气相色谱法测定甲磺酸胺银杏内酯B中的大孔树脂有机溶剂残留

武晓静 徐 慧 庄件兵 赵厚民

(江苏省理化测试中心，江苏省食品营养成分与有毒有害物质检测中心，南京 210042)

气相色谱法测定甲磺酸胺银杏内酯B中的大孔树脂有机溶剂残留

武晓静 徐 慧 庄件兵 赵厚民

(江苏省理化测试中心，江苏省食品营养成分与有毒有害物质检测中心，南京 210042)

建立了气相色谱法测定甲磺酸胺银杏内酯B中正己烷、苯、甲苯、萘等大孔树脂有机溶剂残留量的方法。以正庚烷为内标，样品经溶解直接进样测定，色谱柱为DB－1毛细管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm)。在一定浓度范围内，有机溶剂浓度与其色谱峰面积与正庚烷色谱峰面积之比呈良好的线性，线性相关系数r＞0．999。有机溶剂添加回收率为93．8% ～100．7%，检出限为0．125～0．5μg/mL。该方法快速、准确、操作简便，能满足大孔树脂中苯等有机溶剂残留的定量检测。

甲磺酸胺银杏内酯B 大孔树脂 气相色谱 有机溶剂残留 内标法

DM－130型大孔树脂为苯乙烯骨架，根据大孔树脂的基本骨架、填充剂和致孔剂的性质，其大孔树脂中可能含有烷烃类、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等残留［1，2］，因甲磺酸胺银杏内酯B的起始原料银杏内酯B((80%)原料在其提取过程中采用了DM－130型大孔树脂，根据中国药典2005年版二部附录Ⅷ P《残留溶剂测定法》［3］，其中苯属于第一类溶剂，限度要求为0．000 2%，正己烷、甲苯、二甲苯属于第二类溶剂，限度要求分别为0．029%、0．089%、0．217%，其它几种溶剂在 2005年版药典中未作具体要求，参照SFDA(The State Food and Drug Administration)对大孔树脂的限度规定，以0．0020%计，对气相色谱法测定样品中可能残留的正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等有机溶剂残留进行了研究。

目前有关大孔树脂有机溶剂残留的测定方法多数采用顶空气相色谱法［4，5］。笔者采用直接进样法，建立了大孔树脂溶剂残留的试验方法。直接进样法不受顶空装置的限制，具有操作简单、快速、准确等特点，可以满足大多数生产厂家苯乙烯型大孔树脂有机溶剂残留的检测要求。

1 实验部分

1．1 主要仪器与试剂

气相色谱仪:Varian CP－3800型，配CP－8410自动进样器，氢火焰离子化检测器(FID)，美国Varian公司;

正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、正庚烷内标物:均为分析纯，南京化学试剂有限公司;

二乙烯基苯:含量55%，上海安谱科学仪器有限公司;

萘:含量不低于99．0%，上海化学试剂一厂;甲醇:色谱纯;

甲磺酸胺银杏内酯B供试品:批号分别为071101、071212、091201，由某生产厂家提供。

1．2 色谱条件

色谱柱:DB－1毛细管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm);气化室温度:220℃;柱温:50℃，保持 3 min，以10℃/min升至200℃，再以20℃/min升至230℃，保持30 min;检测器温度:260℃;氮气流速:1 mL/min;氢气流速:30 mL/min;空气流速:300 mL/min;分流比为 1∶10;进样体积:1 μL。

1．3 标准储备溶液配制

分别精密量取正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘适量，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶液稀释，配制成正己烷(1 000μg/mL)、癸烷 (800 μg/mL)、苯 (500 μg/m)、甲 苯 (400 μg/mL)、二甲苯 (8 000 μg/mL)、苯乙烯 (800 μg/mL)、二乙烯基苯(800 μg/mL)、萘(800 μg/mL)标准储备溶液，以及正庚烷内标储备溶液(2500μg/mL)，放在4℃冰箱内保存。使用时分别精密量取适量上述标准储备液和内标储备液，配制成实验所需系列标准溶液。

1．4 供试品溶液的配制

精确称取银杏内酯衍生物供试品粉末约1．0 g于10 mL容量瓶中，准确加入正庚烷内标储备液100μL，加入适量甲醇，超声10 min，用甲醇稀释定容至刻度，混匀即得。

2 结果与讨论

2．1 系统适用性

选用DB－1色谱柱，对有机溶剂标准混合溶液进样分析。其中二乙烯基苯中添加乙基乙烯基苯作为稳定剂，故色谱图中在8．766、8．907 min处有两个乙基乙烯基苯峰，但不影响分离，目标物均达到了良好的分离。分离度(R s)依次为 9．6、9．9、10、16、1．6、5．0、1．2、33、19、2．1、4．5、2．8、12，色谱分离结果见图1。在相同的实验条件下，甲磺酸胺银杏内酯B供试品均无干扰峰。

图1 有机溶剂色谱分离图

2．2 标准曲线方程

分别精密量取1．3中配制的各标准储备液适量与正庚烷内标储备液100μL，稀释配制成系列标准溶液，编号分别为1#～5#，按1．2色谱条件分别测定。以有机溶剂与正庚烷色谱峰的峰面积之比为纵坐标(y)，以有机溶剂浓度为横坐标(x)进行线性回归，各有机溶剂的线性方程、线性范围及其相关系数见表1。

表1 有机溶剂的标准曲线及其相关系数

2．3 检出限

按照1．2色谱条件，取1．3配制的标准储备液逐级稀释至适当浓度，进样分析，以3倍信噪比计算得各溶剂的检出限分别为正己烷 0．16μg/mL、苯0．10 μg/mL、甲苯 125 μg/mL、二甲苯0．25 μg/mL、苯乙烯 0．5 μg/mL、癸烷 0．25 μg/mL、二乙烯基苯0．5 μg/mL、萘 0．25 μg/mL。

2．4 精密度试验

取2．2中配制的3#标准溶液，按1．2色谱条件连续进样5次，记录色谱图。计算各溶剂与内标物色谱峰的峰面积比值及相对标准偏差，各有机溶剂的相对标准偏差分别为:正己烷0．34%、苯1．2%、甲苯 0．15%、二甲苯 0．29、苯乙烯 1．3%、癸烷0．62%、二乙烯基苯 1．2%、萘 0．43%，说明本法精密度良好。

2．5 回收试验

分别准确称取供试品(批号为071101)3份于10 mL容量瓶中，分别加入适量标准储备液和内标储备液100μL，加入适量甲醇，超声10 min，用甲醇稀释定容至刻度，按1．2色谱条件进样分析。分别计算各溶剂与内标物色谱峰面积比值，并计算各组分的回收率，结果见表2。

表2 回收试验结果

2．6 样品测定

按照1．2色谱条件和1．4供试品溶液制备方法，采用内标定量法测定了批号为071101、071212、090201的3批银杏内酯原料中的有机溶剂残留量，结果均未检出。

3 结语

本实验建立的气相色谱法不受顶空装置的限制，具有操作简单、快速，测量准确等特点，能满足苯乙烯型大孔树脂有机溶剂残留的检测要求。

［1］ 范伟赢，王柏章．大孔吸附树脂分离法对提纯中药有效成分的影响因素［J］．广东医学院学报，2008，26(5):544－546 ．

［2］ 凌宁生，刘志青，李林，等．中药用D－101型大孔树脂苯系列残留物分析研究［J］．中草药，2002，33(2):122－124．

［3］ 中华人民共和国药典委员会．中华人民共和国药典［M］．二部．北京:化学工业出版社，2005:附录54．

［4］ 刘东，杨敏芝，杜守颖，等．顶空气相色谱法测定大孔树脂提取物中的残留溶剂研究［J］．药物分析杂志，2009(11):1 877－1880．

［5］ 来国防，程宾，周兰，等．顶空气相色谱法检测三七总皂苷中大孔树脂残留物［J］．商丘师范学院学报，2009(6):71－73．

ABSTRACTA method was developed for the determination of n － hexane，n － decane，benzene，toluene，styrene，naphthalene etc．residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate by GC．Sample was injected directly after dissolving with n－heptane as internal standard．The column was DB －1 capillary column(30 m ×0．25 mm，0．25 μm)．The concentration of organic residues were linear with peak areas ratio of it to n－heptane in certain range，correlation coefficient r＞0．999．The recoveries of organic solvents were 93．8% －100．7%，the detection limitswere in the range of0．125 －0．5 μg/mL．Themethod is fast，accurate and simple for the analysis of organic residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate．

KEYWORDSdimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate，macroporous resin，GC，organic residue

DETERM INATION OF ORGANIC RESIDUES IN DIMETHYLAM INOETHYL GINKGOLIDE B MESYLATE BY GC

Wu Xiaojing，Xu Hui，Zhuang Jianbin，Zhao Houmin
(Jiangsu Test Center for Physics and Chemistry，Jiangsu Test Center for Nutrition and Toxicant in Food，Nanjing 210042，China)

2010-10-25