锦灯笼种子油超临界CO2萃取及脂肪酸成分GC/MS分析

刘春红

(长春大学 特殊教育学院，长春 130022)

锦灯笼种子油超临界CO2萃取及脂肪酸成分GC/MS分析

刘春红

(长春大学 特殊教育学院，长春 130022)

研究采用超临界CO2萃取技术提取锦灯笼种子油，经皂化和甲酯化，用GC－MS联用法分析和鉴定脂肪酸组成。结果表明，从锦灯笼种子油中共检出15种脂肪酸成分，主要是8－十八碳烯酸甲酯(58.40%)、软脂酸甲酯(20.29%)和硬脂酸甲酯(14.60%)。其中不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的相对含量分别为60.88%和39.12%。

锦灯笼;脂肪酸;超临界CO2;萃取气相色谱－质谱

锦灯笼为茄科(Solanaceae)植物酸浆［Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makin］的干燥宿萼或带果实的宿萼，又名红姑娘、挂金灯。具有清凉解毒，利咽，化痰，利尿等功效，是常用的清热解毒药，历代本草多有记载。锦灯笼果实是我国的传统中药，锦灯笼含甾体类、生物碱和甾醇类等几类化学成分［1，2］。现代研究表明，锦灯笼具有抑菌、抗炎、抗氧化和降血糖等多方面的药理作用［3－5］。目前关于锦灯笼种子脂肪酸成分的研究未见报道。本研究采用超临界CO2萃取技术提取锦灯笼种子油，经皂化和甲酯化的脂肪酸，用GC-MS联用法分析和鉴定脂肪酸组成。

1 材料与方法

1.1 实验材料

锦灯笼药材2010年9月采收于长春市郊，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定为茄科(Solanaceae)植物酸浆［Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makin］的成熟果实。锦灯笼鲜果挤压破碎后分离种子，自然干燥后粉碎(20目)，备用。

1.2 仪器和试剂

Speed sfe prime型超临界CO2萃取装置(美国ASI公司);HP5890(Ⅱ)GC/HP5988MS气相色谱质谱联用仪(美国HP公司);FZ102微型植物粉碎机(黄骅市中兴有限责任公司)，SY-2000型旋转蒸发仪(上海亚荣)。乙醚、甲醇、氢氧化钾等化学试剂均为国产分析纯。

1.3 方法

1.3.1 超临界CO2萃取

称取锦灯笼种子粗粉(约20目)10 g，投入超临界萃取釜中进行萃取(压力50 MPa，温度60℃，萃取时间为3 h)，得到黄色油状萃取物，置冰箱中4℃保存，备用。

1.3.2 皂化和甲酯化

取上述油样0.2ml于10ml磨口试管中，0.5mol/l KOH-MeOH液4ml，于60℃下皂化反应30min，滴加2.0mol/l盐酸调pH=2，60℃水浴挥尽甲醇。加入乙醚和水各2ml，充分混匀，萃取分层，取乙醚层(上层)，挥尽乙醚至干，得脂肪酸样品。上述干燥样品加入2.5%H2SO4-MeOH液2ml，于60℃下反应1h，进行甲酯化。加入乙醚和水各2ml，充分混匀，萃取分层，取乙醚层(上层)，挥尽乙醚至干。

1.3.3 GC/MS分析

色谱条件:HPS石英毛细管柱(25 m×22mm×20.0);载气为高纯氦气，恒定流量为0.8 mL/min;程序升温:50℃保持5 min，3℃/min升至180℃，6℃/min升至290℃，保持40 min。进样口温度:310℃;分流比:50:1。质谱条件:离子源温度为230℃;传输线温度为260℃;扫描范围:35～600amu:电子能量:70 eV;电离方式:EI;光电倍增:270 V。

2 结果与讨论

目前植物油的提取主要采用传统压榨法和溶剂萃取法，压榨法效率低，溶剂萃取法残留溶剂容易造成污染，超临界CO2萃取法是近年开发的一项化工分离新技术，其所用的超临界流体由于独特的临界性质，是一种优良的溶剂。萃取具有高效、无污染、操作简单、易于控制等优点［6，7］。与传统方法相比，超临界流体萃取能保持提取脂肪油的纯天然特性。近年来，超临界CO2萃取法已广泛用于植物脂肪酸的提取中［8，9，10］。本研究采用超临界CO2萃取法提取锦灯笼种子脂肪酸，更真实、全面地反映锦灯笼种子脂肪酸的化学组成。

图1 锦灯笼种子油脂肪酸总离子流图

采用气相色谱－质谱联用(GC－MS)技术对甲酯化的脂肪酸进行分析，其总离子流色谱图(TIC)如图1所示。经气相色谱面积归一化法测定了各组分的百分含量，所得质谱图经计算机质谱数据库检索，并按各峰的质谱裂片图与文献资料核对，确认分离出脂肪酸15种结果见表1。主要化学成分为:8－十八碳烯酸甲酯(58.40%)、软脂酸甲酯(20.29%)、硬脂酸甲酯(14.60%)等。由表1可以看出，锦灯笼种子脂肪酸以不饱和脂肪酸为主，占脂肪酸总量的60.88%，饱和脂肪酸的相对含量为39.12%。

表1锦灯笼种子脂肪酸组成及相对含量

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Extraction of Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makin Seed Oil with Supercritical CO2and Analysis of Fatty Acids by GC/MS

LIU Chun-hong
(Special Education Collage，Changchun University，Changchun，130022，China)

Seed oil of Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makin is extracted with supercritical CO2，and then is saponified and esterfied.15 fatty acids in Physalis alkekengi L seed oil are separated and identified by GC-MS.The results show that the total fatty acids of the oil are composed of 39.12%saturated fatty acids and 60.88%unsaturated fatty acids.Furthermore，8-Octadecenoic acid(58.40%)，Hexadecanoic acid(20.29%)and Octadecanoic acid(14.60%)are the main fatty acids in the seed oil.

Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makin;fatty acid;supercritical CO2;GC/MS

R284.1

A

1009－3907(2011)08－0055－02

2011-06-03

刘春红(1976-)，女，吉林通化人，讲师，硕士，主要从事中药学、生理学等方面的研究。

责任编辑:钟 声