组和CHKL 3个剂量组的体温与健康对照组相比，有显著性差异（P＜0.05）；给药后30 min，CHKL 3个剂量组与模型组相比均有显著差异（P＜0.05），CHKL中剂量组、低剂量组和高剂量组比较有显著性差异（P＜0.05）；给药后 120 min 至 120 h，CHKL低剂量组与中剂量组和高剂量组比较有显著性差异（P＜0.05），CHKL中剂量组和高剂量组比较无显著性差异（P＞0.05）。

3.3 第二次注射内毒素对80 μg/kg剂量的LPS诱导鸡只发3.3 热的时间和强度的影响

给予服用5天CHKL中剂量组的鸡只按80 μg/kg剂量第二次腹腔注射内毒素，结果见表4和图3。

表4 CHKL对鸡只第二次腹腔注射80μg/kg LPS后不同时间T值的影响（n=30）

图3 80 μg/kg LPS剂量第二次注射的温度变化曲线图

试验结果表明：腹腔注射LPS 120 min后，健康对照组和CHKL剂量组体温均有所升高，但给予5天后的CHKL剂量组体温达到最高点的时间延长（4 h延至6 h），强度明显较未灌服CHKL弱（42.54℃降至42.08℃）。表明服用CHKL鸡只具有抑制内毒素引起的体温升高，延缓体温上升时间的特性，说明CHKL具有抑制内毒素致热作用。

4 讨论

4.1 发热模型的选择

由于LPS（内毒素）诱导的发热表现为双相热和三相热，并伴有寒颤、精神萎靡和轻微腹泻等症状，与临床感染性炎症所致的发热相似，是经典的炎性发热模型，常用于筛选解热药物。关于鸡采用LPS致热筛选家禽用解热药物的筛选目前国内报道较少，本处方产品主要由柴胡、黄芩、甘草等多味药材组成，临床用于家禽外感风寒所致的发热、寒颤、精神沉郁、轻微腹泻等症，通过该法初筛后用于临床放大实验具有指导意义。

4.2 给药点的选择

从以上结果可以看出注射内毒素后，鸡只体温在1.5～4 h内快速上升，4 h达最高点，然后缓慢下降，这时精神状况未见明显改善，12 h后体温恢复正常。因此选择给药点非常关键，本实验选择2 h处给药，旨在观察体温快速上升过程中药物的解热作用，结果表明CHKL确有显著的解热作用。

4.3 中药的抗内毒素作用

由于中药的组分较多，报道其对内毒素有作用的药材不少，柴胡、黄芩、甘草等药材均在其中。本实验设计对CHKL中剂量组进行第二次腹腔注射相同剂量和浓度的内毒素，结果鸡只对内毒素具有耐受性，体温达最高点的时间延缓，强度减弱，表明CHKL具有一定的抗内毒素作用，具体用于预防的剂量等技术参数有待于进一步研究。■

[1]唐晓峰，薛漫清，王晖，等.大鼠发热模型及发热机制的研究进展[J].广东药学院学报，2009，25（3）：327-331.

[2]孙明瑜，谢鸣，高琳.小柴胡汤合煎液与分煎合液对不同剂量LPS诱导的大鼠发热模型的影响 [J].上海中医药杂志，2003，37（10）：44-47.

[3]高琳，谢鸣，孙明瑜.柴苓合煎液对LPS诱导的大鼠发热模型的影响[J]. 中国试验方剂学杂志，2003，9（6）：22-25.

[4]陈双萍，范泉，韩宁林，等.热毒清口服液对内毒素性发热家兔体温的影响[J].中医药临床杂志，2006，18（3）：247.

2011-05-09